Bu videoda metabolit profilleme için meme kanseri hücre örneklerini hazırlama tekniği açıklanmaktadır. Meme kanseri hücreleri, östrojen reseptör alfasına bağlanan ve metabolit bileşiminde değişime neden olan estradiol ile tedavi edilir.
Protocol
1. Metabolomics Tahlil Numune Hazırlama Hücre Kültürü ve Tedavisi Büyüme ortamında 10 cm plaka başına 400.000 MCF7 hücresi tohumu. Her tedavi için üç örnek hazırlayın. Algılama için yeterli hücre almak için her örnekte iki plaka kullanın. 3. günde, ortamı çıkarın ve hücrelere 10-8 M Estradiol veya E2 olsun veya olmayın 5 ml taze ortam ekleyin. Hücreleri 24 saat boyunca tedavi edin (nemlendirilmiş% 5 CO2 atmosferinde 37 °C). Ö…
Sample Preparation for Metabolomics: A Method to Prepare Cell Samples for Metabolite Profiling. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20227, doi: (2023).