चूहे में अल्ट्रासाउंड निर्देशित ट्रांस्थोरासिक Intramyocardial इंजेक्शन
Summary
इकोकार्डियोग्राफी निर्देशित percutaneous intramyocardial इंजेक्शन murine दिल में जीन स्थानांतरण एजेंटों या कोशिकाओं के वितरण के लिए एक कुशल, विश्वसनीय, और लक्ष्य साधन का प्रतिनिधित्व करता है. इस प्रोटोकॉल में उल्लिखित चरणों का पालन, ऑपरेटर जल्दी से इस बहुमुखी, कम आक्रामक तकनीक में सक्षम हो सकता है.
Abstract
हृदय रोग का murine मॉडल pathophysiological तंत्र की जांच और संभावित पुनर्योजी उपचारों की खोज के लिए महत्वपूर्ण हैं. दौरे इंजेक्शन से जुड़े प्रयोगों वर्तमान में एक thoracotomy के माध्यम से प्रत्यक्ष शल्य चिकित्सा का उपयोग करके प्रदर्शन कर रहे हैं. ऐसे कोरोनरी धमनी बंधाव के रूप में एक और प्रयोगात्मक हेरफेर के समय किया जब सुविधाजनक वहीं intramyocardial वितरण के लिए एक आक्रामक प्रक्रिया के लिए आवश्यकता के संभावित प्रयोगात्मक डिजाइन की सीमा. कभी अल्ट्रासाउंड संकल्प और उन्नत noninvasive इमेजिंग तौर तरीकों में सुधार के साथ, यह नियमित रूप से अल्ट्रासाउंड निर्देशित, percutaneous intramyocardial इंजेक्शन प्रदर्शन करने के लिए अब संभव है. इस साधन कुशलतापूर्वक और मज़बूती से मायोकार्डियम के एक लक्षित क्षेत्र के लिए एजेंट बचाता है. इस तकनीक का लाभ शल्य रुग्णता का परिहार, चुनिंदा अल्ट्रासाउंड मार्गदर्शन में मायोकार्डियम के क्षेत्रों को लक्षित करने की सुविधा है, और myocardiu को injectate देने का अवसर शामिलकई पूर्व निर्धारित समय अंतराल पर एम. अभ्यास तकनीक के साथ, intramyocardial इंजेक्शन से जटिलताओं दुर्लभ हैं, और चूहों जल्दी संवेदनाहारी से वसूली पर सामान्य गतिविधि के लिए वापसी. इस प्रोटोकॉल में उल्लिखित चरणों का पालन, बुनियादी इकोकार्डियोग्राफी अनुभव के साथ ऑपरेटर जल्दी से इस बहुमुखी, कम आक्रामक तकनीक में सक्षम हो सकता है.
Introduction
हृदय रोग प्रतिवर्ष 600,000 लोगों की मृत्यु 1 के लिए लेखांकन, संयुक्त राज्य अमेरिका में पुरुषों और महिलाओं दोनों के लिए मौत का प्रमुख कारण है. हृदय रोग का murine मॉडल pathophysiological तंत्र की जांच के लिए और संभावित उपचारों की खोज के लिए महत्वपूर्ण हैं. जीन थेरेपी वैक्टर के दौरे वितरण, कोशिकाओं, संशोधित RNAs, और हृदय रोग 2-7 के लिए उनके चिकित्सीय क्षमता के अन्य चिकित्सीय एजेंट परमिट जांच स्टेम. वर्तमान में, माउस मॉडल 6 में चिकित्सीय एजेंटों के दौरे प्रसव के लिए सीमित विकल्प हैं. प्रत्यक्ष दृश्य के तहत Intramyocardial इंजेक्शन आमतौर पर इस्तेमाल किया, लेकिन एक sternotomy या thoracotomy की आवश्यकता है और दिल के उजागर क्षेत्र तक ही सीमित है. ऐसे लाड बंधाव के रूप में एक और प्रयोगात्मक हेरफेर के समय किया जब सुविधाजनक वहीं intramyocardial वितरण के लिए एक आक्रामक प्रक्रिया के लिए आवश्यकता के संभावित प्रयोगात्मक डिजाइन की सीमा और एक परिचयप्रक्रिया से dditional प्रभाव (जैसे, thoracotomy के कारण फाइब्रोसिस). वायरल वैक्टर percutaneous पेरिकार्डियल वितरण सूचना दी गई है, लेकिन साइट और चिकित्सीय एजेंट के वितरण सजातीय नहीं है और नियंत्रण 8 के लिए मुश्किल है. इंजेक्शन सामग्री, लेकिन कुशल और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य कोरोनरी प्रसव के अधिक समरूप वितरण में percutaneous कोरोनरी इंजेक्शन परिणाम murine मॉडल में चुनौती दे रहा है.
यहाँ, हम अल्ट्रासाउंड मार्गदर्शन में चिकित्सीय एजेंटों की न्यूनतम इनवेसिव, ऑपरेटर नियंत्रित लक्ष्यीकरण की अनुमति देता है कि एक बंद छाती intramyocardial इंजेक्शन तकनीक का वर्णन. तकनीक, जानने के लिए आसान है thoracotomy या sternotomy और उनके परिचर प्रयोगात्मक जटिलताओं के लिए जरूरत अनावश्यक है, और समय और intramyocardial इंजेक्शन की साइटों पर अधिक से अधिक लचीलापन प्रदान करता है. इस प्रकार, इकोकार्डियोग्राफी की सहायता intramyocardial इंजेक्शन जोड़ तोड़ की एक तकनीकी रूप से सरल और अत्यधिक प्रभावी विधि का प्रतिनिधित्व करता हैmurine प्रयोगात्मक मॉडल में मायोकार्डियम.
Protocol
Representative Results
Discussion
बायोलॉजिक्स खून के माध्यम से प्रत्यक्ष intramyocardial इंजेक्शन, intrapericardial इंजेक्शन, या अप्रत्यक्ष प्रशासन द्वारा मायोकार्डियम के लिए दिया जा सकता है. रोधगलन मॉडल में हाल ही में सेल आधारित चिकित्सा परीक्षणों injectate …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
TWP was funded by the Irish Cardiac Society Brian McGovern Travelling Fellowship. WTP was funded by R01 HL095712 and an AHA Established Investigator Award.
Materials
| Vevo 2100 ultrasound imaging system | Visualsonics | ||
| Vevo Integrated Rail System III | Visualsonics | ||
| Microscan MS400 transducer | Visualsonics | ||
| Microscan MS550D transducer | Visualsonics | ||
| PrecisionGlide needles | BD | 305128 | 30G x 1 inch |
| 1cc slip tip syringe | Exel International | 26048 | or equivalent |
| Gastight 50ul glass syringes | Hamilton | 1705 | |
| Trypan blue stain (0.4%) | Gibco | 15250 | or equivalent |
| Isoflurane | Baxter | AHN3640 | or equivalent |
| Aquasonic 100 | Parker Laboratories | (01-08) | or equivalent |
| Polystyrene microspheres (red fluorescent) | Life Technologies | F-8842 | or equivalent |
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