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Biology

Construction d'un Construire facile à l'installation de poisson zèbre et abordable

Published: November 22, 2014 doi: 10.3791/51989

Abstract

In vivo la recherche biomédicale est essentiel pour traduire dans les résultats in vitro dans les avancées cliniques. Les petits établissements universitaires avec des ressources limitées trouver qu'il est pratiquement impossible de construire et d'entretenir les installations typiques de rongeurs pour la recherche. La recherche du poisson zèbre a été démontré pour être une alternative intéressante pour la recherche in vivo en pharmacologie, la physiologie, le développement et les études génétiques. Cet article montre qu'une installation poisson zèbre fonctionnel peut être construit d'une manière facile et abordable. Nous démontrons qu'une telle installation pourrait être construit dans environ un jour travailler avec des outils et de l'expertise minimes. Le coût de la 27 1,8 L installation de poisson zèbre de réservoir de poissons construit dans cette étude était d'environ $ 1500. Nous estimons que le maintien d'une colonie initiale de poisson travail 150 pour trois mois est de 1000 $. Ce projet consistait étudiants, qui ont été introduites à aquaculturing de poisson zèbre pour la recherche propose.

Introduction

In vivo modèles sont essentiels dans la conduite de la recherche biomédicale globale car ils permettent à la recherche in vitro à traduire au niveau du système et organismal. Par exemple, la recherche de petits mammifères, à savoir les rongeurs, a été avéré nécessaire dans le développement de médicaments et à l'amélioration des médicaments disponibles. Cependant, la complexité (financièrement et logistiquement) pourrait rendre pratiquement impossible à construire et à entretenir les installations de rongeurs d'expérimentation propose aux petites institutions universitaires de recherche. Néanmoins, la recherche in vivo peut être effectuée en utilisant d'autres espèces animales qui nécessitent une logistique moins élaborés. Poisson zèbre (Danio rerio) ont été utilisés avec succès comme un modèle in vivo pour étudier la génétique, le développement, la physiopathologie et pharmacologie 1,2,10,11,12. Les installations requises pour accueillir le poisson zèbre pour l'expérimentation sont relativement simples et beaucoup moins cher par rapport aux rinstallations Odent. Kim et al. 3 ont récemment décrit en détail un système de logement poisson zèbre 80 du réservoir qui peut être construite pour environ $ 1500, qui comprend les deux parties et les coûts de main-d'œuvre. Ceci est en contraste frappant avec la presque $ 8,500 qui serait nécessaire pour acheter un système de réservoir 80 ready-made de tout nombre de fournisseurs commerciaux. Toutefois, la description donnée par Kim et al. peut être compliqué et difficile à suivre pour les novices de la recherche de poisson. Nous croyons qu'une installation poisson zèbre peut être construit de manière simplifiée pour un investissement de $ 1500.

La mise en place d'une installation in vivo à des petits établissements universitaires fournit leurs facultés un outil supplémentaire avec laquelle de produire une recherche plus puissant et complet. Les données in vitro soutenues par résultats in vivo généralement produire la recherche biomédicale plus complète que les données obtenues en utilisant seulement des approches in vitro. Par conséquent, lamise en œuvre d'un centre de recherche in vivo améliorera considérablement le succès de l'institution dans ses efforts de recherche globaux (de l'exposition des étudiants à la recherche, publications, communications, recherche de financement externe, etc.).

La construction d'une installation de poisson zèbre comme celle décrite dans cette étude est idéale pour les établissements universitaires de recherche avec des moyens limités (ou institutions sans in vivo installations de recherche) au cours de constriction fois financiers.

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Protocol

NOTE: Ces protocoles suivent les directives de IACUC du Presbyterian College.

1. Matériaux Acquérir énumérées dans le tableau 1.

2. Assembler le plateau 5 Chrome Selon les instructions du fabricant. Cela être utilisés pour héberger le Fonds.

3. Construction du réservoir d'eau et un système de filtration (figures 1A et 2).

  1. Aide de la figure 1A comme un guide, mise en page le seau de 18 gallons, pompe, filtres et lampe UV pour déterminer l'emplacement d'installation et la taille finale.
  2. Une fois que les pièces sont disposées, mesurer et couper le tuyau de PVC ¾ "à la longueur nécessaire pour l'assemblage. Variez les longueurs de toutes les conduites en fonction des besoins et des contraintes d'espace spécifiques.
  3. Assemblez les tuyaux et les raccords comme prévu précédemment en utilisant l'amorce PVC et de ciment, voir ci-dessous (3.3.2 et 3.3.3).
    1. Poncer les bords de la pipe avec du papier de verre coupées jusqu'à ce qu'ils soient lisses à l'un tactiled il n'y a pas de débris.
    2. Premier l'extérieur du tuyau et l'intérieur de la ferrure avec l'amorce PVC acheté avec l'écouvillon inclus à partir de l'amorce PVC.
    3. Collez le tuyau et le raccord ensemble par l'application de la colle à PVC à l'extérieur de la conduite en utilisant l'écouvillon inclus. Répétez l'opération pour toutes les mesures qui doivent cimentation de PVC.
    4. Placer le godet 18 gallons d'un côté de la construction du plateau.
    5. Installer un connecteur de cloison du côté du réservoir.
    6. Fixez un tuyau en PVC ¾ "à la cloison.
    7. Branchez l'autre extrémité du ¾ "pipe à l'entrée de la pompe en utilisant un ¾" filetée faire raccord.
    8. Connecter les filtres à la pompe à l'aide de deux coudes de 90 degrés et ¾ "tuyau en PVC.
      1. Utilisez un filtre de papier suivi d'un filtre à charbon actif pour filtrer les débris et réduire les niveaux de chlore et de produits chimiques dans l'eau.
    9. Connectez la lampe UV à l'filtres according aux instructions du fabricant.
  4. Fixez la pompe et système de filtration à la face supérieure de la première étagère de l'armoire en utilisant les liens de fil. Variez l'ordre de l'assemblage et fixation selon la taille et la disposition de la tablette / support choisi.
  5. Ajouter une BioBall par gallon d'eau au réservoir d'eau, une fois la pompe et le système de filtre sont assemblés et fixés à l'étagère.

4. Construire la ligne principale d'alimentation (figures 1B et 2).

  1. Mesurer et couper un morceau de ¾ "tuyau en PVC pour connecter la lampe UV à l'alimentation principale
  2. Utilisez un "té en PVC pour commencer la ligne d'alimentation principale en connectant le tee au ¾" ¾ PVC échappement provenant du filtre UV. .
    1. Ajouter une soupape de marche-arrêt vers le bas du tee PVC pour servir de drain pour l'entretien du système de rinçage.
    2. Lancer la ligne principale d'alimentation par le haut de la ¾ "té en PVC en mesurant et en coupe ¾" PVCtube à la longueur désirée pour fournir des tuyaux d'alimentation de chacune des étagères sur le rack.
    3. Installez ¾ "tees de PVC pour les lignes horizontales qui entreront chaque étagère de l'armoire.
    4. Éventuellement (et suggéré), ajouter un ¾ "on-off valve pour chaque ligne d'alimentation du plateau pour permettre l'isolement de chaque étagère et une conception modulaire du système.
  3. Utilisez un tuyau en PVC ¾ "comme un réducteur de pression en ligne sur l'étagère du haut. Si cette ligne se exécute sur l'arrière de la tablette, utiliser cette étagère pour le stockage. Fin de la réduction de pression ligne dans la ligne d'échappement principale (figure 1B) avec un ¾ "vanne on-off.
  4. Une fois les étapes ci-dessus ont été réalisés, le premier et cimenter le tuyau en PVC ensemble comme déjà fait lors de la construction du système de réservoir et filtration.

5. Construire la ligne principale d'échappement (figures 1C et 2).

  1. Exécuter la longueur verticale de la conduite principale d'échappement de l'autre côté de la crémaillère fepuis la ligne d'alimentation principale. Utilisez un tuyau 2 "en PVC pour cette ligne verticale pour recevoir la ligne d'alimentation principale sur les lignes du haut et du drainage des réservoirs de poissons de chaque étagère.
  2. Couper les morceaux de 2 "tuyau en PVC pour la ligne d'échappement principale verticale et utiliser deux" t-shirts en PVC pour recevoir le réservoir de poissons conduites de vidange de chaque étagère. Fin de la ligne d'échappement principale dans le réservoir de stockage d'expulser l'eau recyclée sur un filtre éponge.
  3. Couper une ouverture sur toute la longueur des deux "morceaux de tuyaux en PVC d'un pouce et joindre à la ligne d'échappement principale verticale avec tees PVC pour les lignes horizontales de vidange des réservoirs de poissons.
  4. Boucher les deux "lignes de drain horizontal avec deux« plafond de PVC.
  5. Premier et cimenter les pièces en utilisant les accessoires nécessaires (connecteurs, mamelons ou coudes).

6. Construire les réservoirs de poissons (figure 3).

  1. Avec la perceuse, couper un «trou à l'arrière de l'aquarium 1" 1 1/8 dessous du bord supérieur avec une scie de trou.
  2. Fixez et serrez un 90 degrés 3/4 "fileté coude PVC à l'adaptateur mâle pour créer le tuyau d'échappement de réservoir de poissons. Ajouter un morceau de maille fine avant de visser l'écrou de retenue pour empêcher le poisson zèbre en passant par le système d'échappement.
  3. Placez le réservoir de poissons avec son fin du tuyau d'échappement dans l'espace ouvert de la ligne de drainage derrière les chars

7. Démarrage du système de l'eau

  1. Dans plusieurs récipients, tels que celui utilisé pour le réservoir, mesurer trois fois la quantité d'eau contenue dans le système. Laissez cette eau reposer à température ambiante pendant conditionné pendant 48 heures.
  2. Ajouter de l'eau au système et le laisser circuler pendant un minimum de trois jours.
    1. Changez l'eau dans le système vigoureusement durant les 3 premiers jours de la circulation afin de débarrasser le système de contaminants that résident dans les tuyaux.
  3. Ajouter le poisson zèbre démarrage et laisser le cycle de l'azote de se établir. Normaliser pH à une politique cohérente 7. Gardez sept poisson zèbre par 1,8 L, et de les nourrir deux fois par jour en semaine et une fois par jour le week-end comme suggéré par Linbo 4 et 6 McNabb.
  4. Surveiller le nitrate (<75 mg / L), le nitrite (<10 mg / L), et d'ammonium (0 mg / L) par jour pendant la première semaine après l'ajout de poissons, et des niveaux deux fois par semaine, une fois escomptés ont été maintenus avec des changements réguliers de l'eau .

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Representative Results

La construction du système de pompe et fltres
Une fois le rack est assemblé et mis en place la première étape est de construire le système de pompe et le filtre. Les filtres sont reliés à la pompe du système et sont situés au-dessus du niveau bas de la première étagère, ce qui permet un entretien facile du filtre et le remplacement. De même, la lampe UV est relié à un tuyau en PVC au filtre et maintenu en place avec attaches en plastique pour permettre le remplacement facile de la lampe UV au besoin (figure 4A). Immédiatement après la pompe un filtre en papier, filtre à charbon actif, et une lampe UV sont installés via un tuyau en PVC. Bioballs sont ajoutés à la cuve pour fournir surface pour la croissance de bactéries, qui convertit les déchets toxiques d'ammoniac en nitrates. Un BioBall par gallon d'eau dans le système est une surface suffisante pour permettre la croissance bactérienne. Le couvercle du réservoir en matière plastique peut être monté de sorte qu'en cas de trop-plein des Bioballs resteront dans le réservoir et les chances de contaminationtion sont minimisés. Même si un événement de dépassement de capacité est très peu probable, un système de drainage (ajout d'un drain de tuyau au sommet du réservoir) est une addition simple qui peut être faite au système.

La construction de la ligne principale d'alimentation
La deuxième étape consiste à assembler la ligne principale d'alimentation en eau qui alimentera tous les compartiments qui contiendra les réservoirs de poisson zèbre (figure 4B). Cette ligne est reliée à la lampe UV avec un morceau de tuyau en PVC. Cette ligne se étend verticalement et latéralement à la crémaillère par un T en PVC. L'extrémité inférieure du raccord en T est utilisé pour connecter un morceau de tuyau en PVC qui serviront de vanne de purge pour le système entier.

Les principales lignes qui alimentent les réservoirs se étendent horizontalement à quatre compartiments: haut de la deuxième étagère, en haut de la troisième tablette, en haut de la troisième tablette, et le bas de la cinquième étagère. Depuis le haut de la deuxième, troisième et quatrième lignes du plateau fournir de l'eau aux réservoirs de poissons ils courent à la midline des étagères. Chacune de ces lignes ont sur-vannes individuelles, ce qui permet le contrôle de compartiments individuels.

Un orifice 9 irrigation collecteur est fixée à l'extrémité des lignes horizontales, et ces irrigants fournir de l'eau aux réservoirs de poissons à travers souple ¼ "tube (figure 4B). Chaque orifice de la tubulure d'irrigation comporte une vanne construit en marche-arrêt. En outre, une soupape de marche-arrêt est placé à l'extrémité de la tubulure attachée à chaque port, près de l'entrée du réservoir de poissons, pour un accès facile et le contrôle du débit d'eau. Le tube est inséré dans le réservoir par un trou percé dans le couvercle. Cela aidera à garder fermement le tube inséré dans le réservoir.

La ligne qui se exécute sur le sommet de la cinquième plateau est utilisé comme un soulagement de la pression et il est commandé par une soupape de marche-arrêt individuel. Il est recommandé d'avoir cette ligne de fonctionner à l'arrière de la cinquième étagère de façon à ce que ce domaine peut être utilisé pour le stockage. Depuis l'AMIn ligne fonctionne à la ligne médiane du côté du rack, il est porté à l'arrière en utilisant un coude PVC et un morceau de tuyau en PVC, puis il étend longitudinalement (horizontale), la ligne de soulagement de pression en utilisant un autre coude PVC et un morceau de tuyau en PVC. La ligne de soulagement de pression se termine dans la ligne d'échappement principale qui se étend verticalement de l'autre côté des racks et se termine dans le réservoir d'eau (cette ligne d'échappement est constitué de deux tuyaux en PVC ", voir ci-dessous).

La construction de la ligne principale d'échappement
La troisième étape consiste à monter le système d'échappement, qui se étend latéralement par rapport à la crémaillère, au niveau du côté où le réservoir d'eau est placé (figure 4C). Ce système est construit en utilisant deux tuyaux en PVC »et recueille l'eau qui vient de la ligne de soulagement de la pression et de l'aquarium de drainage (voir la construction de réservoir de poissons ci-dessous). La ligne d'échappement principal se étend verticalement, qui relie la ligne de soulagement de pression sur le dessus de la crémaillère et se terminant dans l'eau de reservoir. En outre, la ligne d'échappement principale reçoit la vidange de réservoirs de poissons à travers les tuyaux horizontaux 2 "en PVC qui se connectent à la ligne principale d'échappement via tees PVC. Ces tuyaux de drainage horizontaux ont une entaille longitudinale 1 'pour recevoir l'eau de vidange des réservoirs de poissons (voir ci-dessous). Ces lignes de drain horizontal de fonctionner à l'arrière et sur les parties inférieures des étagères et ont une pente mineure qui permet à l'eau drainée à courir à la ligne principale d'échappement par gravité. tampons filtrants éponge sont ajoutés aux lignes de drain horizontal afin que l'eau de purge du réservoir de poisson tombe sur les éponges et filtre les débris. Tout un système assemblé est représenté sur la figure 5.

Construction de réservoirs de poissons
Un réservoir de poissons représentatif est montré à la figure 6. La fin de la ligne de vidange du réservoir de poisson est placé dans la ligne d'évacuation horizontale (voir section ci-dessus sur la ligne d'échappement). Un treillis métallique est insérée dans la conduite de vidange dans le réservoir de poissons pour empêcher lale poisson zèbre de natation du réservoir. Ces réservoirs particuliers ont des couvercles qui empêchent les poissons de se échapper et aussi de minimiser les risques de contamination. Si débordement couvercles des citernes seront empêcher les poissons de tomber au sol. Réservoirs avec couvercles sont idéales, mais si un système est construit qui contient des réservoirs sans couvercle puis un petit trou peut être foré près du sommet du réservoir. Cela permettra à l'eau de se échapper tout empêcher les poissons de se échapper.

Fonctionnement
Une colonie de poisson zèbre pourrait être maintenue par des protocoles disponibles et établis décrites ailleurs 3- 6. En résumé, notre installation permet à la pompe du système de circuler le volume du système d'environ 75 fois par heure, en ajustant le débit pour chaque adulte (ou réservoir de larves de poisson) à environ 85 ml / min (ou 45 ml / min pour aquarium larvaire) . Qualité de l'eau est maintenue par filtration biologique actif et des changements d'eau à petite échelle (environ 5% du volume du système) selon les besoins. La surveillance quotidiennedu pH, conductivité, oxygène dissous (DO) niveaux, et de température sont nécessaires pour maintenir des conditions conformes. Les kits sont disponibles dans le commerce pour mesurer le pH et DO niveaux. mètres de conductivité sont également disponibles à l'achat. Afin de tester ces variables quotidienne, retirer 250 ml d'eau du réservoir et effectuer des analyses. Le niveau de pH doit être maintenu à 7,2, ne doit être inférieure à 6 mg, et la conductivité entre 500 et 1 300 uS uS. (SOURCE ICI) La température doit être maintenue à 28,5 ° C. La maintenance du système régulier (3-4 semaines) comprend une variation d'environ 30% d'eau et le nettoyage et le remplacement des plaquettes de filtration et du charbon de bois.

Figure 1
Figure 1: Trois principaux composants d'une installation poisson zèbre. A. Système de pompe et les filtres sont situés à la partie inférieure de l'étagère (premierétagère) et connecter le réservoir d'eau d'actions avec la ligne d'approvisionnement majeure. B. La ligne d'approvisionnement majeure provient de la lampe UV et fournit de l'eau aux trois étagères supérieures qui contiennent des réservoirs de poissons. Notez que chaque compartiment d'étagère est alimenté de manière indépendante et peut être contrôlé individuellement (marche ou arrêt) au moyen d'une vanne. Cet axe est également la vanne de vidange à l'extrémité inférieure et à l'extrémité supérieure continue en tant que ligne de soulagement de pression qui se termine dans la ligne d'échappement principale. C. La ligne d'échappement principale reçoit de l'eau à partir de la ligne de soulagement de pression et de l'autre compartiments de citernes de poissons et se termine dans les réservoirs d'eau d'achat d'actions. Notez que chaque plateau a une ligne d'échappement de réservoir de poissons qui sont des tuyaux en PVC et sont longitudinalement ouvert à recevoir de l'eau pour les réservoirs de poissons individuels. Ces lignes sont légèrement inclinées pour permettre à l'eau afin de fonctionner par gravité vers la ligne d'échappement principale.Se il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Figure 2
Figure 2:. Trois principaux composants d'une installation de poisson zèbre et assemblé facilement fonctionnelle Notez que le réservoir d'eau du stock a déjà Bioballs. L'eau de la conduite principale d'échappement va tomber sur un filtre d'éponge placée sur maille dessus du niveau de l'eau (pour plus de clarté ce ne est pas représenté dans la figure). On notera que pour plus de clarté la seconde tablette ne dispose que de certains aquariums représentés, l'arroseur montré ne dispose que de quatre tubes d'alimentation et la ligne d'échappement du réservoir de poissons est transparent. Chaque étagère du rack peut contenir neuf réservoirs 1 L de poisson et avoir un irrigant 9 du port.

Figure 3
Figure 3:. Unité de Fish tank Le réservoir de poissons est acquise dans un magasin pour animaux de compagnie régulière et il a une capacité de 2 L A. système de drainage Le réservoir de poissons est construit en perçant un trou de 1 1/8 "à l'arrière de. le réservoir, puis 3/4 "morceaux de tuyaux en PVC sont placés dans un inversé" "forme à l'aide d'un 3/4" L coude PVC. Ce système de drainage va tomber dans le côté ouvert des lignes d'échappement de réservoir de poissons situés à l'arrière des réservoirs de poissons. B. Image illustrant l'installation d'un maillage dans le système de drainage de réservoir de poissons. La maille empêche le poisson zèbre d'être drainé vers les lignes d'échappement.

Figure 4
Figure 4: la construction de pièces individuelles. A. Le système de filtre et la pompe est de trois sur la grille inférieure du système. La pompe est reliée à trois mécanfiltres iCal suivie par un filtre UV pour éliminer les contaminants de l'eau du système. B. La ligne d'alimentation horizontale se termine dans un collecteur d'irrigation 9 du port, qui fournira de l'eau douce et de l'oxygène à chaque réservoir. La ligne d'alimentation de chaque étagère a une soupape de marche-arrêt qui peut être utilisé pour empêcher l'eau de chaque étagère à des fins de nettoyage et de quarantaine. C. La ligne d'échappement du réservoir poisson jette dans la conduite principale d'échappement pour entrer à nouveau la circulation. La ligne de surpression se jette aussi dans la ligne d'échappement principale.

Figure 5
Figure 5:. Terminé système Le système complet comprend un système de pompe et de filtre, une ligne verticale d'alimentation principale, une conduite d'alimentation horizontal pour chaque tablette, une ligne réservoir d'échappement, une conduite de détente de pression, et une conduite principale d'échappement pour un système de circulation contenue .


Figure 6:. Réservoir de poissons Représentant Le réservoir de poissons contient une ligne de drainage qui sera en contact avec les lignes horizontales de drainage dans le système.

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Discussion

Le but principal de cet article est de démontrer que la construction d'une installation fonctionnelle poisson zèbre ne est pas compliqué et peut être construit par les chercheurs de poissons débutants ayant une connaissance minimale de la construction. En outre, cet article montre que les matériaux pour cette installation poisson zèbre fonctionnelle peuvent être acquises facilement et à moindre coût dans les magasins de fournitures pour animaux locaux ou les quincailleries. Une fois que tous les matériaux et les outils ont été acquises à la construction du système, et les réservoirs de poisson prend environ une journée de travail. Le 72 hr première manche permet à toute défaillance du système, comme les fuites ou faible pression d'eau, à déterminer. Cette première manche permet aussi de contaminants dans le système pour être retirés de la circulation. Par exemple, la colle de PVC peut contenir des matières organiques dangereux qui seront supprimés au cours des premières heures de circulation. Le système comporte une vanne de vidange principale qui permet et facilite l'ajustement du volume et le remplacement de l'eau traiteme ance. De plus, le système comporte une ligne de soulagement de pression qui facilite également le réglage de la pression de l'eau. Cette ligne est utile lorsque seulement un ou deux compartiments (étagères) seront utilisés car il permet la régulation de la pression de l'eau.

L'installation est de conception modulaire permettant l'utilisation de 1, 2 ou 3 compartiments (36 réservoirs de poissons de 1,8 L) pour répondre aux besoins de capacité des chercheurs individuels. Les soupapes de marche-arrêt placés dans chaque compartiment de faciliter l'isolement des différentes parties du système. Ce système de valve est également utile d'éviter la diffusion de l'infection potentielle et de faciliter le nettoyage du système de compartiments. En outre, chaque alimentation en eau du réservoir de poisson a deux valves, l'une à l'irrigant 9 de port et une à la tubulure flexible à l'entrée du réservoir de poissons. Ce système de double valve permet un réglage fin de la pression de l'eau et de faciliter également les procédures de nettoyage ou d'extraction de poissons ou la manipulation.

t "> Une documentation appropriée d'ammoniaque, nitrites et nitrates est essentiel pour le bon fonctionnement de l'installation. Pour cela, les Bioballs sont importants car ils fournissent surface suffisante pour nitrifiantes bactéries à la croissance. Une fois la colonie de poisson est stable, l'installation peut être facilement modifié pour utiliser les réservoirs de poissons grands ou plus petits. En outre, l'installation peut être modifié pour reproduire le poisson zèbre en suivant les protocoles disponibles dans la littérature 5. En outre, l'installation peut être modifié pour ajouter d'autres modules ou des supports d'étendre les capacités du système .

L'écoulement de l'eau douce dans le réservoir fournit suffisamment d'oxygène frais pour qu'il n'y ait pas besoin d'ajouter un oxygénateur supplémentaire. Le renouvellement de l'air qui se produit dans le réservoir d'eau est une source suffisante d'oxygène. Si de plus grands réservoirs sont utilisés, une source d'oxygène supplémentaire peut être ajouté. Il convient également de noter que, sans apport d'eau douce dans le réservoir, les poissons suffoquent, il est donc essentiel que le débit de l'eau be étroitement surveillés afin de se assurer que rien ne bloque les conduites d'eau. Il est essentiel que la température de l'eau soit maintenue à 28,5 ° C. A température constante peut être obtenue en maintenant la température de la pièce dans laquelle le système est logé à 28,5 ° C. En variante, une source de chauffage de l'aquarium peut être acheté dans le but de maintenir une température constante. Maintien de la qualité de l'eau est essentielle aux résultats expérimentaux cohérentes. Il ya beaucoup de sources disponibles pour aider à déterminer exactement les paramètres de qualité de l'eau en fonction des conditions expérimentales.

réservoirs de poissons sont nettoyés tous les 7 à 10 jours, et ensuite pulvérisés avec 70% d'alcool avant de les réutiliser. Il est également suggéré que le rack de chrome être nettoyé et séché à ce point pour éviter la rouille et construire. Si des signes de contamination sont observés, réservoirs individuels sont désinfectés avec une solution d'eau de Javel 2% 8. La santé générale est suivie avec une attention particulière aux signes d'infection (enflure, ulcères de la peau, exolpthalmia, COLOR OFF, etc.), bulle maladie de gaz (en raison de concentrations sursaturées de gaz, les changements rapides de température de l'eau, des problèmes dans le système de plomberie), hyperplasie des branchies (taux élevés d'ammoniac, le cuivre, le zinc ou le chlore actif dans l'eau) , scoliose (en raison de carence en vitamine C) ou une inflammation de l'œuf et associé fibroplasies (en raison de la rétention d'ovule de la femme qui pousse sur la paroi abdominale).

La construction de cette installation est flexible et permet à un système plus petit ou expansé. En prenant les idées de construction de base, cette installation peut être organisé pour répondre aux besoins de recherche de base de différentes tailles. Parce que la construction peut varier d'une institution, l'étape la plus critique dans le protocole est le 72 hr première manche, et le suivi quotidien de l'ammonium, du nitrate, et les niveaux de nitrite pendant la première semaine de la construction. Excellente qualité de l'eau aidera à maintenir la santé du poisson. La plupart des protocoles actuels disponibles pour un syste de poisson à prix abordablem nécessite un débit d'eau en plein air 3. Avoir de l'eau à l'abri du plein air réduit les risques de contamination de l'eau et l'évaporation. Maintenance sur un système fermé est minime en comparaison avec les systèmes de plein air communs.

Si des problèmes surviennent dans la construction de l'installation (fuites, faible pression d'eau, etc.) On peut remplacer un tuyau cimenté simplement en coupant la zone de préoccupation dans l'installation et le remplacement des pièces de la même manière par étapes énumérées ci-dessus . Ce système peut être vulnérable à grande perte d'eau due à de petites fuites, qui peuvent devenir dangereux pour le poisson se il est laissé inaperçu. Pour un investissement minimum un dispositif d'arrêt flotteur détecter le moment où le niveau d'eau a chuté en dessous d'un seuil de sécurité et arrêter le système. Cela peut être nécessaire si la surveillance étroite du système ne est pas disponible. Avec les modifications correctes, il ya très peu de limitations de ce système est confronté en plus le manque de mobilité. Une fois que ce système est de construireed il est très difficile de se déplacer sans couper certaines parties et de les recementing dans le nouvel emplacement. Ce moyen de limitation de la mobilité que le système doivent idéalement être maintenu dans une espace de travail. Si la mobilité est souhaité il ya de petites modifications qui peuvent être apportées pour accroître la flexibilité. Ajouter un syndicat au début de chaque fourniture latérale, la ligne d'allégement de la pression, le refoulement de la pompe, et au-dessus de la vanne de vidange. Les lignes de vidange peuvent être montés à sec au lieu de cimentés en place. Ajout d'un accouplement flexible à la section de pompe également aider à la mobilité. Ce est un montant supplémentaire de

La construction simple et l'entretien de ce système signifie que les protocoles actuels de la littérature sont disponibles pour les petits établissements de recherche 1,2,10-12. L'entretien est simple ce qui en fait un système idéal pour la recherche d'étudiants de premier cycle. Ce système est excellent pour les laboratoires de recherche et d'enseignement indépendants, aussi.

En conclusion, ce type deinstallation est abordable, facile à construire, et fonctionnel pour l'expérimentation in vivo. Cette installation est idéale pour les institutions disposant de ressources limitées et l'espace limité de l'élevage. La recherche du poisson zèbre est un domaine qui est utilisé pour plusieurs types d'études, y compris la pharmacologie, la physiologie, le développement, ou même des études génétiques. En fait, le grand nombre de mutant disponibles ou poisson zèbre transgénique soutient lignes de recherche innovants dans pratiquement tous les domaines de la biomédecine. En outre, ce système peut être utilisé pour améliorer les possibilités de recherche et les expériences en classe pour les majors de sciences petits établissements principalement de premier cycle et d'inspirer la prochaine génération de chercheurs en sciences biomédicales.

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Disclosures

Les auteurs déclarent aucun conflit d'intérêt pour le présent document.

Acknowledgments

Les auteurs tiennent à remercier le Bureau de la recherche du Presbyterian College School of Pharmacy de soutien financier de ce projet à travers les bourses petite pharmacie pour la recherche & Collaboration (SPARC) Award. Les auteurs remercient M. John Smink, directeur du Laboratoire de recherche des animaux aquatiques, Clemson University, Clemson, SC pour sa révision technique assistance manuscrit.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Item Brand Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit Style Selections 1
18-Gallon General Bucket/Tote Centrex Plastics: LLC Rugged Tote 1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord Master Electrician 1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp Smartpond  1
Whole House Water Replacement Filter Whirlpool 6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing Whirlpool 2
Thread Seal Tape William H Harvey 1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement Oatey  1
8-fl oz LO-VOC Primer Oatey  1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing Mister Landscaper  1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve Mister Landscaper 33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter  Mister Landscaper 6
Drop-In Filter with House  Whirlpool 6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow LASCO 3
2-in Dia 90-Degree Tee LASCO 3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow LASCO 15
3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 7
3/4-in Dia PVC Tee LASCO 12
2-in Dia PVC Cap LASCO 3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve American Valve 5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter Lasco 8
3/4-in Dia PVC Cap Lasco 1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe Charlotte Pipe 4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe Charlotte Pipe 3
11/16x1-7/80 PVC ring SXT 10
½” PVC male adapter SXT 1
¾” PVC coupling  SXT 1
½” PVC female adapter  SXT 1
link
1.8 L Dual Beta Keeper Top Fin 27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) SXT 28
90-degree ¾” threaded PVC elbow SXT 27
Fine Mesh N/A 1 yard
Bulkhead Connector N/A 1
Hacksaw N/A 1
Drill N/A 1
Hole saw N/A 1
Adjustable Wrench N/A 1
Pliers  N/A 1
Tape Measure N/A 1
Safety Glasses N/A 1
Work Gloves N/A 1

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References

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Paige, C., Hill, B., Canterbury, J., More

Paige, C., Hill, B., Canterbury, J., Sweitzer, S., Romero-Sandoval, E. A. Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility. J. Vis. Exp. (93), e51989, doi:10.3791/51989 (2014).

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