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Biology

Bau eines erschwinglichen und einfach zu bauen Zebrafisch Einrichtung

Published: November 22, 2014 doi: 10.3791/51989

Abstract

In vivo biomedizinischen Forschung ist von zentraler Bedeutung, um in vitro Erkenntnisse in die klinische Fortschritte zu übersetzen. Kleine akademischen Institutionen mit beschränkten Ressourcen finden es praktisch unmöglich ist, aufzubauen und zu pflegen typischen Nagetiereinrichtungen für die Forschung. Zebrafisch-Untersuchung wurde nachgewiesen, dass eine wertvolle Alternative zur in vivo Erforschung der Pharmakologie, Physiologie, Entwicklung und genetische Untersuchungen sein. Dieser Artikel beschreibt, dass eine funktionelle Zebrafisch-Anlage kann auf eine einfache und kostengünstige Art und Weise aufgebaut werden. Wir zeigen, dass eine solche Einrichtung könnte in etwa einen Arbeitstag mit minimalem Werkzeuge und Know-how aufgebaut werden. Die Kosten für das 27 1,8 l Aquarium Zebrafisch-Anlage in dieser Studie aufgebaut war ungefähr $ 1.500. Wir gehen davon aus, dass die Aufrechterhaltung eines ersten Arbeits 150 Fischkolonie für 3 Monate ist $ 1.000. Dieses Projekt beteiligten Studenten, die eingeführt wurden, um der Zebrafisch aquaculturing für Forschung schlägt.

Introduction

In-vivo-Modelle sind wesentlich umfassender und biomedizinischen Forschung, da sie eine in-vitro-Forschung auf dem System und organismischen Ebene übersetzt werden. Zum Beispiel Forschung mit kleinen Säugetieren, insbesondere Nagern, wurde es als notwendig für die Entwicklung von Arzneimitteln und zur Verbesserung des zur Verfügung stehenden Medikamente erwiesen. Allerdings könnte die Komplexität (finanziell und logistisch) machen es praktisch unmöglich ist, aufzubauen und zu pflegen Nagetier Einrichtungen für Experimente schlägt bei kleinen Forschungs akademischen Institutionen. Dennoch kann in vivo Forschung unter Verwendung anderer Tierarten, die weniger aufwendige Logistik erfordert. Zebrafisch (Danio rerio) wurden erfolgreich als in vivo Modell zur Genetik, Entwicklung, Pathophysiologie und Pharmakologie 1,2,10,11,12 studieren. Im Vergleich zu r Die zur Zebrafisch für Experimente beherbergen Einrichtungen sind relativ einfach und deutlich günstigerOdent Einrichtungen. Kim et al. 3 wurden kürzlich im Detail eine 80 Tankzebrafisch-Gehäuse-System, das für ca. $ 1500, die beide Teile und Arbeitskosten umfasst gebaut werden können beschrieben. Dies steht in krassem Gegensatz zu den fast 8500 $, die erforderlich wäre, um eine fertige, 80 Tanksystem aus einer beliebigen Anzahl von kommerziellen Anbietern zu kaufen. Jedoch ist die Beschreibung durch Kim et al. kann kompliziert und schwierig für Anfänger Fischforschung folgen. Wir glauben, dass ein Zebrafisch-Anlage kann in vereinfachter Weise für eine Investition von $ 1500 gebaut werden.

Die Einrichtung einer In-vivo-Anlage in kleinen akademischen Einrichtungen bietet ihre Fähigkeiten ein zusätzliches Instrument, um stärker und gründlicher Forschung zu produzieren. In durch in vivo-Ergebnisse unterstützt vitro-Daten in der Regel produzieren umfassen biomedizinischen Forschung als Daten unter Verwendung von In-vitro-Ansätze. Daher ist dieImplementierung einer In-vivo-Forschungsanlage wird entscheidend zur Steigerung der Institution Erfolg in der Gesamtforschungsvorhaben (Student Engagement in Forschung, Veröffentlichungen, Kommunikation, Verfolgung von Drittmitteln, etc.).

Der Bau eines Zebrafisch-Anlage, wie die in dieser Studie beschrieben ist während gende finanziellen Zeiten ideal für Forschung akademischen Einrichtungen mit begrenzten Möglichkeiten (oder Institutionen ohne in vivo Forschungseinrichtungen).

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Protocol

HINWEIS: Diese Protokolle an die Richtlinien der IACUC der Presbyterian College.

1. Erwerben Materialien In Tabelle 1.

2. Setzen Sie die 5 Lager Chrome Nach den Anweisungen des Herstellers. Dies wird verwendet, um die Einrichtung Haus.

3. Konstruieren Sie den Wasserbehälter und Filtersystem (1A und 2).

  1. Mit 1A als ein Führer, das Layout, die 18 Gallonen-Eimer, Pumpe, Filter und UV-Lampe zum endgültigen Aufstellort und Größe zu bestimmen.
  2. Nachdem Teile angelegt, zu messen und schneiden Sie die ¾ "PVC-Rohr auf die Länge für die Montage benötigt. Variieren die Längen aller Rohre nach bestimmten Raumbedarf und Einschränkungen.
  3. Setzen Sie die Rohre und Formstücke wie zuvor mit dem PVC-Primer und Zement gelegt, siehe unten (3.3.2 und 3.3.3).
    1. Sand die Schnittkanten des Rohres mit Sandpapier, bis sie glatt anfühlt ein sindd gibt es keine Ablagerungen.
    2. Prime die Außenseite des Rohres und das Innere der Armatur mit dem gekauften PVC Primer mit dem mitgelieferten Tupfer aus der PVC-Grundierung.
    3. Zementieren Sie die Rohr und Fitting zusammen durch Anwendung der PVC-Kleber auf die Außenseite des Rohres mit dem mitgelieferten Tupfer. Wiederholen Sie für alle Schritte, die PVC Verklebung benötigen.
    4. Platzieren Sie die 18-Gallonen-Eimer auf einer Seite des Regalkonstruktion.
    5. Installieren eines Einbaubuchse in der Seite des Vorratstanks.
    6. Bringen Sie einen ¾ "PVC-Rohr mit dem Schott.
    7. Schließen Sie das andere Ende des ¾ "Rohr zum Pumpeneinlaß mit einem ¾" Gewinde machen Fitting.
    8. Schließen Sie die Filter an die Pumpe mit zwei 90-Grad-Bogen und ¾ "PVC-Rohr.
      1. Verwenden Sie einen Papierfilter, gefolgt von einem Aktivkohle-Filter, um im Wasser herauszufiltern Schutt und reduzieren Chlor und chemischen Ebenen.
    9. Schließen Sie die UV-Lampe auf den Filter according den Herstelleranweisungen.
  4. Befestigen Sie die Pumpe und Filtersystem zur Oberseite des ersten Regal des Racks mit Drahtbinder. Variieren Sie die Reihenfolge der Montage und Befestigung nach der Größe und Layout der gewählten Regal / Rack.
  5. 1 BioBalls pro Liter Wasser in den Wasserbehälter, wenn die Pumpe und die Filteranlage zusammengebaut und an dem Regal angebracht ist.

4. Bauen Sie die Hauptversorgungsleitung (1B und 2).

  1. Messen und schneiden Sie ein Stück ¾ "PVC-Rohr, um die UV-Lampe an das Stromnetz anschließen
  2. Verwenden Sie einen ¾ "PVC-T, um die Hauptversorgungsleitung zu starten, indem Sie den Abschlag auf den ¾" PVC Auspuff aus dem UV-Filter. .
    1. Fügen Sie ein Schaltventil, um den Boden der PVC-T als Abfluss für Wartung Spülen der Anlage dienen.
    2. Starten Sie die Hauptversorgungsleitung von der Spitze des ¾ "PVC-stück von Mess- und Schneide ¾" PVCRohr auf die gewünschte Länge zu Zufuhrleitungen für jedes der Fächer an der Zahnstange vorzusehen.
    3. Installieren ¾ "PVC-T-Stücke für die horizontalen Linien, die jedes Regal des Racks geben wird.
    4. Gegebenenfalls (und vorgeschlagen), einen ¾ "Ein-Aus-Ventil für jeden Regal Zuleitung für die Isolierung von jedem Regal und ein modularer Aufbau des Systems ermöglicht.
  3. Verwenden Sie einen ¾ "PVC-Rohr als Druckminderleitung auf dem obersten Regal. Wenn diese Linie verläuft auf der Rückseite des Regals, verwenden Sie dieses Regal für die Lagerung. Beenden Sie den Druckminderer Zeile in der Hauptabgasleitung (1B) mit einem ¾ "Schaltventil.
  4. Wenn die oben genannten Schritte durchgeführt wurden, grundieren und Zement die PVC-Rohr zusammen wie bisher bei der Konstruktion des Behälters und Filtersystem.

5. Bauen Sie die Hauptabgasleitung (1C und 2).

  1. Führen der vertikalen Länge der Hauptabgasleitung auf der anderen Seite der Zahnstange fROM Die Hauptversorgungsleitung. Verwenden Sie ein 2 "PVC-Rohr für diese vertikale Linie, um die Hauptversorgungsleitung an den oberen und Ableitungen aus den Aquarien von jedem Regal erhalten.
  2. Schneiden Sie die Stücke von 2 "PVC-Rohr für die vertikale Hauptabgasleitung und mit 2" PVC-T-Stücke, um die Fischbehälter Abflussleitungen von jedem Regal erhalten. Beenden Sie die Hauptabgasleitung im Vorratstank, um das Recyclingwasser über einen Schwammfilter zu vertreiben.
  3. Schneiden Sie ein ein Zoll Öffnen der gesamten Länge der 2 "PVC-Rohrstücke und heften sich an vertikalen Hauptabgasleitung mit PVC-stücke für die horizontalen Abflussleitungen aus den Aquarien.
  4. Verschließen Sie die 2 "horizontale Abflussleitungen mit einem 2" PVC-Kappe.
  5. Prime und festigen die Stücke mit den notwendigen Armaturen (Steckverbinder, Brustwarzen oder Ellenbogen).

6. Bauen Sie die Aquarien (Abbildung 3).

  1. Mit dem Bohrer, schneiden Sie ein 1 1/8 "Loch an der Rückseite des Aquariums 1" unterhalb der Oberkante mit einer Lochsäge.
  2. Anbringen und festziehen 90 Grad 3/4 "Gewinde PVC Ellbogen zum männlichen Adapter, um das Aquarium Auspuffrohr zu schaffen. Fügen Sie ein Stück feines Netz vor dem Einschrauben der Haltemutter an Zebrafischen gehen durch das Abgassystem zu verhindern.
  3. Stellen Sie das Aquarium mit dem Auspuffrohr endet in den offenen Raum der Entleerung der Schlange hinter den Tanks

7. Starten des Wassersystems

  1. In mehreren Behältern, wie dem für den Behälter verwendet wird, messen die dreifache Menge an Wasser innerhalb des Systems enthalten sind. Lassen Sie dieses Wasser bei Raumtemperatur stehen zur Konditionierung für 48 Stunden.
  2. Wasser hinzu, bis das System und lassen Sie es für mindestens 3 Tage zu zirkulieren.
    1. Wechseln Sie das Wasser in der Anlage kräftig in den ersten 3 Tagen nach der Kreislauf, um das System von Verunreinigungen zu befreien that befinden sich innerhalb der Rohre.
  3. In Starterzebrafisch und lassen Sie den Stickstoffkreislauf zu etablieren. Normalisieren pH in einen konsistenten 7. Halten sieben Zebrafisch pro 1,8 l, und füttern sie zweimal täglich während der Woche und einmal täglich an den Wochenenden wie Linbo 4 und McNabb 6 vorgeschlagen.
  4. Überwachen Sie die Nitrat (<75 mg / l), Nitrit (<10 mg / l) und Ammonium (0 mg / l) täglich während der ersten Woche nach der Zugabe von Fisch und zweimal wöchentlich einmal gewünschten Spiegel wurden mit regelmäßigen Wasserwechsel beibehalten .

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Representative Results

Der Bau der Pumpe und Flters Systems
Wenn das Rack montiert und den ersten Schritt gesetzt ist, um die Pumpe und Filtersystem zu bauen. Die Filter sind mit der Systempumpe verbunden sind und über der unteren Ebene des ersten Abschnitts, die eine einfache Wartung des Filters und Austausch ermöglicht entfernt. In ähnlicher Weise wird die UV-Lampe mit PVC-Rohr mit dem Filter verbunden und an Ort und Stelle mit Kunststoffkabelbinder gehalten, um für den einfachen Austausch der UV-Lampe nach Bedarf (4A) zu ermöglichen. Unmittelbar im Anschluss an die Pumpe ein Papierfilter, Aktivkohlefilter, und eine UV-Lampe über PVC-Rohr installiert. Bioballs werden in den Tank gegeben, um Oberfläche für das Wachstum von Bakterien, die giftiges Ammoniak Abfälle in Nitrate umwandelt bereitzustellen. Eine BioBalls pro Gallone Wasser in dem System ist eine ausreichende Fläche, um bakterielles Wachstum zu ermöglichen. Der Deckel der Kunststoffbehälter eingepasst, so dass bei Überlauf die Bioballs wird im Behälter verbleiben und Chancen contamina werdention minimiert. Obwohl ein Überlaufereignis ist sehr unwahrscheinlich, ein Entwässerungssystem (Hinzufügen eines Rohr Ablauf an der Oberseite des Behälters) ist eine einfache Zugabe, die an dem System vorgenommen werden kann.

Der Bau der Hauptversorgungsleitung
Der zweite Schritt ist, um die Hauptwasserleitung, die jedes Fach, das Zebrafisch-Tanks (4B) enthalten wird füttern wird zusammenzustellen. Diese Leitung ist mit der UV-Lampe mit einem Stück PVC-Rohr verbunden. Diese Linie verläuft vertikal und seitlich an der Zahnstange durch eine PVC-T. Das untere Ende des T-Profils wird verwendet, um ein Stück PVC-Rohr, die als ein Ablassventil für das gesamte System dient verbinden.

Die wichtigsten Linien, die die Tanks horizontal zu vier Fächer laufen füttern: Kopf der zweiten Regal, Kopf der dritten Regal, Kopf der dritten Regal, und unten auf dem fünften Regal. Da die Spitze der zweiten, dritten und vierten Lagerlinien liefern Wasser zu den Aquarien sie am midlin laufene der Regale. Jede dieser Zeilen habe einzelnen Ein-Aus-Ventile, die die Steuerung der einzelnen Kammern ermöglicht.

A 9-Port Bewässerungsverteiler ist an dem Ende der horizontalen Linien angebracht ist und diese Bewässerer Wasser zuzuführen, um die Fischbecken durch flexible ¼ "Schlauch (4B). Jeder Port des Bewässerungs Verteiler eine in Ein-Aus-Ventil eingebaut. Zusätzlich ist ein An-Aus-Ventil an dem Ende des Schlauchs an jeden Port angeschlossen ist für einen einfachen Zugang und Wasserflusssteuerung angeordnet ist, nahe dem Aquarium Eingang. Der Schlauch wird durch ein Loch in den Deckel gebohrt, in den Behälter eingeführt werden kann. Dies wird bei der Beibehaltung der Schlauch fest in den Tank eingesetzt zu unterstützen.

Die Linie, die auf der Oberseite des fünften Lager läuft als Druckabbau verwendet, und es wird mit einem individuellen Ein-Aus-Ventil gesteuert. Es wird empfohlen, diese Zeile auf der Rückseite des fünften Lager ausgeführt haben, so dass dieser Bereich für die Speicherung verwendet werden. Seit main Linie verläuft an der Mittellinie von der Seite des Gestells, sie an der Rückseite mit einem PVC Ellbogen und ein Stück PVC-Rohr gebracht wird, und dann läuft es in Längsrichtung (horizontal) als Druck-Ablassleitung unter Verwendung eines anderen PVC Ellbogen und ein Stück PVC-Rohr. Der Druckabbau Leitung endet in der Hauptabgasleitung, die vertikal verläuft auf der anderen Seite der Zahnstangen und endet in den Wasserbehälter (dieser Abgasleitung 2 "PVC-Rohr, siehe unten).

Der Bau der Hauptabgasleitung
Der dritte Schritt besteht darin, die Abgasanlage, die seitlich zur Zahnstange verläuft zu montieren, an der Seite, wo der Wasserbehälter gelegt (4C). Dieses System ist gebaut mit 2 "PVC-Rohr und sammelt das Wasser, das von der Druckabbau Linie geht, und aus dem Aquarium Entleerung (siehe Aquarium Bau unten). Die Hauptabgasleitung vertikal verläuft, der die Druckabbau Linie auf der Oberseite des Gestells und endend in die Wasserwiederservoir. Darüber hinaus erhält der Hauptabgasleitung den Abfluss aus den Aquarien durch horizontale 2 "PVC-Rohre, die mit dem Hauptabgasleitung über PVC-T-Stücke zu verbinden. Diese horizontalen Abflussrohre ist ein "Längsschnitt, um den Abfluss von Wasser aus den Fischbecken (siehe unten) zu empfangen. Diese horizontalen Abflussleitungen laufen auf der Rückseite und auf der Bodenteile der Regale und haben eine kleinere Steigung, die das Wasser abgelassen, um zum Hauptabgasleitung durch die Schwerkraft auszuführen. Sponge Filtermatten an den horizontalen Abflussleitungen, so dass das Aquarium Abwasser fällt auf den Schwämmen und filtert Schmutz aufgenommen. Eine ganze zusammengesetzte System wird in Abbildung 5 dargestellt.

Bau von Aquarien
Ein Vertreter Aquarium ist in 6 dargestellt. Das Ende der Fischbehälter Ablaufleitung in die horizontale Ablaufleitung gelegt (siehe oben Abschnitt über Abgasleitung). Ein Drahtgewebe in die Ablaufleitung in das Aquarium, um das zu verhindern eingefügtZebrafisch vom Schwimmen aus dem Tank. Diese speziellen Tanks haben Deckel, der die Fische an der Flucht zu verhindern und zu minimieren Kontamination Chancen. Wenn Überlauf auftritt Tankdeckel wird Fischfallen auf den Boden zu verhindern. Behälter mit Deckel sind ideal, aber wenn ein System aufgebaut ist, welche Behälter ohne Deckel, so kann eine kleine Öffnung in der Nähe der Oberseite des Tanks gebohrt werden darf. Dies ermöglicht Wasser zu entkommen, während verhindern Fisch an der Flucht.

Funktion
Ein Zebrafisch Kolonie anderswo 3- 6 beschrieben zur Verfügung und etablierte Protokolle eingehalten werden konnte. Kurz gesagt, kann unsere Anlage das System Pumpe, um die Systemlautstärke ca. 75 mal pro Stunde, durch Anpassung der Durchflussmenge für jeden Erwachsenen (oder Fischlarven Tank) zirkulieren bei etwa 85 ml / min (oder 45 ml / min für Fischlarven Tank) . Die Wasserqualität wird durch eine aktive biologische Filterung und Kleinwasserwechsel beibehalten (~ 5% des Anlagenvolumens) nach Bedarf. Tägliche Überwachungder pH-Wert, Leitfähigkeit, gelösten Sauerstoff sind (DO) Ebenen und Temperatur notwendig, Bedingungen konsistent zu halten. Kits sind im Handel erhältlich, um pH-Wert messen und DO Ebenen. Leitfähigkeitsmessgeräte sind auch käuflich zu erwerben. Um diese Variablen täglich testen, entfernen Sie 250 ml Wasser aus dem Reservoir und Analysen durchführen. Der pH-Wert sollte bei 7,2 gehalten werden sollte und keine weniger als 6 mg, und die Leitfähigkeit zwischen 500 & mgr; S und 1300 & mgr; S. (SOURCE HIER) Die Temperatur wird in 28,5 ° C gehalten werden. Regelmäßige Wartung des Systems (3-4 Wochen) schließt eine ungefähre 30% Wasserwechsel und die Reinigung und Austausch der Filtermatten und Holzkohle.

Figur 1
Abbildung 1: Die drei Hauptkomponenten eines Zebrafischmöglichkeiten. A. Die Pumpe und Filter-System werden im unteren Teil des Regalbodens (erste befindetRegal) und schließen Sie den Wasservorratstank mit der Hauptversorgungsleitung. B. Die Hauptversorgungsleitung leitet sich von der UV-Lampe und liefert Wasser für die drei oberen Regalen, die die Aquarien enthalten. Man beachte, dass jedes Regalfach unabhängig zugeführt und einzeln über ein Ventil gesteuert werden (ein oder aus). Diese Hauptlinie hat auch das Hauptdrainageventil am unteren Ende und am oberen Ende weiter als Druck-Ablassleitung, die in die Hauptabgasleitung endet. C. Die Hauptabgasleitung erhält Wasser aus dem Leitungsdruck-Ablasseinrichtung und aus der unterschiedlichen Aquarium Fächer und endet in den Wasservorratsbehältern. Beachten Sie, dass jedes Regal hat ein Aquarium Abgasleitung, die PVC-Rohre sind und in Längsrichtung geöffnet, um Wasser für die einzelnen Fischbecken zu erhalten. Diese Leitungen sind leicht geneigt, damit das Wasser durch die Schwerkraft in die Hauptabgasleitung ausgeführt.Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen.

Abbildung 2
Abb. 2: Drei Hauptkomponenten eines Zebrafisch-Anlage montiert und ohne Funktions beachten, dass der Wasservorratstank bereits Bioballs. Das Wasser aus der Hauptabgasleitung auf einem Schwammfilter mesh über dem Wasserspiegel (der Klarheit halber ist dies in der Figur nicht dargestellt) angeordnet zu fallen. Beachten Sie, dass aus Gründen der Übersichtlichkeit der zweite Fach nur einige Aquarien dargestellt, die gezeigt Dusche hat nur 4 Versorgungsrohre und das Aquarium Abgasleitung ist transparent. Jedes Regal des Racks können neun 1 L Aquarien halten und haben einen 9-Port Dusche.

Figur 3
Abbildung 3:. Fisch Tankeinheit Das Aquarium befindet sich in einem regelmäßigen Tierhandlung erworben und es hat einen 2 l Fassungsvermögen A. Das Aquarium Entwässerungssystem wird durch Bohren eines 1 1/8 "Loch in der Rückseite errichtet hat. der Tank, dann 3/4 L "-Form mit einem 3/4" PVC Ellbogen "PVC-Rohrstücke werden in umgekehrter gesetzt". Das Entwässerungssystem wird in die offene Seite der Fischbehälter Abgasleitungen auf der Rückseite den Fischbecken befindet fallen. B. Bild, das den Einbau einer Masche in das Aquarium Entwässerungssystem. Das Gitter verhindert, dass der Zebrafisch aus an den Abgasleitungen abgelassen.

Figur 4
Abbildung 4: Einzelteile Aufbau. A. Die drei Filter-Pump-System ist auf der unteren Zahnstange des Systems. Die Pumpe ist an drei mechan verbundensche Filter, gefolgt von einem UV-Filter, um Verunreinigungen aus dem System Wasser zu beseitigen. B. Die horizontale Zuleitung endet in einem 9-Anschluss Bewässerung vielfältig, die frisches Wasser und Sauerstoff zu jedem Tank versorgt. Die Zuleitung zu jedem Regal hat einen Ein-Aus-Ventil, das verwendet werden kann, um Wasser in jedem Regal zur Reinigung und Quarantäne Zwecke stoppen. C. Das Aquarium Abgasleitung mündet in die Hauptabgasleitung zum Umlauf erneut einzugeben. Die Druckentlastungsleitung mündet ebenfalls in die Hauptabgasleitung.

Abbildung 5
Fig. 5: Vollständig System Das fertige System enthält eine Pumpe und Filter-System, eine vertikale Hauptversorgungsleitung, eine horizontale Zuleitung für jedes Regal, einen Tank Abgasleitung, eine Druckentlastungsleitung, und eine Hauptabgasleitung für eine enthaltene Zirkulationssystem .


Abb. 6: Vertreter Aquarium Das Aquarium enthält eine Entleerung Zeile, die mit der horizontalen Entwässerungsleitungen im System verbinden wird.

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Discussion

Der Hauptzweck dieses Artikels ist es zu zeigen, dass der Bau eines Funktionszebrafisch-Anlage ist nicht kompliziert und kann von Anfänger Fisch Forscher mit minimalem Konstruktionswissen aufgebaut werden. Darüber hinaus zeigt dieser Artikel, dass die Materialien für diese Funktionszebrafisch-Anlage kann leicht und kostengünstig aus lokalen Haustierfachhandel oder Baumarkt erworben werden. Nachdem alle Materialien und Werkzeuge sind die Konstruktion des Systems erfasst und die Aquarien dauert etwa einen Arbeitstag. Die 72 Stunden zum ersten Mal ausgeführt ermöglicht es jedem Fehler im System, wie Leckagen oder niedrigem Wasserdruck, bestimmt werden. Diese ersten Lauf ermöglicht auch Verunreinigungen im System, um aus dem Verkehr gezogen werden. Beispielsweise kann die PVC-Kleber gefährlichen organischen Material, das während der ersten Stunden der Kreislauf entfernt werden enthalten. Das System verfügt über ein Hauptventil, das Entleeren und ermöglicht erleichtert die Justage des Volumens und Wasseraustausch zu Trainingspro tung. Zusätzlich hat das System einen Druckabbau Linie, erleichtert auch die Einstellung der Wasserdruck. Diese Linie ist nützlich, wenn nur eine oder zwei Kammern (Ebenen) verwendet werden, da sie die Regulierung des Wasserdrucks.

Die Anlage ist modular aufgebaut so dass für den Einsatz von 1, 2 oder 3 Fächern (36 Aquarien von 1,8 L), um die Kapazitätsanforderungen einzelner Forscher zu erfüllen. Die Ein-Aus-Ventile in jedem Abteil angeordnet erleichtern die Trennung der verschiedenen Teile des Systems. Dieses Ventilsystem ist auch nützlich, um mögliche Infektionsverbreitung zu verhindern und die Reinigung des Systems von Fächern zu erleichtern. Darüber hinaus hat jedes Aquarium Wasserversorgung zwei Ventile, eine an der 9-Port Dusche und eine an der flexiblen Schlauch am Eingang des Aquariums. Diese Doppelventilsystem ermöglicht eine Feinabstimmung der Wasserdruck und erleichtern auch Reinigungsverfahren oder Fisch Extraktion oder Manipulation.

t "> eine ordnungsgemäße Dokumentation von Ammoniak, Nitrit und Nitrat ist für die einwandfreie Funktion der Anlage. Dazu sind die Bioballs wichtig, da sie eine ausreichende Fläche für nitrifizierende Bakterien zum Wachstum bei. Nachdem der Fisch Kolonie ist stabil, kann die Anlage leicht modifiziert werden, um größere oder kleinere Aquarien verwendet werden. Auch kann die Anlage modifiziert Zebrabärbling züchten nach den in der Literatur 5 Protokolle werden. Darüber hinaus kann die Anlage modifiziert werden, um andere Module oder Hinzufügen von Gestellen, um die Fähigkeiten des Systems zu erweitern .

Die Strömung von Frischwasser in den Tank bietet genügend frischem Sauerstoff, so dass es keine Notwendigkeit, eine zusätzliche Oxygenator hinzuzufügen. Der Luftaustausch, die in den Wasserbehälter erfolgt eine ausreichende Sauerstoffquelle. Sind größere Behälter werden dann verwendet, eine zusätzliche Sauerstoffquelle zugesetzt werden. Es sollte auch beachtet werden, dass ohne Strömung von Frischwasser in den Tank die Fische ersticken, so ist es wichtig, dass die Wassermenge be streng überwacht, um sicherzustellen, dass nichts blockiert die Wasserleitungen. Wesentlich ist, dass die Wassertemperatur bei 28,5 ° C gehalten werden. Eine konstante Temperatur kann durch Aufrechterhalten der Zimmertemperatur, in dem das System bei 28,5 ° C erreicht werden, untergebracht. Alternativ kann ein Aquarium Heizquelle um eine konstante Temperatur aufrechtzuerhalten erworben werden. Die Aufrechterhaltung der Wasserqualität ist wichtig, einheitliche Versuchsergebnisse. Es gibt viele Quellen zur Verfügung, um festzustellen, genaue Wasserqualitätsparameter auf Basis von experimentellen Bedingungen.

10 Tage und anschließend mit 70% igem Alkohol vor der Wiederverwendung gesprüht - Aquarien werden alle 7 gereinigt. Es wird auch vorgeschlagen, dass die Chromgestell gereinigt und an diesem Punkt getrocknet, um Rostbildung zu vermeiden und bauen werden. Bei Anzeichen einer Verunreinigung festgestellt werden, werden einzelne Tanks mit einer 2% igen Bleichlösung 8 desinfiziert. Allgemeine Gesundheit ist mit besonderem Augenmerk auf Anzeichen einer Infektion überwacht (Schwellung, Hautgeschwüre, exolpthalmia, färben ab, etc.), Gasblasenkrankheit (aufgrund der übersättigten Gaskonzentrationen, schnelle Veränderungen der Wassertemperaturen, Probleme in der Wasserinstallation), Kiemen Hyperplasie (hohe Ammoniak, Kupfer, Zink oder aktive Chlor im Wasser) , Skoliose (durch Vitamin-C-Mangel) oder Eier verbundenen Entzündungen und Fibroplasie (aufgrund der weiblichen Eizelle Retention, die sich schiebt die Bauchdecke).

Die Konstruktion dieser Anlage ist flexibel und ermöglicht eine geringere oder erweiterten Systems. , Indem sie die Grundkonstruktion Ideen, kann diese Anlage angeordnet, um die Grundlagenforschung Bedürfnisse der verschiedenen Größen zu passen. Weil Konstruktion kann durch Einrichtung variieren kann, ist der wichtigste Schritt in der Protokoll der 72 Stunden zum ersten Mal ausgeführt, und die tägliche Überwachung von Ammonium, Nitrat und Nitrit in der ersten Woche der Konstruktion. Ausgezeichnete Wasserqualität wird bei der Aufrechterhaltung der Gesundheit der Fische unterstützen. Viele der aktuellen Protokolle zu einem erschwinglichen Fisch syste verfügbarm erfordern ein Open-Air-Flow-Wasser 3. Mit Wasser aus dem Open-Air-geschützt minimiert die Möglichkeit für Wasser Kontaminationen und Verdunstung. Wartungsarbeiten an einem geschlossenen System ist sehr gering, verglichen mit den gemeinsamen Freiluftanlagen.

Bei Problemen in den Bau der Anlage (Leckagen, niedrigem Wasserdruck, etc.) Kann man eine zementierte Rohr einfach durch Wegschneiden der Problembereich in der Anlage und Austausch der Teile in der gleichen stufenweise zu ersetzen, wie oben aufgeführt . Dieses System kann auf kleine Lecks, die an die Fische gefährlich werden kann, wenn unbeachtet anfällig für große Wasserverlust. Für eine minimale Investition ein Schwimmer Absperrvorrichtung erkennt, wenn der Wasserstand unter einen sicheren Schwellenwert gefallen ist und das System herunterzufahren. Dies kann notwendig sein, wenn eine genaue Überwachung des Systems ist nicht verfügbar. Mit den richtigen Modifikationen, es gibt nur wenige Einschränkungen dieses System steht neben Mangel an Mobilität. Sobald dieses System zu konstruierened es ist sehr schwierig, ohne zu schneiden einige Teile und recementing sie in die neue Position verschieben. Diese Beweglichkeit Einschränkung bedeutet, dass das System idealerweise in einem Arbeitsbereich gehalten werden. Wenn Mobilität gewünscht gibt es kleine Änderungen, die gemacht werden, um die Flexibilität zu erhöhen. Fügen Sie eine Gewerkschaft zu Beginn jedes Versorgungs seitlichen, der Druckentlastungsleitung, Pumpe Entladung und über das Ablassventil. Die Ablaufleitungen können trocken statt ausgestattet einzementiert werden. Hinzufügen einer flexiblen Kupplung auf den Pumpenteil wird auch in der Mobilität zu unterstützen. Dies ist ein zusätzlicher

Der einfache Aufbau und die Wartung dieses Systems darin, dass gegenwärtigen Protokollen in der Literatur zu finden sind, kleine Forschungseinrichtungen 1,2,10-12. Die Wartung ist einfach macht es zu einem idealen System für die Bachelor-Studienarbeit. Dieses System eignet sich hervorragend für unabhängige Forschung und Lehre Labors, auch.

Zusammenfassend, diese Art vonAnlage ist erschwinglich, einfach zu bauen, und funktionell für In-vivo-Experimente. Diese Anlage ist ideal für Institutionen mit beschränkten Ressourcen und begrenzte Tierhaltung Raum. Zebrafisch-Forschung ist ein Bereich, der für mehrere Arten von Studien einschließlich Pharmakologie, Physiologie, Entwicklung oder auch genetische Studien verwendet wird. In der Tat ist die große Anzahl verfügbarer Mutante oder transgene Zebrafisch unterstützt innovative Forschungsrichtungen in praktisch allen Gebieten der Biomedizin. Darüber hinaus kann dieses System verwendet werden, um Forschungsmöglichkeiten und Unterrichtserfahrungen für Wissenschaft Majors bei kleinen überwiegend grundständigen Institutionen zu verbessern und zu inspirieren, die nächste Generation der biomedizinischen Wissenschaftler werden.

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Disclosures

Die Autoren erklären, von Interesse für dieses Papier keine Konflikte.

Acknowledgments

Die Autoren möchten die Office of Research der Presbyterian College School of Pharmacy für die finanzielle Unterstützung dieses Projektes durch die kleine Apotheke Auszeichnungen für Forschung & Collaboration (SPARC) Zuschlags danken. Die Autoren danken Herrn John Smink, Leiter der Wassertiere Research Laboratory, Clemson University, Clemson, SC für seine technische Unterstützung Manuskript überarbeitet.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Item Brand Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit Style Selections 1
18-Gallon General Bucket/Tote Centrex Plastics: LLC Rugged Tote 1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord Master Electrician 1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp Smartpond  1
Whole House Water Replacement Filter Whirlpool 6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing Whirlpool 2
Thread Seal Tape William H Harvey 1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement Oatey  1
8-fl oz LO-VOC Primer Oatey  1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing Mister Landscaper  1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve Mister Landscaper 33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter  Mister Landscaper 6
Drop-In Filter with House  Whirlpool 6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow LASCO 3
2-in Dia 90-Degree Tee LASCO 3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow LASCO 15
3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 7
3/4-in Dia PVC Tee LASCO 12
2-in Dia PVC Cap LASCO 3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve American Valve 5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter Lasco 8
3/4-in Dia PVC Cap Lasco 1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe Charlotte Pipe 4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe Charlotte Pipe 3
11/16x1-7/80 PVC ring SXT 10
½” PVC male adapter SXT 1
¾” PVC coupling  SXT 1
½” PVC female adapter  SXT 1
link
1.8 L Dual Beta Keeper Top Fin 27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) SXT 28
90-degree ¾” threaded PVC elbow SXT 27
Fine Mesh N/A 1 yard
Bulkhead Connector N/A 1
Hacksaw N/A 1
Drill N/A 1
Hole saw N/A 1
Adjustable Wrench N/A 1
Pliers  N/A 1
Tape Measure N/A 1
Safety Glasses N/A 1
Work Gloves N/A 1

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Paige, C., Hill, B., Canterbury, J., Sweitzer, S., Romero-Sandoval, E. A. Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility. J. Vis. Exp. (93), e51989, doi:10.3791/51989 (2014).

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