Un modèle murin de la resténose artérielle: les aspects techniques de fémur fil blessures
Summary
La souris fil de l'artère fémorale modèle de lésion de resténose est techniquement difficile. Dans ce protocole, nous détaillons les principaux détails techniques essentiels à l'exécution avec succès des blessures de fil pour induire la néo-intima cohérente pour les études de la resténose.
Abstract
La maladie cardiovasculaire causée par l'athérosclérose est la principale cause de décès dans le monde développé. Rétrécissement de la lumière du vaisseau, en raison du développement de la plaque d'athérome ou la rupture de plaques établies, interrompt le flux sanguin normal menant à diverses morbidités telles que l'infarctus du myocarde et accident vasculaire cérébral. Dans les procédures endovasculaires cliniques telles que l'angioplastie sont couramment effectuées à rouvrir la lumière. Cependant, ces traitements inévitablement endommager la paroi du récipient ainsi que l'endothélium vasculaire, le déclenchement d'une réponse de cicatrisation excessive et le développement d'une plaque néo-intimale qui se étend dans la lumière provoquant la resténose des vaisseaux (re-rétrécissement). Resténose reste une cause majeure de l'échec des traitements endovasculaires pour l'athérosclérose. Ainsi, les modèles animaux précliniques de resténose sont d'une importance vitale pour l'étude des mécanismes physiopathologiques ainsi que la traduction des approches aux interventions vasculaires. Parmi plusieurs experime murinmodèles NTAL, blessures de fil de l'artère fémorale est largement acceptée comme le plus approprié pour les études de la resténose post-angioplastie parce qu'il ressemble étroitement à la procédure d'angioplastie qui blesse deux endothélium et paroi de la cuve. Cependant, de nombreux chercheurs ont de la difficulté en utilisant ce modèle en raison de son haut degré de difficulté technique. Ce est principalement à cause d'un fil métallique doit être insérée dans l'artère fémorale, ce qui est environ trois fois plus mince que le fil, pour générer une blessure suffisamment importante pour induire la néo-intima. Ici, nous décrivons les détails chirurgicaux essentiels pour surmonter efficacement les difficultés techniques majeures de ce modèle. En suivant les procédures présentées, effectuer la blessure de fil de l'artère fémorale de la souris devient plus facile. Une fois familiarisé, toute la procédure peut être terminée en 20 min.
Introduction
In the era of expanded application of endovascular treatments for various cardiovascular diseases, restenosis after angioplasty is one of the major problems for patients undergoing such treatments. Damage to the vascular endothelium at the time of angioplasty, in concert with the atherosclerotic background, induces excessive smooth muscle cell proliferation in the medial layer, resulting in neointimal hyperplasia.1,2 A viable animal model that recapitulates post-angioplasty neointimal hyperplasia is, thus, important not only for the investigation of disease mechanisms but also for the development of effective therapeutics to treat this pathology.
Mice represent an excellent model animal to recapitulate neointimal hyperplasia for the following reasons: the genetic backgrounds of experimental mice are well established; a wide variety of genetically-modified strains are available;2 obtaining littermates of the same background is easy; and the cost of the animals is relatively low. Arterial ligation model and wire injury model are the two most common mouse models of mechanically-induced neointimal hyperplasia. The arterial ligation model is easy to create, but physiologically dissimilar to the actual angioplasty procedure. The wire injury model closely mimics actual angioplasty procedures but is technically difficult due to the small size of mouse arteries.2,3 Sata et al. first described a wire injury method for mouse femoral arteries based on the anatomical structure of the vasculature and the use of proper-sized flexible wire. Utilizing this technique, they succeeded in reproducibly inducing neointimal hyperplasia in various strains of mice.4
Although femoral wire injury is a well-established model, some of the technical aspects of the technique are highly challenging compared to other models such as ligation.5 The purpose of this paper is to describe our mouse wire injury model procedures in detail, which is a modified version of Sata’s original method. We have made two main modifications: 1) Looping only the arteries, and 2) No lidocaine use.
Protocol
Representative Results
Discussion
La procédure de blessures de fil est applicable à toutes les souches de souris aussi longtemps que leurs structures anatomiques sont similaires. 4 Dans cet article, nous avons utilisé mâle C57BL / 6 avec un âge de 12 à 16 semaines. Comme nous l'avons appris de nos études préliminaires, les artères fémorales de souris âgés de moins de 10 semaines sont souvent si petite que l'insertion de fil est assez difficile. D'autre part, l'insertion du fil dans des souris âgées de 16 semaines…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by a Wisconsin Partnership Program New Investigator Award (ID 2832), a National Heart, Lung, Blood Institute R01 Grant (HL-068673) and a T32 training Grant (HL-110853). We thank Dr. Melina Kibbe’s group at Northwestern University for providing helpful information.
Materials
| Name of Reagent/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Fixed Core Wire Guide | Cook | G02426 | Diameter 0.015 inch, Straight |
| Dilation Forceps | Roboz | RS-4927 | Curved, blunt tips |
| Dumont Tweesers #5 | World Precision Instruments | 14095 | Straight, sharp tips |
| Dumont Vessel Cannulation Forceps | World Precision Instruments | 503373 | |
| McPherson-Vannas Scissors | World Precision Instruments | 501234 | |
| Mosquito Forceps | World Precision Instruments | 501291 | |
| Ethilon Nylon Suture 9-0 | Ethicon | 7717G | 9-0, Black Nylon Monofilament |
| Micro AROSuture, Sterile 11-0, 70 Microns, MET Point | AROSurgical | VT4A00N07 | 11-0, Black Nylon Monofilament |
| 3M Precise Multi-Shot DS Disposable Skin Stapler | 3M | DS-25 |
References
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