Ekkokardiografi styrt perkutan intramyocardial injeksjon representerer en effektiv, pålitelig og målrettbar modalitet for levering av genoverføring agenter eller celler inn i murine hjerte. Følge fremgangsmåten i denne protokollen, kan operatøren raskt bli kompetente i denne allsidige, minimal invasiv teknikk.
Murine modeller av hjerte-og karsykdommer er viktig for å undersøke patofysiologiske mekanismer og utforske potensielle regenerativ behandling. Forsøk med hjerteinfarkt injeksjon er i dag utføres ved direkte kirurgisk tilgang gjennom en Thoracotomi. Mens praktisk når utført ved en annen eksperimentell manipulasjon slik som koronar arterie ligering, begrenser behovet for en invasiv prosedyre for intramyocardial levering potensielle eksperimentelle design. Med stadig bedre ultralyd oppløsning og avanserte ikke-invasiv bildediagnostikk, er det nå mulig å rutinemessig utføre ultralydveiledet, perkutan intramyocardial injeksjon. Dette modalitet effektivt og pålitelig leverer agenter til en målrettet regionen i hjertemuskelen. Fordeler med denne teknikken inkluderer å unngå kirurgisk sykelighet, anlegget for å målrette regioner av hjertemuskelen selektivt ledes med ultralyd, og muligheten til å levere injektat til myocardium ved flere, forutbestemte tidsintervaller. Med praktisert teknikk, komplikasjoner fra intramyocardial injeksjon er sjeldne, og mus raskt tilbake til normal aktivitet på utvinning fra narkosen. Følge fremgangsmåten i denne protokollen, kan operatøren med grunnleggende ekkokardiografi erfaring raskt bli kompetente i denne allsidige, minimal invasiv teknikk.
Hjertesykdom er den ledende dødsårsaken for både menn og kvinner i USA, står for 600.000 dødsfall årlig en. Murine modeller av hjerte-og karsykdommer er kritisk viktig for å undersøke patofysiologiske mekanismer og for å utforske potensielle behandlinger. Hjerteinfarkt levering av genterapi vektorer, stamceller, modifiserte RNA, og andre terapeutiske midler tillater undersøkelse av deres terapeutiske potensialet for hjertesykdom 2-7. For tiden er det begrensede muligheter for hjerteinfarkt levering av terapeutiske midler i musemodeller seks. Intramyocardial injeksjon under direkte visualisering er vanlig brukt, men krever en sternotomi eller torakotomi, og er begrenset til det synlige området av hjertet. Mens praktisk når utført ved en annen eksperimentell manipulasjon som LAD ligering, begrenser behovet for en invasiv prosedyre for intramyocardial levering potensielle eksperimentelle design og innfører endditional effekter fra prosedyren (f.eks fibrose skyldes torakotomi). Perkutan perikardial levering av virale vektorer er blitt rapportert, men området og distribusjon av terapeutisk middel ikke er homogent, og er vanskelig å kontrollere 8.. Perkutan koronar injeksjon gir mer homogen fordeling av injisert materiale, men effektiv og reproduserbar koronar levering er utfordrende i murine modeller.
Her beskriver vi en lukket kiste intramyocardial injeksjonsteknikk som gjør at minimalt invasiv, operatør kontrollert målretting av terapeutiske midler med ultralyd veiledning. Teknikken er lett å lære, fjerner behovet for Thoracotomi eller sternotomi og deres tilhørende eksperimentelle komplikasjoner, og gir større fleksibilitet på timing og områder av intramyocardial injeksjon. Således representerer ekkokardiografi assistert injeksjon intramyocardial en teknisk enkel og meget effektiv metode for å manipuleremyokard i murine eksperimentelle modeller.
Biologiske kan leveres til hjertemuskelen ved direkte intramyocardial injeksjon, intrapericardial injeksjon, eller indirekte administrasjon via blodet. Nye cellebasert behandlingsstudier i hjerteinfarkt modeller har beskrevet en åpen torakotomi tilnærming til levering av injektat 12-14. En viktig faktor i suksessen til et hjerteinfarkt terapeutisk intervensjon hengsler på valg av leveringsruten. Den høyeste lokale dose av biologisk oppnås ved intramyocardial leverings 15,16. Intramyocardial in…
The authors have nothing to disclose.
TWP was funded by the Irish Cardiac Society Brian McGovern Travelling Fellowship. WTP was funded by R01 HL095712 and an AHA Established Investigator Award.
Vevo 2100 ultrasound imaging system | Visualsonics | ||
Vevo Integrated Rail System III | Visualsonics | ||
Microscan MS400 transducer | Visualsonics | ||
Microscan MS550D transducer | Visualsonics | ||
PrecisionGlide needles | BD | 305128 | 30G x 1 inch |
1cc slip tip syringe | Exel International | 26048 | or equivalent |
Gastight 50ul glass syringes | Hamilton | 1705 | |
Trypan blue stain (0.4%) | Gibco | 15250 | or equivalent |
Isoflurane | Baxter | AHN3640 | or equivalent |
Aquasonic 100 | Parker Laboratories | (01-08) | or equivalent |
Polystyrene microspheres (red fluorescent) | Life Technologies | F-8842 | or equivalent |