Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

C. ايليجانس الانجذاب الكيميائي الفحص

doi: 10.3791/50069 Published: April 27, 2013

Summary

وهناك طريقة لتقييم كمي لاستجابة الكيميائي من

Abstract

استخدام العديد من الكائنات الحية الكيميائي للبحث عن مصادر الغذاء، وتجنب المواد الضارة، وتجد زملائه. انواع معينة ايليجانس ديه السلوك الكيميائي للإعجاب.

فرضية وراء اختبار استجابة من الديدان إلى الرائحة هي وضعها في منطقة ومراقبة حركة أثار ردا على الرائحة. حتى مع العديد من المقايسات المتاحة، وتحسين دودة انطلاق الموقع النسبي لكلا من التحكم ومناطق اختبار، مع التقليل من التفاعل من الديدان مع بعضها البعض، مع الحفاظ على حجم عينة كبيرة لا يزال التقدم في العمل 1-10. الطريقة الموضحة هنا يهدف لمعالجة هذه القضايا عن طريق تعديل مقايسة التي وضعتها Bargmann وآخرون. 1. وينقسم طبق بتري إلى أربعة أجزاء، وتتم تسمية اثنين من الأرباع مقابل وضع علامة "اختبار" واثنين من "السيطرة". يتم وضع مخدر في جميع مواقع المراقبة والاختبار. يتم وضع الديدان في وسط لوحة مع circlه ملحوظ في جميع أنحاء المنشأ للتأكد من أن الديدان غير متحركة سيتم تجاهل. الاستفادة من وجود نظام أربع رباعي بدلا من واحد أو اثنين 2 1 يزيل التحيز في حركة الديدان، كما هي على مسافة واحدة من اختبار ومراقبة العينات، بغض النظر عن أي جانب من أصل بدأوا. هذا تلتف مشكلة الديدان إجبارهم على السفر من خلال مجموعة من الديدان الأخرى للرد على الرائحة، والتي يمكن أن تؤخر الديدان أو إجبارهم على اتخاذ طريقا غير مباشر، مما أسفر عن تفسير غير صحيح من طريق وجهتهم. يظهر هذا الأسلوب أيضا المزايا العملية من خلال وجود حجم عينة أكبر والسماح للباحث لتشغيل مقايسة غير المراقب ويسجل الديدان مرة واحدة انتهت صلاحية الوقت المحدد.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

جناح أول من طور الفحص الكيميائي في عام 1973 ومنذ ذلك الحين، بعيدة المدى التطبيقات. بيولوجيا الأعصاب هو حقل واحد التي استفادت من استخدام مجموعة متنوعة من المقايسات الكيميائي. وقد تجلى تكيف حاسة الشم، وهو شكل بسيط من التعلم والذاكرة، في C. ايليجانس باستخدام المقايسات الكيميائي 6. كما تم استخدامها لاظهار ان C. يمكن ايليجانس تطوير الإيثانول التسامح، وهي النتيجة التي يوضح ليس فقط اللدونة السلوكية للديدان، ولكن هذا يدل أيضا على أن الديدان يمكن أن تكون مفيدة جدا في دراسة إدمان الكحول في البشر 3. وقد جرى حتى وضعت فحوصات للتدليل على قدرة C. ايليجانس لتخزين القصير والذاكرة على المدى الطويل من خلال إظهار أن الجمعيات مصنوعة من الديدان بين chemoattractants والمواد الغذائية (OP50) 7. بالإضافة إلى ذلك، وبالنظر إلى المعلومات الواسعة المتاحة حاليا فيما يتعلق C. ايليجانس الجينوم، وchemotaxiق سلوك C. تم تغيير ايليجانس مرات عديدة عن طريق إحداث الطفرات 1،8. وهذا يسمح لكثير من الاحتمالات هندسة مثيرة، مثل تطوير C. ايليجانس كأداة المعالجة البيولوجية. وهكذا، منذ التطوير الأولي للفحص الكيميائي في عام 1973، تم تغييره في كثير من الأحيان واستخدامها لتوضيح أسرار في مجموعة متنوعة من التخصصات.

بعض المقايسات التي تهدف إلى اكتشاف الطريق المحددة التي اتخذتها الديدان نحو الهدف. وقد تم تطوير هذا الفحص تنميط من هذا النوع من قبل وارد 5. وضعت ثلاثة الديدان على أجار ذاب لمدة 15 دقيقة. وتتبع تحركاتهم عن طريق بصمة تركوها لأنها سافرت من المحيط الخارجي للوحة تصل الانحدار إلى جاذب في وسط اللوحة. ألقي القبض على جميع الديدان على لوحة باستخدام الكلوروفورم في نهاية كل محاكمة. واحدة سليل هذه الطريقة وضعت دودة واحدة في منتصف لوحة مع جاذبة والسيطرة علىر مسافات متساوية والعكس من أصل 2.

بيرس-شيمومورا وآخرون. بتطوير فحص لمراقبة الطبيعة الدقيقة للحركة المشاركة في 9 الكيميائي. وضعت الديدان الفردية في 9 سم أطباق بتري إما تحتوي على تركيز الموحد للجاذبة أو على شكل شعاعي الانحدار، وبلغت ذروتها في مصدر جاذب. برنامج برامج الكمبيوتر التي اعترفت دودة كان يستخدم لتسجيل السلوك الملاحظ. كاميرا فيديو مثبتة في المجهر عملت بالتزامن مع المرحلة لضبط طبق بيتري تلقائيا عندما تمكن الفحص لضمان بقيت الدودة في مجال الرؤية. من هذا، تم اكتشاف معلومات أكثر تفصيلا عن سبب الدوران المعروضة بواسطة C. ايليجانس.

فحوصات أخرى أكثر مشابهة لتلك الموصوفة هنا، اختبر استجابة من عدد كبير من الديدان لمركبات الاختبار. وقد اثنين من رباعي المقايسات الكيميائيتستخدم لاستكشاف الأدوار التي الخلايا العصبية المختلفة، والمستقبلات، والجزيئات نقل الإشارة لعبت عندما C. تعرضت ايليجانس لمختلف مركبات 1. وضعت بين 20-50 الديدان غسلها بالقرب من وسط لوحة مع جاذبة والسيطرة على طرفي القطبية جنبا إلى جنب مع مخدر، الصوديوم أزيد (نان 3). بعد 60 دقيقة، تم إنشاء فهرس الكيميائي مع القيم من -1.0 إلى +1.0 على أساس الفرق بين كيفية العديد من الديدان والملصقة على جاذبة أو عنصر التحكم. تم استخدام مؤشر الكيميائي مماثلة في مقايسة ذكرت في هذه المقالة، على الرغم من أن الفحص في وقت سابق فشلت في تقييم صارم الديدان غير متحركة. ثم تم تطبيق هذا الاختبار إضافية لاختبار آثار الاجتثاث الخلايا العصبية على الكيميائي.

تم إجراء آخر من الاختلاف الفحص المذكورة أعلاه حيث وضعت 100-200 الديدان في وسط لوحة تحتوي على أربعة أجزاء 3. الأرباع المجاورة سواء الواردة أو الاختبارالرقابة على المواد. كما هو الحال في المقايسات السابقة، ويجمد الديدان بفعل أزيد الصوديوم قبل أن يسجل هدفا. ووصف طريقة مماثلة هنا كوسيلة لتقييم مدى استجابة C. ايليجانس لمركبات مختلفة. ومع ذلك، فإن الأسلوب أدناه له فائدة إضافية تتمثل في تقييم الديدان التي مرت على مسافة عتبة فصل النقال من الديدان قادرة على الحركة فقط.

أدرجت فحوصات أخرى مبادئ توجيهية مماثلة لتجاهل الديدان قادرة على الحركة. Frøkjær-جنسن وآخرون. وضع مقايسة تنوعا والتي يمكن استخدامها لاختبار مركبات قابلة للذوبان على حد سواء متقلبة والمياه 10. تم تقسيم طبق بتري إلى أربعة أجزاء. لم الأرباع العلوي والسفلي لا تحتوي على المذيبات. رباعي اليسرى الواردة الماء، والحق الوارد الجاذب. عند اختبار عطور متقلبة، وضعت الحليلة على غطاء الطبق، خلال الربع السليم، في حين وضعت مركبات ذوبان في الماء مباشرة على الآغاص.

الطرق الموجودة حاليا لتقييم استجابة الكيميائي من C. ويجري باستمرار تنقيحها ايليجانس لتحسين سهولة استخدامها، والكفاءة، والدقة. لذلك، في حين أن مقايسة الموصوفة هنا لديها القدرة على تقييم أكبر عدد من الديدان (الإنتاجية القصوى: 250 الديدان / ساعة لكل لوحة، أكبر بقليل من سرعة أبداه لي وآخرون 3)، والقوة الحقيقية لهذا الأسلوب هو تتويجا مقتضبة للعديد من سمات فحوصات في وقت سابق (الجدول 1).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. إعداد / غسل الديدان

  1. مزامنة الديدان إلى الشباب البالغين 11.
  2. ماصة 2 مل من بصل S الصعود إلى 5 سم لوحة الانجذاب الكيميائي من نظموا الديدان التي مسحت مجرد حشيش OP50 E. القولونية. إمالة لوحة حسب الحاجة لضمان تغسل الديدان من سطح لوحة في المخزن المؤقت.
  3. ماصة 1 مل من محلول دودة-S بصل إلى أنبوب microcentrifuge.
  4. أجهزة الطرد المركزي لمدة 10 ثانية باستخدام PicoFuge في 6،600 دورة في الدقيقة.
  5. نضح بصل S، وترك بيليه من الديدان دون عائق.
  6. إضافة 1 مل S حل بصل إلى أنبوب microcentrifuge، عكس عدة مرات لغسل الديدان.
  7. كرر الخطوات من 1،4-1،6 آخر ثلاث مرات.
  8. أجهزة الطرد المركزي لمدة 10 ثانية مرة الخامسة، وهذه المرة الشفط طاف إلى الحجم النهائي من كاليفورنيا. 100 ميكرولتر.
  9. ماصة 2 ميكرولتر من الديدان على لوحة NGM لضمان وجود ما بين 50 و 250 الديدان في كل عينة 2 ميكرولتر. ضبطتركيز الديدان في بصل S حسب الحاجة عن طريق إعادة التعليق على الديدان في حجم أصغر أو أكبر من S بصل.
  10. استخدام الديدان في مقايسة مباشرة بعد غسل الديدان لمدة تصل إلى 1 ساعة.

2. إعداد لوحات اختبار

  1. بمناسبة السفلي من لوحة 5 سم، تقسيم الطبق إلى 4 أجزاء متساوية. أجار الكيميائي أو NGM يمكن استخدامها. وثمة حاجة إلى الحد الأدنى من 3 محاكمات لكل سلالة الجينية التي يجري اختبارها.
  2. بمناسبة دائرة نصف قطرها 0.5 سم حول المنشأ (الشكل 1).
  3. بمناسبة نقطة في كل رباعي إما مع "T" ل "اختبار" أو "C" ل "السيطرة" التأكد من أن المواقع هي على مسافة واحدة من أصل وبعضها البعض. النقاط يجب أن تكون 2 سم بعيدا عن الأصل على الأقل. بمناسبة أعلى اليسار وأسفل اليمين كما الأرباع الأرباع اختبار والحق أعلى وأسفل اليسار الأرباع والضوابط (الشكل 1).

3. تشغيل الفحص

  • مزيج من محلول الاختبار من خلال الجمع بين أحجام متساوية من مركب اختبار و 0.5 M أزيد (وهو مخدر يستخدم للقبض على الديدان عند بلوغ رباعي). مزيج من حلول التحكم من خلال الجمع بين المذيبات المستخدمة لتخفيف مركب اختبار مع 0.5 M أزيد.
  • ماصة 2 ميكرولتر من الحل دودة (المعد في 1.8) من بيليه على المنشأ (حيث تتقاطع السطرين).
  • مباشرة بعد، ماصة 2 ميكرولتر من محلول الاختبار على موقعين "T". وبالمثل، ماصة على نفس القدر من الحل السيطرة على موقعين "C".
  • مرة واحدة وقد تم استيعاب قطرات دودة والرائحة في أجار، استبدال الأغطية وعكس لوحات.
  • بعد 60 دقيقة، ووضع الديدان في 4 درجة مئوية الحاضنة. فقط إزالة لوحة من الحاضنة عندما يمكن عدها. ترك الديدان في درجة حرارة الغرفة قد تسمح لهم لتعبئة مرة أخرى.
  • تسجيل عدد من الديدان في كل رباعي التي عبرت تماما CIRC الداخليةجنيه.
  • كرر الخطوات من 3،2-3،6 باستخدام حلول التحكم في كل من الاختبار والأرباع السيطرة. وهذا سيكون بمثابة لوحة التحكم. وينبغي بذل ثلاثة من هذه اللوحات وتشغيل لتكون بمثابة المكافحة المناسبة.
  • 4. تفسير النتائج / تحديد مؤشر الانجذاب الكيميائي

    1. حساب مؤشر الكيميائي باستخدام المعادلة 1. هذا وسوف تسفر عن مؤشر الكيميائي بين -1.0 و +1.0.

    (1)

    الكيميائي مؤشر = (# الديدان في كل من الأرباع اختبار - # الديدان في كل من الأرباع التحكم) / (مجموع # من الديدان الناجحة)

    والنتيجة +1.0 يشير جذب القصوى نحو الهدف، ويمثل 100٪ من الديدان وصوله في الأرباع تحتوي على الهدف الكيميائية. فهرس -1.0 دليل على تنافر القصوى. وقد تم بالفعل استخدام طرق فحص مماثل 3 (الجدول 1).

    1. الإبلاغ عن متوسط ​​Chemotaxiق مؤشر (CI) والخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM). أداء الطالب اختبار T-بمقارنة البيانات من لوحات اختبار ومراقبة.

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Representative Results

    or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

    مقارنة البرية من نوع (N2) C. ايليجانس إلى ODR-10 (KY10) متحولة.

    كنا ثنائي الأسيتيل، وهي المعروفة C. ايليجانس جاذب كيميائي، لمقارنة الديدان wildtype إلى أن من الطافرة التي تفتقر إلى مستقبلات للثنائي الأسيتيل 1،12. لwildtype (N2) الديدان ارتفع مؤشر الكيميائي 0.100 ± 0.066 إلى الإيثانول، و0.839 ± ،031-،5٪ ثنائي الأسيتيل. كما هو متوقع، ثنائي الأسيتيل يثير استجابة chemoattractive كبيرة من البرية من نوع الديدان (P <0.003). في المقابل كان (KY10) ODR-10 المسوخ التي تفتقر إلى مستقبلات ثنائي الأسيتيل وCI ثنائي الأسيتيل التي لم تختلف كثيرا عن الضوابط (الشكل 3).

    الكاتب # الديدان / لوحة المدة (دقيقة) 1 ساعة الإنتاجية (ماكس # الديدان) الايجابيات سلبيات
    جناح 5 3 15 12 • حركة المسار
    • حساب للديدان قادرة على الحركة من خلال الملاحظة واضحة
    تعتمد على إشراك الباحث @ فترات زمنية قصيرة (15 دقيقة)
    Bargmann وهورفيتز 2 1 60 1 • انخفاض الإنتاجية
    • ينشر جاذبة لمدة 12-24 ساعة
    Bargmann، Hartwieg، هورفيتز 1 20-50 60 50 • الحد الأدنى من تدخل الباحث (نان 3 المستخدمة)
    • # الديدان معتدلة
    • لا حصيف طريقة التهديف متحركة
    • لا تتبع حركة
    لي، جي، McIntire 3 100-200 60 200 • الحد الأدنى من تدخل الباحث (نان 3 المستخدمة)
    • عالية # ديدان
    بيرس-شيمومورا، مورس، Lockery 9 1 20 (أو حتى دودة الفعالية حافة صفيحة) 3 • حركة المسار
    • حساب للديدان قادرة على الحركة من خلال الملاحظة واضحة
    • مفصلة، ​​سجل دائم للحركة دودة
    يتطلب نظام متقدم لتتبع جهاز الكمبيوتر
    مارجي، بالمر، شين سانغ (هذه الطريقة) 50-250 60 250 • الحد الأدنى من تدخل الباحث (نان 3 المستخدمة)
    • عالية # الديدان • حسابات للديدان متحركة
    • لا تتبع حركة

    مقارنة طرق مقايسة وصف الجدول 1.

    FO: المحافظة على together.within الصفحات = "دائما"> الشكل 1
    الشكل 1. وينقسم سم طبق بتري 5 إلى أربعة أجزاء، كل المعينة إما اختبار ("T") أو التحكم ("C") منطقة. الدائرة الداخلية يحدد منطقة حيث لا يتم تسجيل حركة. هذا يمنع الديدان قادرة على الحركة من انحراف البيانات. الأرباع خلق نمط بالتناوب من الاختبار والرقابة لمنع أي تحيز التي قد تحدث من موضع الأولي من الديدان.

    الشكل 2
    الشكل 2. A التخطيطي للمقايسة مقتبس من لي وآخرون (2009). لوحات تنقسم إلى اثنين من الأرباع اختبار (A & B) واثنين من عناصر التحكم (C & D). يتم تضمين أزيد الصوديوم أيضا مع اختبار ومراقبة المواقع على شل الديدان. توضع الديدان في مركز اللوحة وبعد 60 دقيقة يتم حساب الديدان على كل كوادراNT. لا سجل الأفراد الذين لم عبور الدائرة الداخلية. يشار إلى أمثلة التخطيطي محايدة وجاذبة. يظهر مؤشر (CI) حساب الكيميائي أدناه.

    الشكل (3)
    الشكل (3). مؤشرات الكيميائي الناتجة عن فحوصات أجريت مع الديدان البرية من نوع (WT) وODR-10 (KY10) باستخدام إما ثنائي الأسيتيل باعتبارها جاذبة اختبار أو الإيثانول (لوحات التحكم). القيم هي متوسطات من لا يقل عن 3 تجارب مستقلة (ن> 200 الديدان) لكل حالة. أشرطة الخطأ تعكس الخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM) * = P <0.003 طالب اختبار t.

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Discussion

    or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

    الكيميائي، على الرغم من أن تسيطر عليها مجموعة معقدة من الآليات العصبية والخلوية، ويمكن بسهولة وبشكل موضوعي كميا باستخدام المقايسات الكيميائي. للحصول على أفضل النتائج من المقايسات، يجب اتخاذ بعض الخطوات الحاسمة. أولا، تنظيم الديدان أمر أساسي في تحقيق نتائج متسقة التجريبية. الديدان في مراحل الحياة المختلفة تتصرف بشكل مختلف 13؛ الديدان مرحلة مختلطة بحيث قد تحرف النتائج التجريبية. ثانيا، ضمان جميع E. يتم غسلها القولونية قبالة الديدان أمر بالغ الأهمية، كما البكتيريا المتبقية قد تتداخل مع مقايسة. ومن المهم أيضا أن نلاحظ أن مخدر، 0.5-1 أزيد M-الصوديوم، وإلقاء القبض على الديدان داخل دائرة نصف قطرها 1 سم من حيث وضعه. ونظرا لهذا، فإن من الأهمية بمكان أن أزيد وضعها لا يقل عن 2 سم من المنشأ. وإذا رصدت أزيد 1.5 سم أو أقل من أصل تصاب بالشلل الديدان داخل الدائرة الداخلية، وسيتم سجل لا شيء. يتم وضع مزيد من أزيد، والى مزيد منالأرباع الديدان يمكن ان تتحرك. وينبغي أيضا أن تبقى لوحات مستوى لضمان الاتساق عبر المحاكمات وضمان عدم مرتبك النتائج وفقا لتحيزات الجاذبية. وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي أن تستخدم ما لا يزيد عن 250 الديدان في التجربة. الازدحام قد تعوق حركة دودة لعدد من الأسباب. وجدنا أن الديدان عنقودية تميل إلى البقاء معا، لصالح من السفر إلى رباعي. وأخيرا، ووضع لوحات مقايسة عند 4 درجة مئوية بعد 60 دقيقة تحافظ على الديدان من التحرك، مما يتيح للباحث للحفاظ على الدولة من لوحة حتى أنها قادرة على أن تحسب. يمكن لوحات تخزينها في 4 درجة مئوية وسجل في وقت لاحق عدة أيام دون التأثير على النتائج.

    ويمكن لبعض التعديلات الإجرائية مواصلة تعزيز فائدة من هذا البروتوكول. كما هو، يمكن هذا البروتوكول بمثابة وسيلة لاختبار مجموعة متنوعة من الظواهر في محاكمات منفصلة. ومن الناحية المثالية، يجب مقارنة نتائج التجارب متحولة في ظل نفس الظروف. باستخدام سلالات التي تعبر عن fluorescوالبروتينات والأنف والحنجرة مثل GFP أو طلب تقديم العروض إنجاز هذا. وهذا التعديل إعطاء الباحث قدر أكبر من الاتساق التجريبية عن طريق وضع مختلف السلالات في نفس لوحة الفحص والاستفادة من يحرز لوحة واحدة بدلا من التهديف لوحات اختبار مقابل السيطرة.

    ويمكن أيضا أن تستخدم المقايسات الكيميائي لتوصيف السلوك الكيميائي من الديدان الخيطية وراثيا. وهذا يسمح للتقارب ملزم من المستقبلات المأخوذة من الأنواع الأخرى لفحصها. إذا تم التعبير عن هذه المستقبلات في الخلايا العصبية جاذب كيميائي أو chemorepulsive من الدودة بطريقة متوافقة، ينبغي مراعاة النتائج المتوقعة 8 الكيميائي.

    هذا البروتوكول يمكن تكييفها لتلائم الاحتياجات مزيد الأخرى كذلك. حاليا، لا يسمح هذا الأسلوب المحقق لتتبع حركة الديدان. لأن 5 لوحات سم مقبولة لهذه المقايسات، يمكن لكاميرا فيديو مثبتة في stereomicroscope تصوير بفعالية الحركةمن الديدان نحو رباعي واحد للمقايسة دون استخدام مرحلة الآلية والبرمجيات تتبع دودة. وأخيرا، على الرغم من أن يشار في المقام الأول chemoattractants على أنها مركبات اختبار في البروتوكول، ويمكن أيضا أن تستخدم chemorepellents. هذا البروتوكول، كما هو أو تعديله، بسيطة وفعالة ويمكن أن تكون بمثابة أداة فعالة لقياس السلوك الكيميائي للC. ايليجانس، أو لإظهار السلوك للطلاب في المدرسة الثانوية أو المستوى الجامعي.

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Disclosures

    ليس لدينا شيء في الكشف عنها.

    Acknowledgments

    نشكر علوم الحياة وكلية الآداب والعلوم في جامعة كوينز لتمويل هذا العمل. كذلك، نشكر مختبر تشين سانج لتوفير الكواشف اللازمة والمعدات والدعم التقني. كما نشكر QGEM 2011، خصوصا توني لمساهمته في المناقشة.

    Materials

    Name Company Catalog Number Comments
    S Basal (- cholesterol) [5.8 g NaCl; 1 M K phosphate buffer, pH 6.0; dH2O to 1 liter.] Autoclave
    PicoFuge Stratagene 400552
    Microscopes Leica
    Dissecting Leica
    P1000 Pipette Gilson
    P10 Pipette Gilson
    0.5 M Sodium Azide
    Chemotaxis Agar [1.6% BBL-agar (Benton-Dickinson) or 2% Difco-agar. Autoclave. Add 5 mM potassium phosphate, pH 6.0; 1 mM CaCl2, 1 mM MgSO4]
    Ethanol/Distilled Water
    Test Compounds (eg. 0.5% diacetyl)
    Agar Bio-Rad 166-0600
    NH4Cl Amresco CA97062-046
    MOPS VWR CA12001-120
    NH4OH BDH CABDH8641-2
    0.25% Tween 20 Bio-Rad 170-6531

    DOWNLOAD MATERIALS LIST

    References

    1. Bargmann, C. I., Hartwieg, E., Horvitz, H. R. Odorant-selective genes and neurons mediate olfaction in C. elegans. Cell. 74, 515-527 (1993).
    2. Bargmann, C. I., Horvitz, H. R. Chemosensory neurons with overlapping functions direct chemotaxis to multiple chemicals in C. elegans. Neuron. 7, 729-742 (1991).
    3. Lee, J., Jee, C., McIntire, S. L. Ethanol preference in C. elegans. Genes Brain Behav. 8, 578-585 (2009).
    4. Swierczek, N. A., Giles, A. C., Rankin, C. H., Kerr, R. A. High-throughput behavioral analysis in C. elegans. Nat. Methods. 8, 592-598 (2011).
    5. Ward, S. Chemotaxis by the nematode Caenorhabditis elegans: identification of attractants and analysis of the response by use of mutants. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 70, 817-821 (1973).
    6. Colbert, H. A., Bargmann, C. I. Odorant-specific adaptation pathways generate olfactory plasticity in C. elegans. Neuron. 14, 803-812 (1995).
    7. Kauffman, A., Parsons, L., Stein, G., Wills, A., Kaletsky, R., Murphy, C. C. elegans Positive Butanone Learning, Short-term, and Long-term Associative Memory Assays. J. Vis. Exp. (49), e2490 (2011).
    8. Troemel, E. R., Kimmel, B. E., Bargmann, C. I. Reprogramming chemotaxis responses: sensory neurons define olfactory preferences in C. elegans. Cell. 91, 161-169 (1997).
    9. Pierce-Shimomura, J. T., Morse, T. M., Lockery, S. R. The fundamental role of pirouettes in Caenorhabditis elegans chemotaxis. J Neurosci. 19, 9557-9569 (1999).
    10. Frokjaer-Jensen, C., Ailion, M., Lockery, S. R. Ammonium-acetate is sensed by gustatory and olfactory neurons in Caenorhabditis elegans. PLoS One. 3, e2467 (2008).
    11. Porta-de-la-Riva, M., Fontrodona, L., Villanueva, A., Cerón, J. Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation. J. Vis. Exp. (64), e4019 (2012).
    12. Sengupta, P., Bargmann, C. I. Cell fate specification and differentiation in the nervous system of Caenorhabditis elegans. Dev. Genet. 18, 73-80 (1996).
    13. Hart, A. C. Behavior. WormBook. (1895).
    <em>C. ايليجانس</em> الانجذاب الكيميائي الفحص
    Play Video
    PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

    Cite this Article

    Margie, O., Palmer, C., Chin-Sang, I. C. elegans Chemotaxis Assay. J. Vis. Exp. (74), e50069, doi:10.3791/50069 (2013).More

    Margie, O., Palmer, C., Chin-Sang, I. C. elegans Chemotaxis Assay. J. Vis. Exp. (74), e50069, doi:10.3791/50069 (2013).

    Less
    Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
    View Video

    Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

    Waiting X
    simple hit counter