Summary

Amyotrofik Lateral Skleroz için Fare Modeli (ALS) Klinik Test ve Omurilik Kaldırma

Published: March 17, 2012
doi:

Summary

Amiyotrofik lateral skleroz (ALS) için bir fare modelinde klinik ve davranışsal incelenmiştir. Beraberindeki immünohistolojik analizi için bir önkoşul olarak omurilik hazırlanmasında detaylı bir şekilde anlatılır.

Abstract

Amyotrofik lateral skleroz (ALS) motonöronlar ilerleyici dejenerasyon ile sonuçlanan ölümcül bir nörodejeneratif hastalıktır. Başlangıçlı Tepe sporadik hastalık ve ailesel hastalık için 50 yıl 60 yıl civarındadır. Ilerici seyri nedeniyle, hastaların% 50 semptom başlangıcından itibaren 30 ay içinde ölür. Bu hastalığın tedavisi için yeni bir seçenek değerlendirmek üzere, ALS genetik fare modelleri gibi SOD1 (G93A) mutasyonu olarak SOD geni insan ailevi mutasyonlar, esas oluşturulan edilmiştir. Modelinde değerlendirilmesi gerekir en önemli husus, genel sağkalım, klinik seyir ve motor fonksiyon vardır. Burada, klinik değerlendirme göstermek, iki davranışsal motor testleri ile iletim göstermek ve tüm parametreler için kantitatif skorlama sistemleri sağlamaktadır. ALS fare modelinin kapsamlı bir analizi genellikle spinal kord bir immunohistokimyasal inceleme gerektirdiğinden, biz bunu uygulayarak ayrıntılı olarak hazırlanması göstermekrsal laminektomi yöntemi. Örnek histolojik bulgular gösterilmiştir. ALS fare modeli üzerinde çalışmalar tasvir muayene yöntemlerinin kapsamlı bir uygulama araştırmacının güvenilir sonra insan klinik araştırmalar için bir temel sağlayabilir gelecekteki tedavi seçenekleri test sağlayacaktır.

Protocol

Hayvanlar Jackson Laboratory (# 002.726) 1 den satın alınmıştır. Onlar klinik attı ve motor fonksiyon (rotarod testi) ve kas gücü (tel deneyi asılı) bir teste tabi tutulmaktadır. Tüm bu testleri ve hayvanların daha sonra öldürülmesi omurilik hazırlamak amacıyla hayvan deneyleri bir şekilde yürütülmesi için Yerel yönergelere çok yakın uygun olarak yapılmıştır. 1. Klinik Puan Apart vücut ağırlığı fareler için değerlend…

Discussion

SOD1 (G93A) genetik fare modelinde insan Amyotrofik lateral skleroz 8 karşılaştırılabilir ilerleyici motor nöron kaybı, hastalığın klinik seyrini incelemek için değerli bir hayvan modelidir. Farklı tedavi paradigmalarının çeşitli bu modelin içinde değerlendirilerek daha sonra insan klinik çalışmalarda 8-10 test için bir temel temsil edilmiştir. Bu farelerde deneysel bir tedavi çalışmasında önemli farklılıklar tespit edebilmek için, en az 24 çöp eşleştirilmiş cin…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

LT Üniversitesi Tıp Göttingen Forschungsförderungsprogramm gelen hibe desteği almıştır. PL ve MB Beyin (CMPB), Göttingen Moleküler Fizyoloji için DFG Araştırma Merkezi tarafından desteklendi. Yazarlar, ses ve video düzenleme ile yardım videografisi ve Birgit Liebau yardım için Dr Lars Tatenhorst teşekkür ederim.

Materials

  Manufacturer Ordering Information
Behavioral testing    
Rota-Rod for Mice Ugo Basile, Comerio, Italy # 47600
Hanging wire device Custom-made  
 
Spinal Cord Preparation    
Operation Table
Operation lamp
Protective gloves
   
“Iris” Scissors, angled to side Fine Science Tools, Heidelberg, Germany 14063-09
Cohan-Vannas Spring Scissors, straight Fine Science Tools, Heidelberg, Germany 15000-10
Micro forceps Hammacher, Solingen, Germany HWC 111-10
Scalpel “präzisa plus” Dahlhausen, Köln, Germany 11.000.00.510, FIG 10

References

  1. Gurney, M. E. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu, Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
  2. Weydt, P. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
  3. Crawley, J. N. Behavioral phenotyping strategies for mutant mice. Neuron. 57 (6), 809-818 (2008).
  4. Miana-Mena, F. J. Optimal methods to characterize the G93A mouse model of ALS. Amyotroph. Lateral Scler. Other Motor Neuron Disord. 6 (1), 55-62 (2005).
  5. Zhong, Z. Activated protein C therapy slows ALS-like disease in mice by transcriptionally inhibiting SOD1 in motor neurons and microglia cells. J. Clin. Invest. 119 (11), 3437-3449 (2009).
  6. Pitzer, C. Granulocyte-colony stimulating factor improves outcome in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Brain. 131 (Pt. 12), 3335-3347 (2008).
  7. Gowing, G. Ablation of proliferating microglia does not affect motor neuron degeneration in amyotrophic lateral sclerosis caused by mutant superoxide dismutase. J. Neurosci. 28 (41), 10234-10244 (2008).
  8. Scott, S. interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
  9. Turner, B. J., Talbot, K. Transgenics, toxicity and therapeutics in rodent models of mutant SOD1-mediated familial ALS. Prog Neurobiol. 85 (1), 94-134 (2008).
  10. Corse, A. M. Preclinical testing of neuroprotective neurotrophic factors in a model of chronic motor neuron degeneration. Neurobiol Dis. 6 (5), 335-346 (1999).
  11. Knippenberg, S. Significance of behavioural tests in a transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Behav Brain Res. 213 (1), 82-87 (2010).
  12. Burgess, R. W., Cox, G. A., Seburn, K. L. Neuromuscular disease models and analysis. Methods Mol. Biol. 602, 347-393 (2010).
  13. Hayworth, C. R., Gonzalez-Lima, F. Pre-symptomatic detection of chronic motor deficits and genotype prediction in congenic B6.SOD1(G93A) ALS mouse model. Neuroscience. 164 (3), 975-985 (2009).
  14. Ludolph, A. C. Guidelines for preclinical animal research in ALS/MND: A consensus meeting. Amyotroph Lateral Scler. 11 (1-2), 38-45 (2010).
  15. Boillee, S. Onset and progression in inherited ALS determined by motor neurons and microglia. Science. 5778 (3), 1389-1392 (2006).

Play Video

Cite This Article
Günther, R., Suhr, M., Koch, J. C., Bähr, M., Lingor, P., Tönges, L. Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS). J. Vis. Exp. (61), e3936, doi:10.3791/3936 (2012).

View Video