手ごろな価格で簡単に構築ゼブラフィッシュ施設の建設

Abstract

生体内では生物医学研究は、臨床の進歩に体外調査結果に変換するために極めて重要である。限られたリソースを持つ小型の学術機関は、それが事実上不可能に研究のための典型的なげっ歯類の施設を構築し、維持するために見つける。ゼブラフィッシュ研究は薬理学、生理学、発達および遺伝的研究におけるin vivo研究のための貴重な代替手段であることが実証されている。この記事では、機能的なゼブラフィッシュ施設が簡単かつ手頃な価格の方法で構築することができることを実証している。私たちは、そのような施設は、最小限のツールと​​専門知識を用いて約1営業日で構築することができることを実証している。本研究で構築し27 1.8 L水槽のゼブラフィッシュ設備の費用は約1500ドルだった。私たちは3ヶ月間の初期作業150魚のコロニーの維持が千ドルであると推定している。このプロジェクト研究のためにゼブラフィッシュの養殖するために導入された、関係の学生が、提案している。

Introduction

彼らはシステム及び生物レベルで翻訳されるために、インビトロ研究に許可しているため、生体内でのモデルは、総合的な生物医学研究の実施に不可欠である。例えば、小型哺乳類、すなわちげっ歯類との研究は、薬物の開発および利用可能な薬物の改善に必要な証明されている。しかし、（財政的およびロジスティック）複雑さは、それは実験のために齧歯類の施設を建設し、維持することは事実上不可能小さな研究の学術機関で提案するかもしれない。それにもかかわらず、in vivoでの研究は、より少ない複雑な物流を必要とする他の動物種を用いて行うことができる。ゼブラフィッシュ（ ゼブラフィッシュ ） が正常に遺伝学、開発、病態生理、および薬理^{1,2,10,11,12を}研究するためのin vivoモデルとして使用されてきた。 rに比較した場合の実験のためにゼブラフィッシュを収容するために必要な設備が比較的単純でかなり安価であるodent施設。 Kim ら ^3は最近^、詳細に部品や人件費の両方が含まれている約1500ドル、のために構築することができる80のタンクゼブラフィッシュの住宅システムを記載している。これは商業的供給者の任意の数から既製、80タンクシステムを購入することを要求され​​ることはほぼ8500ドルとは全く対照的である。しかしながら、説明は、Kim らによって与え。魚研究の初心者のために従うことが複雑で困難な場合がある。我々はゼブラフィッシュ施設が1500ドルの投資のための簡易的に構築することができると信じています。

小さ ​​な学術機関での生体内の施設の設立は、より強力かつ徹底した調査を生成すると追加のツール彼らの学部を提供しています。 中でサポートされているin vitroデータvivoでの結果は、一般的にのみ体外のアプローチで使用して得られたデータよりもより包括的な生物医学研究を生産する。そのため、in vivoでの研究施設の実装が大幅に全体的な研究努力における機関の成功強化します（研究への学生の暴露、出版物、通信、外部資金の追求、 等 。）。

この研究で説明するようなゼブラフィッシュ施設の建設は、フィナンシャル·タイムズを収縮時に（in vivoでの研究施設なしまたは機関）限られた施設との研究教育機関に最適です。

Protocol

注：これらのプロトコルは、プレスビテリアンカレッジのIACUCのガイドラインに従ってください。

表1に列挙した材料を取得します。

2.メーカーの指示に従って5シェルフChromeを組み立てます。これは施設を収容するために使用されます。

3.水リザーバ及び濾過システム（図1A及び図2）を構築する。

1. ガイドとして、図1Aを使用して、最終的な設置場所とサイズを決定するために、18ガロンのバケツ、ポンプ、フィルター、紫外線ランプをレイアウト。
2. 部品がレイアウトされると、測定し、組み立てに必要な長さに¾ "PVCパイプをカット。特定のスペースのニーズと制限に応じてすべてのパイプの長さを変更します。
3. PVCプライマーとセメントを使用して、以前にレイアウトとして配管や継手を組み立て、以下の（3.3.2および3.3.3）を参照してください。
   1. サンドサンドペーパーによるパイプの切断端部は、タッチANに滑らかになるまでデブリがないdは。
   2. 総理パイプの外側と塩ビプライマーから含ま綿棒で購入したPVCプライマーとフィッティングの内側。
   3. 含ま綿棒を使用してパイプの外側にPVCセメントを適用することにより、一緒にパイプと継手セメント。塩ビセメントを必要とするすべての手順について繰り返します。
   4. 棚建設の片側に18ガロンのバケツを置きます。
   5. リザーバタンクの側面にバルクヘッドコネクタを取り付けます。
   6. バルクヘッドに¾ "PVCパイプを取り付けます。
   7. ¾ "¾を使用してポンプ入口へのパイプ」のもう一方の端を取り付け金具作るネジ付き。
   8. 2 90度の肘と¾ "PVCパイプを使用してポンプにフィルタを接続します。
      1. 1活性炭フィルター、続いて1枚のフィルタがデブリをフィルタし、水に塩素および化学のレベルを減少させるために使用する。
   9. フィルタaccordiにUVランプを接続します製造元の説明書をngの。
4. ワイヤータイを使用して、ラックの最初の棚の上部側にポンプとフィルターシステムを取り付けます。選択した棚/ラックのサイズとレイアウトによるアセンブリおよび添付ファイルの順序を変更します。
5. ポンプとフィルターシステムが組み立てられ、棚に取り付けられた後、水の貯水池への水のガロン当たり1 biobal​​lを追加します。

4.主電源ライン（図1Bおよび2）を構築する。

1. 測定主電源にUVランプを接続するPVCパイプ」3/4部分を切断し
2. UVフィルターから来るのPVC排気」¾にティーを接続することにより、主電源ラインを開始するためのPVCティー」¾を使用してください。 。
   1. システムのメンテナンス洗浄のためのドレインとして機能するPVCティーの底に開閉弁を追加します。
   2. 「¾を測定し、切断したPVCティー」3/4上部から主電源ラインを起動し、PVCラックの棚のそれぞれについて、供給管を提供する所望の長さのパイプ。
   3. インストール¾ "ラックの各棚に入ります水平線のためのPVCティーを。
   4. 必要に応じて（提示）、追加¾ "開閉弁各棚供給ライン各棚の単離およびシステムのモジュール設計を可能にする。
3. 一番上の棚に線を減圧として¾ "PVCパイプを使用してください。この行が棚の裏に実行されている場合は、保存のために、この棚を使用しています。開閉弁¾ "メイン排気ライン（ 図1B）の線減圧を終了する。
4. 上記のステップは、プライム完了し、リザーバとろ過システムを構築する際に、以前に行ったように一緒に塩ビ管を固めるされたら。

5.主排気ライン（図1Cおよび2）を構築します。

1. ラックfの他方側に主排気ラインの垂直方向の長さを実行する主供給ラインにデキュー。各棚から魚の水槽からトップとドレインラインでの主電源ラインを受け取るために、この垂直線のために2 "PVCパイプを使用してください。
2. 「垂直主排気ライン用の塩ビ管と2を使用する「2の部分をカットし、各棚から水槽のドレイン線を受け取るためにPVCティーを。スポンジフィルター上で再生水を排出するストックタンク内の主排気ラインを終了します。
3. 2「PVCパイプ片の全長を開いて1インチをカットし、水槽からの水平ドレイン線用のPVCティー垂直主排気ラインに接続する。
4. PVCキャップ2」2水平ドレイン線を「キャップ。
5. 首相と必要な付属品（コネクタ、乳首や肘）を使用して作品を固める。

6.水槽（図3）を構築。

1. ドリルで、ホールソーと上辺以下の「魚タンク1の背面に穴 "1 1/8を切った。
2. 90度を取り付け、締め3/4「魚タンク排気管を作成するために男性のアダプタにPVC肘をスレッド化。排気システムを通過するゼブラフィッシュを防ぐために、保持ナットをねじ込む前に、細かいメッシュの部分を追加します。
3. その排気管がタンクの後ろに排水ラインのオープンスペースに終わると水槽を置き

7.水システムの起動

1. そのようなリザーバーに使用されるものなど、いくつかの容器中に、システム内に含まれる水の3倍の量を測定する。この水は48時間調整のため室温で放置しましょう​​。
2. システムに水を追加し、3日間の最低循環してみましょう。
   1. 汚染物質のTHAのシステムを取り除くために、循環の最初の3日間を通して積極的にシステム内の水を変更tは、パイプ内に存在する。
3. スターターゼブラフィッシュを追加し、窒素サイクルの確立を取得することができます。 1.8 Lあたり7ゼブラフィッシュを保持し、かつのLiNbO ⁴とマクナブ⁶によって示唆されているように、週末の間、1日1回、週の日の間に1日2回、それらを供給し、一貫性のpHを7に正規化する。
4. 、硝酸塩（<75 mg / Lの）を監視魚を追加した後の最初の週の間の毎日の亜硝酸塩（<10 mg / Lの）、およびアンモニウム（0ミリグラム/ L）、週に2回、一度所望のレベルは、通常の水の変更に維持されている。

Representative Results

ポンプとFltersシステムの構築
ラックを組み立てる最初のステップを設定したら、ポンプおよびフィルタシステムを構築することである。フィルタは、システムのポンプに接続されており、容易にフィルタのメンテナンスや交換を可能にする第1の棚の底レベルの上方に位置している。同様に、UVランプは、フィルタのPVCパイプに接続され、必要に応じて（ 図4A）のようなUVランプの容易な交換を可能にするために、プラスチック製のワイヤータイで適所に保持される。直ちにポンプ次の紙フィルター、活性炭フィルター、UVランプはPVC管を介して設置されている。 Biobal​​ls硝酸塩に有毒なアンモニア廃棄物を変換する細菌の成長のための表面を提供するために、タンクに添加される。システム内の水のガロン当たり1つbiobal​​lは細菌の増殖を可能にするのに十分な領域である。オーバーフローの場合にbiobal​​lsリザーバとcontaminaの機会に残るように、プラスチック製の貯蔵器の蓋を装着することができるンが最小化されている。オーバーフローイベントが非常に低い場合であっても、（リザーバの上部のパイプの流出を追加）排水システムは、システムにすることができる容易な付加である。

主電源ラインの構築
第二段階は、ゼブラフィッシュタンク（ 図4B）を含有するすべてのコンパートメントをフィードバックする主給水ラインを組み立てることである。このラインは、PVCパイプの部分を備えたUVランプに接続されている。この行は、PVCティーを介してラックに上下左右に実行されます。ティーの下端がシステム全体の排水弁として機能するPVCパイプの部分を接続するために使用される。

4つの区画に水平に実行タンクを養うメインライン：第五の棚の第2の棚の上、第三の棚の上、第三の棚の上、下。第2、第3、第4の棚ラインの上部は、水槽に水を提供するので、それらはmidlinで実行棚の電子。これらのラインの各々は、個々の区画の制御を可能にする個別の開閉弁を有する。

9ポート灌漑マニホールドは、水平線の端部に取り付けられており、これらの灌漑は、可撓性¼ "チューブ（ 図4B）を介して水槽に水を供給する。灌漑マニホールドのすべてのポートが内蔵開閉弁を有している。また、開閉弁は、簡単にアクセスし、水のフロー制御のため、水槽の入口付近に、各ポートに接続されたチューブの端部に配置されている。チューブは蓋に穿孔された穴によってタンク内に挿入される。これはしっかりとタンク内に挿入されたチューブを維持するのに役立ちます。

第五の棚の上で実行されるラインは、圧力緩和剤として使用され、それは個々の開閉弁で制御される。これは、この領域はストレージに使用できるように、第五の棚の奥で実行この行を持っていることをお勧めします。舞ので、n個のラインは、ラックの側面の正中線で、それはPVCの肘と塩ビ管の一部を使用して、バックにされ実行され、その後、別のPVC肘と片を用いて、圧力リリーフラインとして縦方向（水平）を実行します塩ビ管の。圧力リリーフラインは、ラックの反対側に垂直に実行され、（この排気ライン2 "PVCパイプで構成され、以下を参照）、水リザーバ内に終了する主排気ラインで終わる。

メイン排気ラインの構築
第3のステップは、水リザーバが配置される側（ 図4C）に、ラックに横方向に実行される排気システムを組み立てることである。このシステムは、2 "PVCパイプを使用して、圧力リリーフラインから来る水を収集し、水槽から（下の水槽の建設を参照）排水構築されています。主排気ラインは、ラックの上に圧力リリーフラインを接続し、水に再終了垂直に並べservoir。また、メイン排気ラインは、PVCティーを介して主排気ラインに接続する水平2 "のPVCパイプを介して水槽から流出​​を受ける。これら水平排水管は水槽（下記参照）からのドレン水を受けるための1 'の長手方向切断を持つ。これらの水平ドレイン線は、背面にある棚の一番下の部分で実行され、排水水は重力によって主排気ラインに実行することができますマイナー傾斜を持っている。水槽ドレン水をスポンジ上に落下し、デブリをフィルタするようにスポンジフィルターパッドは、水平ドレイン線に追加される。全体組み立てシステムを図5に描かれています。

水槽の構築
代表的な水槽は、 図6に示されている。水槽ドレンラインの端部は（排気ライン上のセクションの上を参照）の水平ドレンライン内に配置される。金網を防止するために、水槽内のドレイン線に挿入されタンクの外に泳ぐからゼブラフィッシュ。これらの特定のタンクは逃げる魚を防止し、また、汚染の機会を最小限に蓋を持っている。オーバーフローが発生した場合は、タンクの蓋は、床に落ちるの魚を防ぐことができます。蓋をタンクには小さな穴がタンクの上部付近にドリル加工することができるその後、蓋なしでタンクが含まれている理想的ですが、システムが構築されている場合。これは逃げる魚を防ぐながら水を逃がすことができるようになります。

機能する
ゼブラフィッシュコロニーは他の場所で^3〜6で説明入手可能と確立されたプロトコルによって維持することができた。簡単に言えば、我々の施設は約85 ml /分（または仔魚タンク45 ml /分）でシステム·ポンプは、それぞれ成人流量を調整（または仔魚タンク）によってシステムボリューム時間あたり約75回循環させることができ。必要に応じて水質が活性な生物学的濾​​過および小規模水変化（システム容量の約5％）によって維持される。日常的監視pH、導電率、溶存酸素（DO）レベル、及び温度の一貫性の条件を維持するために必要である。キットは、pHを測定するために市販されており、レベルのDO。導電率メーターもご購入いただけます。毎日、これらの変数をテスト容器から250mlの水を除去し、分析を行うために。 pHレベルは7.2に維持されるべきで、DOは6未満mgであり、500μSと1300μSの間の導電性べきである。 （ここではソース）温度は28.5℃に維持されなければならない。定期的なシステムメンテナンス（3 - 4週間）は、約30％の水の変化と洗浄し、フィルターパッドおよび木炭の交換を含む。

図1：ゼブラフィッシュ施設の三つの主要なコンポーネント。 A.ポンプおよびフィルタシステムは、最初に（棚の底部に配置されている棚）とは、主要な電源ラインと水のストックタンクに接続してください。B.は、主要な供給ラインがUVランプから派生し、魚の水槽が含まれている3つの上の棚に水を供給している。すべての貯蔵コンパートメントは、独立して供給され、個別に弁により（オンまたはオフ）を制御することができることに留意されたい。このメインラインはまた、下端の主排出弁を有し、上端に主排気ラインに終了する圧力リリーフラインとして継続する。C.主排気ラインは、圧力リリーフラインから異なるから水を受け取る水槽のコンパートメントとは、水のストックタンクに終了します。すべての棚は、PVCパイプであり、個々の魚の水槽のために水を受け取ることが縦方向に開放されている水槽の排気ラインを持っていることに注意してください。これらの行は、少し水が主排気ラインに重力によって実行できるように傾斜している。この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。

図2：ゼブラフィッシュ施設の三つの主要なコンポーネントを組み立て、容易に機能的には、水のストックタンクが既にbioballsを持っていることに注意してください。主排気ラインからの水は、水位（明確にするために、この図には示されていない）上記のメッシュ上に配置されたスポンジフィルター上に落ちる。明確にするために第2の棚が示さ洗浄器のみ4供給管を有し、図示の一部だけ水槽を持ち、水槽排気ラインが透明であることに留意されたい。ラックの各棚は9 1Lの魚の水槽を保持し、9ポート洗浄器を持つことができます。

図3：魚タンクユニット水槽は、通常のペットショップで取得し、2Lの容量を有するA.水槽排水システムはの裏側に1 1/8 "の穴を穿孔することによって構築される。タンクは、その後3/4 PVC肘L "3/4を使用して形状」「PVCパイプ片は、逆に配置されます」。この排水システムは、水槽の背面にある水槽の排気ラインの開放側に分類されます。B.イメージ水槽排水システムにメッシュのインストールを描いた。メッシュは、排気ラインへ排出されるのゼブラフィッシュを防ぐことができます。

図4：個々の部品構成。 A. 3つのフィルタおよびポンプシステムは、システムの底部ラックにある。ポンプ三mechanに接続されているiCalのフィルタは、システムの水から汚染物質を除去するためにUVフィルターが続く。B.水平電源ラインが各タンクに新鮮な水と酸素を供給し、9ポート灌漑マニホールド、で終わる。各棚への供給ラインは、クリーニングおよび隔離の目的で、各棚に水を止めるために使用することができる開閉弁を有している。C.水槽排気ラインは、循環を再入力する主排気ラインに注ぐ。圧力リリーフラインは、メイン排気ラインに注ぐ。

図5：完成システム完成したシステムは、ポンプとフィルタシステム、主垂直電源線、各棚水平電源ライン、タンク排気ライン、圧力リリーフライン、及び含まれる循環システムのための主排気ラインを含んでいる。 。

図6：代表水槽水槽は、システム内の水平方向の排水ラインと接続する排水ラインが含まれています。

Discussion

この記事の主な目的は、機能的なゼブラフィッシュ施設の建設が複雑ではなく、最小限の工事知識を持つ初心者の魚の研究者が構築できることを実証することである。さらに、この資料では、この機能のゼブラフィッシュの施設のための材料は、地元のペット用品店やホームセンターから容易にかつ低コストで取得できることを示している。すべての材料とツールは、システムの構築や魚の水槽を取得した後は約1営業日かかります。 72時間最初の実行は、そのようなリークや、測定すべき低水圧、として、システム内の任意の障害を可能にする。システム内の汚染物質が循環から除去されるために、この最初の実行もできます。例えば、PVC接着剤は、循環の最初の数時間の間に除去される有害な有機材料を含んでいてもよい。システムはmaintenボリュームと水の交換の調整を可能にし、容易に主排水弁を有するンス。さらに、システムはまた、水の圧力の調整を容易にする圧力リリーフラインを有している。それは水圧の調節を可能にするので、1つまたは2つだけの区画（棚）が使用されますと、このラインが便利です。

施設は、個々の研究者の容量のニーズを満たすために1、2または3コンパートメント（1.8 Lの36水槽）の利用を可能にする設計でモジュール化されています。各区画に配置された開閉弁は、システムの異なる部分の単離を容易にする。このバルブシステムは、潜在的な感染の拡散を回避するために、そして区画することにより、システムの洗浄を容易にするためにも有用である。さらに、すべての水槽の水の供給は、2つのバルブ9のポート灌水一つと水槽の入口可撓性チューブ少なくとも一つを有している。この二重弁システムは、水の圧力の微調整を可能にし、また清掃手順または魚の抽出や操作を容易にする。

T ">アンモニア、亜硝酸塩と硝酸塩の適切な文書は、施設の適切な機能のために不可欠である。彼らは成長に硝化細菌のための十分な表面を提供するので、このために、biobal​​lsが重要である。魚のコロニーが安定したら、施設ができ容易に拡大または縮小水槽を使用するように変更する。また、施設は文献⁵で利用可能なプロトコルを以下のゼブラフィッシュを飼育するように変更することができる。また、施設がシステムの機能を拡張するために他のモジュールまたはラックを追加するように修正することができる。

追加の酸素供給器を追加する必要がないように、タンクに新鮮な水の流れが十分に新鮮な酸素を提供する。貯水槽で発生する空気交換は、酸素の十分な供給源である。大きなタンクが次に使用される場合、追加の酸素源を添加してもよい。これは、タンクに新鮮な水の流れずに魚が窒息することも留意すべきであるので、その水流bは不可欠である密接に何もないことを保証するために監視eは、水のラインをブロックしている。これは、水の温度が28.5℃に維持することが必須である。一定温度は、システムが28.5°Cに収容されている部屋の温度を維持することによって達成することができる。代替的に、水槽加熱源は、一定の温度を維持するために購入することができる。水質を維持することが一貫して、実験結果に不可欠である。実験条件に基づいた正確な水質パラメータを決定するために利用できる多くの源がある。

10日、その後、再利用の前に70％アルコールを噴霧 - 魚タンクは7日毎清掃されます。また、錆を防止し、構築するためにクロムラックは、この時点で洗浄し、乾燥させることを示唆している。汚染の兆候が認められた場合に、個々のタンクは2％漂白剤溶液⁸で消毒されている。一般的な健康は、感染の兆候に特別な注意を払って監視されている（皮膚潰瘍、腫脹、exolpthalmiaは、オフ色など ）、気泡症（原因）過飽和ガス濃度、水の温度の迅速な変化、配管システムの問題）、鰓過形成（水中のアンモニア、銅、亜鉛、または活性塩素の高レベルをまたは卵に関連する炎症及び（腹壁を押し出す女性の卵の保持のために）線維増殖（これはビタミンC欠乏）、脊柱側弯症。

この施設の建設は柔軟性があり、小さいまたは拡張されたシステムが可能になります。基本構成のアイデアを取ることによって、この機能は、様々なサイズの基礎研究の必要性に合うように配置することができる。建設は機関によって異なる場合がありますので、プロトコルの中で最も重要なステップは、72時間最初に実行され、建設の第一週の間、アンモニウム、硝酸塩、および亜硝酸塩レベルの毎日の監視。優れた水質は、魚の健康を維持する助けとなる。手頃な価格の魚のsysteのために利用可能な現在のプロトコルの多くは、mは、オープンエアの水の流れ^3が必要です。オープンエアから保護水を持つことは、水質汚染や蒸発のための機会を最小限に抑えます。一般的なオープンエアシステムと比較した場合、クローズドシステム上のメンテナンスが最小限である。

問題は、施設の建設に（漏れなど 、低水圧を、。）が生じた場合、上記のように、1つは、単純に、施設内の関心領域を切り取ると同じ段階的に部品を交換することにより、接合パイプを交換することができ。このシステムは、気付かれないままの場合、魚に有害になる可能性がある、小さな漏洩に起因する大規模な水の損失に対して脆弱である可能性があり。最小限の投資のためにフロート遮断装置は、水位が安全なしきい値を下回ったことを検出し、システムをシャットダウンします。システムの綿密なモニタリングが利用できない場合、これが必要になることがあります。正しい修正では、このシステムは移動性の欠如以外に直面している非常にいくつかの制限があります。このシステムが構築されたらそれはいくつかの部分を切断し、新しい場所にrecementingことなく移動することは非常に困難であるエド。この移動性の制限は、システムが理想的にワークスペース内に維持する必要があることを意味する。移動性が望まれる場合の柔軟性を高めるために行うことができる小型の修正がある。横方向の各供給圧力リリーフライン、ポンプ吐出の開始時に組合を追加し、排水バルブ上記。ドレイン線は、乾燥嵌代わりの代わりに接合することができる。ポンプ部にフレキシブルカップリングを追加することもモビリティを支援します。これは、追加される

このシステムのシンプルな構造とメンテナンスが文献に見現在のプロトコルは、小さな研究機関^1,2,10-12に利用可能であることを意味します。保守この学部学生の研究のための理想的なシステム作る簡単です。また、このシステムは、独立した研究と教育ラボに最適です。

結論として、このタイプの施設は、手頃な価格の構築が容易であり、in vivoでの実験のための機能です。この施設は限られた資源と制限された畜産スペースを持つ機関に最適です。ゼブラフィッシュの研究は、薬理学、生理学、発達、あるいは遺伝学的研究を含む研究は、複数の種類のために使用される領域である。実際には、利用可能な変異体またはトランスジェニックゼブラフィッシュの大多数は、生物医学の事実上すべての分野の研究の革新的なラインをサポートしています。さらに、このシステムは、小型の主に学部機関における科学専攻のための研究の機会と教室の経験を強化し、生物医学科学者の次の世代を鼓舞するために使用することができます。

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Item	Brand	Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit	Style Selections	1
18-Gallon General Bucket/Tote	Centrex Plastics: LLC Rugged Tote	1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord	Master Electrician	1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp	Smartpond	1
Whole House Water Replacement Filter	Whirlpool	6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing	Whirlpool	2
Thread Seal Tape	William H Harvey	1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement	Oatey	1
8-fl oz LO-VOC Primer	Oatey	1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing	Mister Landscaper	1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve	Mister Landscaper	33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter	Mister Landscaper	6
Drop-In Filter with House	Whirlpool	6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow	LASCO	3
2-in Dia 90-Degree Tee	LASCO	3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow	LASCO	15
3/4-in Dia PVC Adapter	LASCO	7
3/4-in Dia PVC Tee	LASCO	12
2-in Dia PVC Cap	LASCO	3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter	LASCO	2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve	American Valve	5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter	Lasco	8
3/4-in Dia PVC Cap	Lasco	1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe	Charlotte Pipe	4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe	Charlotte Pipe	3
11/16x1-7/80 PVC ring	SXT	10
½” PVC male adapter	SXT	1
¾” PVC coupling	SXT	1
½” PVC female adapter	SXT	1
link
1.8 L Dual Beta Keeper	Top Fin	27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring)	SXT	28
90-degree ¾” threaded PVC elbow	SXT	27
Fine Mesh	N/A	1 yard
Bulkhead Connector	N/A	1
Hacksaw	N/A	1
Drill	N/A	1
Hole saw	N/A	1
Adjustable Wrench	N/A	1
Pliers	N/A	1
Tape Measure	N/A	1
Safety Glasses	N/A	1
Work Gloves	N/A	1