Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Chemistry
Click here for the English version

Chemistry

بناء نماذج التنبؤ تدميري من مكونات المحتويات في العنب البري بواسطة التحليل الطيفي القريبة من الأشعة تحت الحمراء بناء على قياسات HPLC

Published: June 28, 2016 doi: 10.3791/53981
Automatic Translation
1, 1, 1, 2, 2, 3
1United Graduate School of Agricultural Science, Tokyo University of Agriculture and Technology, 2Faculty of Agriculture, Tokyo University of Agriculture and Technology, 3Institute of Agriculture, Tokyo University of Agriculture and Technology

Introduction

بالقرب من الأشعة تحت الحمراء يتم تطبيق (الجرد) الطيفي على نطاق واسع كأسلوب غير تدميري لتحليل محتويات الفواكه والخضروات بمختلف أنواعها. 1،2 غير تدميري يحلل نير الطيفي تمكين الشحن فقط ثمار لذيذة والخضروات مع صفات مضمونة. تم تطبيقه بالفعل الجرد الوطني الطيفي لالبرتقال والتفاح والبطيخ والكرز والكيوي والمانجو والبابايا والخوخ وهلم جرا لمعرفة بركس في أن يتوافق مع المحتوى الكلي السكر والحموضة، TSC (الجوامد الكلية)، وهلم جرا . في الآونة الأخيرة، وقد أبلغنا تطبيق الجرد الوطني الطيفي لتقييم جودة العنب البري. 3 نحن لا يقاس فقط المحتوى الكلي السكر والمحتوى الكلي لمجموع الأحماض العضوية الموافق الحموضة، ولكن أيضا إجمالي محتوى الأنثوسيان. الأنثوسيانين هو أحد مكونات النشطة بيولوجيا والتي يعتقد لتحسين صحة الإنسان. أنه لأمر مريح للمستهلكين اذا كان بامكانهم شراء العنب لذيذ مع ضمان محتوى السكر، وميلانidity، والمحتوى الأنثوسيان.

في قوائم الجرد الوطنية امتصاص الأطياف من الفواكه والخضار، ويلاحظ فقط عصابات امتصاص واسعة. فهي أساسا العصابات بسبب الألياف والرطوبة. على الرغم من أن العديد من الفرق الضعيفة بسبب المكونات المختلفة لهدف غير دمر لوحظ في وقت واحد، لا يمكن تعيين العصابات المرصودة لوسائط الذبذبات محددة من مكونات محددة من الهدف في معظم الحالات. ولذلك، فإن أسلوب تقليدي لتحديد محتوى عنصر معين باستخدام قانون لامبرت-البيرة ليست فعالة لقوائم الجرد الوطنية الأطياف. بدلا من ذلك، نماذج المعايرة للتنبؤ محتويات مكونات الهدف من الأطياف المرصودة هي التي شيدت باستخدام chemometrics من خلال دراسة العلاقة بين أطياف المرصود ومحتويات عنصر المقابلة لالأطياف. 4،5 هنا، على بروتوكول لبناء والتحقق من صحة نماذج للتنبؤ من إجمالي محتوى السكر، ومجموع محتوى حمض عضوي الموافق الحمضةويرد تاي، والمحتوى الكلي للالأنثوسيان التوت من نير الأطياف.

ويبين الشكل 1 الرسم البياني العام لبناء نماذج المعايرة متينة وموثوق بها. يتم جمع عينات من عدد كاف. وتستخدم بعض منهم لبناء نماذج في حين يتم استخدام الآخرين للتحقق من صحة نماذج بناؤها. لكل من العينات التي تم جمعها، ويتم قياس الطيف الجرد الوطني، ومن ثم يتم تحليل مكونات الهدف كميا مع طرق التحليل الكيميائي التقليدية المدمرة. هنا، يتم استخدام عالية الأداء اللوني السائل (HPLC) للتحاليل الكيميائية من السكريات والأحماض العضوية، والانثوسيانين. المربعات الصغرى الجزئية يستخدم (PLS) الانحدار لبناء نماذج المعايرة حيث يتم فحص العلاقة بين أطياف المرصود ومحتويات عنصر يحددها التحاليل الكيميائية. من أجل بناء نماذج قوية مع أفضل قدرة التنبؤ، والمعالجة المسبقة للobserيتم فحص أيضا فيد الأطياف والمناطق الطول الموجي استخدامها للتنبؤ. وأخيرا، يتم التحقق من صحة النماذج التي شيدت لتأكيد قدرة التنبؤ كافية لهم. في التحقق من الصحة، وتوقعت المحتويات من الطيف المرصود من قبل نموذج شيدت (القيم المتوقعة) وبالمقارنة مع محتويات يحددها التحاليل الكيميائية (القيم الملاحظة). إذا لا يمكن العثور على علاقة كافية بين القيم المتوقعة، ولاحظ، نموذج المعايرة يجب إعادة بناء، حتى يتم الحصول على علاقة كافية. على الرغم من أنه من الأفضل استخدام مجموعات مختلفة من العينات لبناء والتحقق من صحة النموذج كما هو موضح في هذا الرقم (التثبت من مصادر خارجية)، وتستخدم العينات في نفس المجموعة على حد سواء لبناء والتحقق من صحة (عبر التحقق من صحة) عندما يكون عدد عينات ليست كبيرة بما فيه الكفاية.

شكل 1
Figure 1. تدفق الرسم البياني لبناء والمصادقة على نموذج المعايرة، والإجراءات التي تحيط بها خطوط زرقاء وخضراء تتوافق على التوالي، إلى بناء نموذج المعايرة والتحقق من صحة لها. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. جمع العينات

  1. تقرر أي أصناف ستدرج في الهدف من نموذج المعايرة.
  2. جمع عدد كاف وأنواع مختلفة من العنب عينة من الأصناف المستهدفة.
    1. جمع ويفضل 100 التوت لبناء نموذج المعايرة، و 10 على الأقل في المصادقة على نموذج بناؤها. من أجل بناء نماذج قوية، وجمع عينات من أنواع مختلفة، أي مع مختلف الألوان والأحجام، وفي مختلف الظروف النضج.
  3. تزن كل توت. ملاحظة: يتم استخدام الأوزان قياسها في وقت لاحق لحساب محتوى في المئة من مكونات كل توت.

2. قياسات أطياف

  1. الاحماء معمل بما فيه الكفاية (أكثر من 1 ساعة) قبل القياسات للحصول على الأطياف موثوق بها.
  2. ضبط معمل. تأكد من أن الظروف ثابتة عن طريق القياسات. لوفيما يلي مثال على شروط نموذجية لقياس.
    1. تعيين مجموعة من القياسات ل12،500-3،600 سم -1.
    2. تعيين دقة الطيفي إلى 16 سم -1.
    3. تعيين تراكم 32 مرة.
  3. تحديد الانعكاس منتشر كوضع القياس.
  4. وضع العاكس القياسية على نافذة معمل لقياس الانعكاس منتشر. باستخدام "الخلفية قناة واحدة" القيادة، وقياس الطيف الخلفية التي تستخدم تلقائيا لحساب الأطياف الانعكاس النسبي من أطياف التوت عينة تقاس في وقت لاحق.
  5. وضع عينة توت في وسط النافذة من معمل لقياس الانعكاس منتشر. باستخدام "قناة واحدة عينة" القيادة، وقياس أطياف كل توت ويفضل أن يكون في عدة نقاط من الفاكهة.
    ملاحظة: كما سيتم إجراء Kubelka-مونك التحول 6،7 السياراتmatically لاحظ الأطياف من العنب عينة إذا تم تعيين حالة من الاستحواذ الطيفي للقيام بذلك. Kubelka-مونك التحول يغير أطياف قياس في وضع الانعكاس منتشر إلى أطياف يعادل تلك التي تقاس في وضع الإرسال وهناك حاجة لتحليل الأطياف بدقة عالية. وتستخدم الأطياف في نطاق الامتصاصية للتحاليل.
  6. حساب متوسط ​​طيف من الأطياف من كل عينة باستخدام برنامج معالجة البيانات مثل MS Excel إذا تم قياس أطياف عينة توت في عدة نقاط. استخدام الطيف المتوسط ​​للتحليلات.

3. المعالجة المسبقة لقياسات HPLC من والسكريات العضوية الأحماض 8

ملاحظة: استخراج السكريات والأحماض العضوية من كل عنبية، والتي هي قابلة للذوبان في الماء، مع الماء عالى النقاء على النحو التالي. يستخدم كل من كل عنبية للتحاليل.

  1. الحفاظ على التوت في الثلاجة دون -30 درجة مئوية استعداد FOتحاليل كيمائية ص إذا لم يتم تحليلها بعد القياسات الطيفية.
  2. قطع توت إلى عدة قطع بحيث يمكن بسهولة المتجانس في الخطوات التالية. قطع توت دون إزالة الجليد عندما يتم تجميده.
  3. وضع القطع في دورق 50 مل.
  4. إضافة كاليفورنيا. 10 مل من الماء عالى النقاء (الماء المقطر الذي هو أقل من 0.1 ميكرو ثانية / سم التوصيل الكهربائي) إلى الدورق.
  5. تسخين توت قطع في الماء عالى النقاء في فرن الميكروويف لمدة 20 ثانية لتنشيط الانزيمات التي يمكن أن تتحلل السكريات خلال التحليلات.
  6. إضافة كاليفورنيا 10 مل من الماء عالى النقاء إلى الدورق.
  7. تجانس الخليط لمدة 5 دقائق في 12000 دورة في الدقيقة مع الخالط مجهزة رمح القياسية والمولد.
  8. أجهزة الطرد المركزي الخليط المتجانس لمدة 10 دقيقة في 3000 دورة في الدقيقة (2000 × ز).
  9. جمع الرشاحة عن طريق الترشيح فراغ العينة طرد باستخدام ورق الترشيح 5B.
  10. كرر 3،6-3،9 الخطوات مرتين على الالبريد الترشيح بقايا لجمع كل السكريات والأحماض العضوية، والجمع بين كل الرواشح.
  11. قياس درجة الحموضة في الترشيح وتعديله إلى 7 مع حمض الهيدروكلوريك المخفف (0.1 و 0.01 مول L -1) وتمييع المحاليل المائية من هيدروكسيد الصوديوم (0.1 و 0.01 مول L -1).
  12. تمييع الترشيح إلى 50 مل مع الماء عالى النقاء.
  13. تقسيم العينة إلى مجموعتين. واحدة لتحليل السكريات والآخر لتحليل الأحماض العضوية.
  14. تمرير الحل الأول عينة من خلال أعمدة (اثنان C18، CM وهيئة متاحف قطر) في سلسلة متصلة إلى استبعاد المواد الملونة والكاتيونات والأنيونات. نرمي 1 مل الأولى من الحل عينة من الأعمدة. ثم استخدم محلول العينة من الأعمدة لتحليل السكريات بواسطة HPLC.
  15. تمرير محلول العينة الثانية من خلال الأعمدة (اثنان C18 وCM) في سلسلة متصلة إلى استبعاد أصباغ والكاتيونات. نرمي 1 مل الأولى من الحل عينة من الأعمدة. ثم استخدم محلول العينة من جolumns لتحليل الأحماض العضوية من قبل HPLC.
  16. أجهزة الطرد المركزي كل حل من الخطوات 3.14 و 3.15 في 6600 دورة في الدقيقة (5800 × ز) لمدة 10 دقيقة في microtube مجهزة 0.45 ميكرون فلتر مع جهاز طرد مركزي مصغرة قبل التحليل من قبل HPLC.

4. قياسات HPLC من السكريات

ملاحظة: في هذه الدراسة، يعتبر محتوى مبلغ من السكروز والجلوكوز والفركتوز من كل عنبية كما المحتوى الكلي السكر. لذلك، يتم الحصول على منحنى العمل لكل من ثلاثة سكريات أولا، ثم يتم الحصول على محتوى مجموع السكريات في كل توت. يتم الإبلاغ عن محتويات القياسية كما 0.3-0.4٪ بالوزن (السكروز)، 3،8-4،8٪ بالوزن (الجلوكوز)، و4،2-5،3٪ بالوزن (سكر الفواكه). 9

  1. قياس حوالي 200 ملغ من السكروز بدقة، وحله في 50 مل من الماء عالى النقاء لإعداد محلول قياسي. تمييع 5 مل من محلول إلى 50 مل مع الماء عالى النقاء لإعداد الحلول القياسية الثانية. إعداد بالمثل الموقف الثالثحل ARD من الحل المعيار الثاني.
  2. إعداد الحلول القياسية من الجلوكوز والفركتوز، وعلى نحو مماثل.
  3. ترتيب نظام HPLC على النحو التالي:
    1. استخدام عمود تغلغل الجل في الفرن العمود عند 40 درجة مئوية.
    2. استخدام الماء عالى النقاء نزع الغاز مع معدل تدفق 0.1 مل / دقيقة كما شطافة.
    3. استخدام جهاز الكشف عن معامل الانكسار.
  4. قياس الطيفية HPLC من الحلول القياسية عن طريق حقن قسامة 20 ميكرولتر لكل قياس. ملاحظة: وهنا يستخدم PAC الحل كبرنامج للقياس.
  5. الحصول على شدة المجال من عصابة من السكر على اللوني من كل حل القياسي بالنقر على "إعادة تحليل" مع الزر الأيمن من الفأرة.
  6. رسم شدة المجال أمام تركيزات المقابلة للحصول على منحنى العمل لكل السكر من الانحدار الخطي، حيث يتم الحصول على المعادلة التي تمثل العلاقة بين شدة المجال والتركيز FOص كل السكر.
  7. قياس الطيفية HPLC حلول عينة عن طريق حقن قسامة 20 ميكرولتر لكل قياس.
  8. الحصول على شدة المجال لعصابات من السكريات على اللوني من كل محلول العينة كما هو موضح سابقا في الخطوة 4.5.
  9. الحصول على تركيزات السكريات في الحلول باستخدام المعادلات المقابلة لمنحنيات العمل حصلت عليه في الخطوة 4.6.
  10. الحصول على كمية من كل السكر في كل عنبية من تركيزات محلول العينة التي تم الحصول عليها في الخطوة السابقة والحجم الكلي للمحلول العينة (50 مل، راجع الخطوة 3.12).
  11. الحصول على مجموع المبالغ السكر من كل فاكهة من خلال تلخيص محتويات ثلاثة سكريات.
  12. الحصول على المئة محتوى السكر الكلي لكل من العنبية باستخدام الوزن يقاس في الخطوة 1.3.

5. قياسات HPLC من الأحماض العضوية

ملاحظة: في هذه الدراسة، والمحتوى مجموع حمض الستريك وحمض الكينيك، الماليكتعتبر حامض، وحامض السكسينيك كما المحتوى الكلي لمجموع الأحماض العضوية. لذلك، يتم الحصول على منحنى العمل لكل من أربعة الأحماض العضوية أولا، ثم يتم قياس محتوى حمض عضوي في كل توت. يتم الإبلاغ عن محتويات القياسية كما 0،42-0،62٪ بالوزن (حمض الستريك)، 0-،15٪ بالوزن (حمض الكينيك)، 0،08-0،23٪ بالوزن (حمض الماليك)، و0،06-0،25٪ بالوزن (حمض السكسينيك). 9

  1. قياس حوالي 5 ملغ من حامض الستريك بدقة، وحله في 50 مل من الماء عالى النقاء لإعداد محلول قياسي. تمييع 5 مل من محلول إلى 50 مل مع الماء عالى النقاء لإعداد الحلول القياسية الثانية. إعداد بالمثل الحل القياسي الثالث من حل المعيار الثاني.
  2. إعداد الحلول القياسية من حمض الكينيك، حمض الماليك، وحمض السكسينيك، على نحو مماثل.
  3. ترتيب نظام HPLC على النحو التالي:
    1. استخدام عمودين أنيون الصرف في سلسلة متصلة في الفرن العمود عند 40 درجة مئوية.
    2. استخدام نزع الغاز محلول مائي 0.1٪ من الفوسفوريكحمض مع معدل التدفق من 0.02 مل / دقيقة كما شطافة.
    3. استخدام مجموعة كاشف الأشعة فوق البنفسجية مرئية في 210 نانومتر.
  4. قياس الطيفية HPLC من الحلول القياسية عن طريق حقن قسامة 20 ميكرولتر من محلول قياسي لكل قياس.
  5. الحصول على شدة المجال من عصابة من الأحماض العضوية على اللوني من كل حل القياسي بالنقر على "إعادة تحليل" مع الزر الأيمن من الفأرة.
  6. رسم شدة المجال أمام تركيزات المقابلة للحصول على منحنى العمل لكل الأحماض العضوية من قبل الانحدار الخطي، حيث يتم الحصول على المعادلة التي تمثل العلاقة بين شدة المجال والتركيز على كل الأحماض العضوية.
  7. قياس الطيفية HPLC حلول عينة عن طريق حقن قسامة 20 ميكرولتر من العينة لكل قياس.
  8. الحصول على شدة المجال لعصابات من الأحماض العضوية على اللوني من كل محلول العينة كما هو موضح سابقا في الخطوة 5.5.
  9. الحصول على تركيزات من الأحماض العضوية في الحلول باستخدام المعادلات المقابلة لمنحنيات العمل حصلت عليه في الخطوة 5.6.
  10. الحصول على كمية من كل الأحماض العضوية في كل عنبية من تركيزات محلول العينة التي تم الحصول عليها في الخطوة السابقة والحجم الكلي للمحلول العينة (50 مل، راجع الخطوة 3.12).
  11. الحصول على كمية من الحمض العضوي الكلي في كل عنبية من خلال تلخيص محتويات الأحماض العضوية الأربعة.
  12. الحصول على نسبة المحتوى من حمض عضوي الإجمالي لكل العنبية باستخدام الوزن يقاس في الخطوة 1.3.

6. المعالجة المسبقة لقياسات HPLC من الانثوسيانين

  1. الحفاظ على التوت في الثلاجة أقل من -80 ° C جاهزة للالتحاليل الكيميائية إذا لم يتم تحليلها بعد القياسات الطيفية.
  2. تجف كل الفاكهة المجمدة مع مجفاد فراغ لمدة 12 ساعة.
  3. استخراج الأنثوسيانين من العنبية المجففة في 1٪ من محلول الميثانول سو حمض trifluoroacetic [وزن العنبية (ز) / حجم محلول (مل) = 1/10] من خلال ترك الخليط في الثلاجة عند 4 درجة مئوية لمدة 12 ساعة.
  4. أجهزة الطرد المركزي في استخراج لمدة 15 دقيقة في microtube 2 مل باستخدام نابذة في -8 ° C و 15،000 دورة في الدقيقة (21،900 × ز).
  5. تصفية استخراج من خلال مرشح 0.45 ميكرون للحصول على عينة لقياسات HPLC.

7. قياسات HPLC من الانثوسيانين

ملاحظة: تم تضمينها حوالي 13 الانثوسيانين النوع في العنب البري. وبما أنه من الصعب الحصول على منحنيات العمل لجميع الانثوسيانين، منحنى العمل فقط سيانيدين-3- كلوريد يا -glucoside، واحدة من الانثوسيانين الأكثر شعبية في العنب البري، ويتم الحصول على. يتم تطبيق منحنى العمل من أجل التحديد الكمي التقريبية من الانثوسيانين أخرى.

  1. قياس حوالي 1.5 ملغ من سيانيدين-3- يا كلوريد -glucoside بدقة، وحله في 10 مل من محلول 1٪ الميثانول من حمض trifluoroacetic إلى العلاقات العامةepare حل القياسية. تمييع 5 مل من محلول إلى 10 مل مع 1٪ محلول الميثانول من حمض trifluoroacetic لإعداد الحلول القياسية الثانية. وبالمثل، وإعداد الثالث والحلول القياسية الرابع على التوالي.
  2. ترتيب نظام HPLC على النحو التالي:
    1. استخدام عمود عكس المرحلة C18 في فرن العمود عند 40 درجة مئوية.
    2. تطبيق طريقة التدرج باستخدام eluates من 0.1٪ حمض trifluoroacetic مائي (أزل أ) وحمض trifluoroacetic 0.5٪ في الأسيتونتريل (أزل ب) مع معدل تدفق 0.1 مل / دقيقة، حيث بلغت نسبة الزيادة أزل B من 8٪ إلى 15٪ خلال 0-50 دقائق بعد الحقن، ومن 15٪ إلى 75٪ خلال 50-60 دقيقة بعد الحقن.
    3. استخدام الضوئي مجموعة مراقبة للكشف على 520 نانومتر.
  3. قياس الطيفية HPLC من الحلول القياسية عن طريق حقن قسامة 10 ميكرولتر لكل قياس. يستخدم "الحل LC" كبرنامج للقياس.
  4. الحصول على شدة المجال من عصابة منسيانيدين-3- يا -glucoside كلوريد على اللوني من كل حل القياسي بالنقر على "إعادة تحليل" مع الزر الأيمن من الفأرة.
  5. رسم شدة المجال أمام تركيزات المقابلة للحصول على منحنى العمل لسيانيدين-3- كلوريد يا -glucoside من الانحدار الخطي، حيث يتم الحصول على المعادلة التي تمثل العلاقة بين شدة المجال والتركيز على سيانيدين-3- كلوريد يا -glucoside.
  6. قياس الطيفية HPLC حلول عينة عن طريق حقن قسامة 10 ميكرولتر لكل قياس.
  7. الحصول على شدة المجال من الفرقة من كل الأنثوسيانين على اللوني من كل محلول العينة كما هو موضح سابقا في الخطوة 7.4.
  8. الحصول على تركيزات من الانثوسيانين في الحلول باستخدام المعادلة المقابلة لمنحنى العمل حصلت عليه في الخطوة 7.5.
  9. الحصول على مبالغ من كل الأنثوسيانين في كل عنبية من تركيز حصلت في السابقخطوة والحجم الكلي للمحلول العينة المستخدمة في الخطوة 6.3.
  10. الحصول على المبلغ الإجمالي للالأنثوسيانين في كل عنبية من خلال تلخيص محتويات ثلاثة عشر الانثوسيانين.
  11. الحصول على المئة مضمون الأنثوسيانين الإجمالي لكل العنبية باستخدام الوزن يقاس في الخطوة 1.3.

8. بناء نماذج معايرة للتنبؤ مكونات المحتويات

ملاحظة: الثابتة والمتنقلة الانحدار، 4،5 والذي هو نوع من أسلوب الانحدار المتعدد باستخدام المتغيرات الكامنة، ويستخدم لبناء نماذج المعايرة لكل عنصر من احظ الأطياف ومحتويات عنصر يحددها التحاليل الكيميائية. PLS يتم تنفيذ الانحدار إما مع البرامج التجارية أو مع برامج محلية الصنع. انظر المراجع 5،10 لعمليات مفصلة لبناء نماذج.

  1. دراسة التي المعالجة المسبقة للالأطياف المرصودة هي الأكثر فعالية لدقيقة وتنبؤ قوي.
    1. بناء نماذج المعايرة من خلال تطبيق واحد أو اثنين من المعالجة المسبقة التالية: لجنة السلامة البحرية (المضاعف مبعثر تصحيح)، 1،2،5 ستارت (مستوى عادي VARIATE)، 1،2،5 MMN (مين ماكس التطبيع)، COE (ثابت إزاحة القضاء )، وأول أو حساب المشتقة الثانية من سان جرمان (Savitzky-غولي) الأسلوب. 1،2،5 التنبؤ محتويات المكون من التحقق من صحة تعيينها من أطيافها مع النماذج التي شيدت.
      ملاحظة: في MMN، طائفة هو تطبيع بحيث الحد الأدنى والحد الأقصى للقيم تصبح 0 و 1 على التوالي. في COE، يتم إزاحة تنسيق لطيف بحيث يصبح الحد الأدنى لقيمة الصفر.
    2. حساب معامل التحديد، R 2، والانحراف التنبؤي المتبقية، RPD، بين لوحظ وتوقع قيم التحقق من صحة المقرر أن دراسة التي المعالجة المسبقة للالأطياف المرصودة هي الأكثر فعالية. اختيار مزيج من المعالجة المسبقة إعطاء أكبرR 2 وRPD.
  2. فحص الذي المناطق متجه مموج موجه فعالة للتنبؤ الدقيق والقوي من خلال تطبيق، على سبيل المثال، والانتقال النوافذ PLS تقنية 11 للبحث في مناطق فعالة.
    ملاحظة: الإجراء يتوافق مع إزالة المناطق متجه مموج موجه حيث تحتوي على أطياف أي معلومات فعالة للتنبؤات أو تحتوي على المعلومات التي تتعارض مع التوقعات.

9. التحقق من نماذج معايرة شيدت

ملاحظة: انظر المراجع 5،10 لعمليات مفصلة من صلاحية النماذج المبنية.

  1. التنبؤ محتويات المقومات من التحقق من صحة تعيينها من أطيافها مع نماذج المعايرة التي شيدت مع أفضل مزيج من المعالجة المسبقة وللمناطق متجه مموج موجه فعالة للتنبؤ. 5،10
  2. حساب R 2 وRPD بين الملحوظ والمتوقعقيم مجموعة التحقق من الصحة. 5،10
  3. دراسة ما إذا كانت المعايير العامة لأداء العملي لنماذج المعايرة، 12،13 R 2> 0.85 وRPD> 2.5، راضون. النظر في إعادة بناء نموذج إذا كانت معايير ليست راضية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

ويوضح الشكل 2 كمثال مجموعة من قوائم الجرد الوطنية امتصاص الأطياف من العنب البري حيث يتم عرض أطياف من 70 التوت في وقت واحد. منذ لا يتم ملاحظة الفرق بالتأكيد احالة على السكريات والأحماض العضوية، أو الانثوسيانين في أطياف الجرد الوطني والقانون التقليدية لامبرت-البيرة ليست قابلة للتطبيق لتحديد محتويات عنصر. لذلك، وبناء نماذج للتنبؤ محتويات العنصر هو ضروري.

ويبين الشكل 3 الاستشرابية نموذجية للتحليل الكمي من السكريات في العنب البري. ثلاث لوحات من الأعلى، على التوالي، الاستشرابية من الحلول القياسية من السكروز والجلوكوز، والفركتوز. وتبين اللوحة السفلية واللوني من محلول العينة، أي استخراج عنبية. من المعروف أن أنواع وتركيزات السكريات في حل عينة من الأوقات الاحتفاظ لالثانية شدة مجال القمم ملاحظتها. يتم الحصول على محتوى السكر الكلي كمجموع محتويات السكروز والجلوكوز، والفركتوز.

ويبين الشكل 4 مثال اللوني لتحليل الأحماض العضوية في العنبية. من خلال الإشارة إلى الاستشرابية من الحل القياسية (غير مبينة هنا)، من المعروف أن أنواع وتركيزات الأحماض العضوية في محلول العينة. للمهام من قمم لاحظ هو مبين في أسطورة الرقم، لوحظ قمتين للحمض الكينيك في الاستشرابية من الحلول القياسية وعينة. لأنها قد تكون احالة لإيزومرات حمض الكينيك. يتم الحصول على مجموع محتوى الأحماض العضوية مثل مبلغ من حمض الستريك وحمض الكينيك، حمض الماليك، ومحتويات حمض السكسينيك.

ويبين الشكل 5 مثال اللوني لتحليل الانثوسيانين في العنبية. العديد من قمم المقابلة لاحويلاحظ الانثوسيانين الكريمة الإقليم الشمالي. منذ تم الإبلاغ ترتيب زوغان لهذه الانثوسيانين 14،15 كما هو مبين في الجدول رقم 1، يمكن تعيين القمم لوحظ أن الانثوسيانين الفردية. يتم الحصول على المحتوى الكلي للالأنثوسيان كمجموع محتويات 13 نوعا من الانثوسيانين.

هي التي شيدت نماذج المعايرة من احظ الأطياف ومحتويات عنصر تحديد كيميائيا. ويبين الجدول 2 مثالا للفحص المعالجة المسبقة. ستة المعالجة المسبقة نوع بما في ذلك "أي (بدون المعالجة)" تم فحص لبناء نموذج معايرة نسبة السكر الكلي باستخدام الأطياف في متجه مموج موجه الثابتة منطقة 12،500-3،600 سم -1. المعالجة المسبقة مختلفة تؤدي إلى أداء التنبؤ مختلفة. وجرى تقييم أداء النماذج مع R 2 وRPD. نوع من المعالجة المسبقة التي تعطي أفضل prediيتم اختيار الأداء ction. في الجدول 2، "مشتق الثانية + لجنة السلامة البحرية"، مما يعني MSC بعد حساب المشتقة الثانية، ويعطي أفضل النتائج. ثم يتم فحص المناطق متجه مموج موجه تستخدم لبناء نموذج من خلال تغيير المناطق مع المعالجة المسبقة الثابتة.

ويبين الشكل 6 مثالا على ذلك نتيجة للتصديق متقاطع من طراز المعايرة لمجموع محتوى السكر، حيث يتم عرض الارتباط بين القيم التي تنبأ بها الجرد الوطني الطيفي وتلك التي يحددها HPLC. تم بناء نموذج مع "المشتقة الثانية + لجنة السلامة البحرية"، كما المعالجة المسبقة واستخدام 8،539-7،775 سم -1 منطقة الأطياف. أداء التنبؤ من هذا النموذج هو R 2 = 0.85 وRPD = 2.6، وذلك فوق معايير الاستخدام العملي. في هذا المثال، بلغ عدد العينات المستخدمة لبناء نموذج 30، والتي هي صغيرة جدا لسلبياتtruct نماذج عالية الأداء.

ويبين الشكل 7 كمثال نتيجة للتصديق متقاطع من طراز المعايرة لمجموع محتوى حمض عضوي، حيث أظهرت العلاقة بين القيم التي تنبأ بها الجرد الوطني الطيفي وتلك التي يحددها HPLC. تم بناء نموذج مع "أول مشتق + MSC"، كما المعالجة المسبقة واستخدام 7،505-5،446 و4،605-4،242 سم -1 مناطق الأطياف. أداء التنبؤ من هذا النموذج هو R 2 = 0.92 وRPD = 3.6، والتي هي كافية للتطبيق العملي.

ويبين الشكل 8 كمثال نتيجة التحقق من صحة الخارجي للنموذج معايرة لمجموع محتوى الأنثوسيان، مع ارتباط بين القيم التي تنبأ بها الجرد الوطني الطيفي وتلك التي يحددها HPLC. تم بناء نموذج مع "د الأولى erivative "، كما المعالجة واستخدام 12،489-6،094 و4،605-4،242 سم -1 مناطق الأطياف. أداء التنبؤ من هذا النموذج هو R 2 = 0.95 وRPD = 4.4، مما يدل على الأداء الجيد إلى حد ما من نموذج شيدت منذ الأنثوسيانين موجود أساسا في قشور العنب البري، لوحظ بسهولة مع قياسات الانعكاس منتشر على الرغم من محتواه في عنبية ليست عالية. سوف تسبب الأداء الجيد هو مبين في الشكل 8 أيضا من قبل عدد كبير من العينات (70) تستخدم لبناء نموذج .

الشكل 2
ويبين الشكل 2. قوائم الجرد الوطنية امتصاص الأطياف من العنب البري. الأطياف من 70 التوت في وقت واحد. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

= "jove_content" FO: المحافظة على together.within الصفحات = "1"> الشكل (3)
الشكل 3. الاستشرابية للتحليل الكمي من السكريات في العنب البري. الاستشرابية من الحلول القياسية من (A) السكروز، (ب) الجلوكوز، (C) سكر الفواكه، و (D) واللوني من محلول العينة. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (4)
الشكل 4. المخطط الاستشرابي للتحليل الكمي من الأحماض العضوية في العنبية. قمم الملاحظة تتوافق مع حمض الستريك (1)، وحمض الماليك (2)، وحمض الكينيك (0 و 3)، وحمض السكسينيك (4). التنوير القائلبورصة عمان انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 5
الرقم 5. المخطط الاستشرابي للتحليل الكمي من الانثوسيانين في العنبية. يتم تعيين قمم الملاحظة إلى الانثوسيانين الفردية المدرجة في الجدول 1 حيث يتم عرض الوقت الاحتفاظ القياسية لكل الأنثوسيانين. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (6)
يتم رسم الشكل 6. نتيجة التحقق من صحة عبر النموذج لمجموع محتوى السكر. إن القيم التي تنبأ بها الجرد الوطني الطيفي ضد تلك التي يحددها HPLC. R 2 = 0.85 وRPD = يتم الحصول عليها 2.6. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 7
الرقم 7. نتيجة التحقق من صحة عبر النموذج لمجموع محتوى الأحماض العضوية. يتم رسم القيم التي تنبأ بها الجرد الوطني الطيفي ضد تلك التي يحددها HPLC. R 2 = 0.92 وRPD = 3.6 يتم الحصول عليها. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

شكل 8
الرقم 8. نتيجة التحقق من صحة الخارجي للنموذج لمجموع محتوى الأنثوسيان. يتم رسم القيم التي تنبأ بها الجرد الوطني الطيفي ضد أولئك دالعزم من قبل HPLC. R 2 = 0.95 وRPD = 4.4 يتم الحصول عليها. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

معادلة الأنثوسيانين ممثل زمن الانحباس (دقيقة)
C 21 H 21 O 12 Delphinidin-3- يا -galactoside 17.3
C 21 H 21 O 12 Delphinidin-3- يا -glucoside 19.7
C 21 H 21 O 11 سيانيدين-3- يا -galactoside 22.8
C 20 H 19 O 11 Delphinidin-3- 23.6
C 21 H 21 O 11 سيانيدين-3- يا -glucoside 24.5
C 22 H 23 O 12 Petunidin-3- يا -galactoside 28.7
C 20 H 19 O 10 سيانيدين-3- يا -arabinoside 31.3
C 22 H 23 O 12 Petunidin-3- يا -glucoside 36.0
C 22 H 23 O 11 فاوانيدين-3- يا -galactoside 37.0
C 21 H 21 O 11 Petunidin-3- يا -arabinoside 40.8
C 22 H 23 O 11 فاوانيدين-3- يا -glucoside 43.7
C 23 H 25 O 12 Malvidin-3- يا -galactoside 45.0
C 23 H 25 O 12 Malvidin-3- يا -glucoside 49.6

الجدول 1. الانثوسيانين الرئيسية الواردة في العنب البري، ويتم أيضا سرد مرات الاحتفاظ تمثيلية في التحليل HPLC تحت الظروف التجريبية الحالية.

تجهيزها المنطقة متجه مموج موجه تستخدم لتحليل (سم -1) RPD R 2
لا شيء 12،500-3،600 1.7 0.69
المشتق الثاني 12،500-3،600 2.6
المشتقة الأولى 12،500-3،600 2.5 0.84
لجنة السلامة البحرية 12،500-3،600 2.3 0.81
المشتق الثاني + MSC 12،500-3،600 2.8 0.88
المشتقة الأولى + MSC 12،500-3،600 2.7 0.87

الجدول 2. دراسة للاعتماد أداء التنبؤ على المعالجة المسبقة لاحظ الأطياف. مدرجة R 2 وRPD للتنبؤ من إجمالي محتوى السكر.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

وصفت بعض تعليقات إضافية على بروتوكول هنا. أولا، في خطوة 1.1، ذكر ذلك لتحديد الأصناف المدرجة في الهدف. على الرغم من أنه من الممكن لبناء نماذج تغطي العنب من العديد من أصناف أو دون تحديد الأصناف، ودقتها التنبؤ مع النماذج في بعض الأحيان أقل بكثير من أولئك الذين لديهم نماذج لصنف واحد وأصناف محدودة. كما تجدر الإشارة إلى أن نماذج المعايرة يجب أن يتم بناؤها لالعنب البري من كل موقع الإنتاج للحصول على أداء التنبؤ عالية لأن العنب تحصد في مواقع الإنتاج المختلفة لها خصائص مختلفة والتي تؤثر على أداء التنبؤ. 1

ثانيا، في خطوة 2.3، وهو مذكور لتحديد وضع الانعكاس منتشر للقياسات الأطياف. تم إعداد اسطة نقل أيضا عن القياسات على معمل. على الرغم من أطياف قياس في وضع الإرسال هييسوتو المتاحة لبناء نماذج المعايرة، ونماذج أكثر دقة وأكثر قوة يمكن بناؤها مع أطياف قياس في وضع الانعكاس منتشر في معظم الحالات. لا يمكن التنبؤ مجموع محتويات حمض عضوي مع أطياف قياس في وضع النفاذية. 3

ثالثا، لقياس أطياف التوت، فمن غير المستحسن لقياس أطياف في الكأس منذ حالة السطحية ومحتويات حول الكأس تختلف عن تلك في مواقف أخرى. ومع ذلك، فمن الممكن لبناء نماذج المعايرة باستخدام عدد كاف من أطياف قياس في كل من الكأس وغيرها من المواقف. ومع ذلك، فإن دقتها من النماذج هي في معظم الحالات أقل من تلك النماذج التي شيدت مع أطياف يقاس فقط في وظائف أخرى من الكأس.

رابعا، مجموعة الجرد الوطني للتوت يعتمد على درجة الحرارة. لذلك، للتنبؤ الدقيق إما أنها ايمportant لقياس دائما الأطياف في نفس درجة حرارة الغرفة أو لبناء نماذج المعايرة مع التعويض عن اختلاف درجة الحرارة. 1

خامسا، على الرغم من R فقط 2 و RPD تستخدم لاختيار المعالجة المسبقة وتقييم أداء النماذج التي شيدت هنا، بعض القيم الأخرى مثل المجلس الأعلى للتعليم (خطأ قياسي من معايرة)، سبتمبر (خطأ قياسي من التنبؤ)، SECV (خطأ قياسي من الصليب -Validation)، RMSEP (الجذر يعني خطأ من التنبؤ مربع)، وRMSECV (خطأ جذر متوسط ​​مربع من عبر التحقق من صحة) وتستخدم عادة لفحص أكثر تفصيلا. في ورقتنا السابقة، 3 على سبيل المثال، استخدمت RMSEP وRMSECV لاختيار المعالجة المسبقة وتقييم أداء نماذج بناؤها.

كان التنبؤ تدميري من إجمالي السكر، حمض عضوي الكلي، ومجموع محتويات الأنثوسيانين في عنبية فوالثانية أن يكون من الممكن إذا هي التي شيدت نماذج للتنبؤات بشكل صحيح. هذه التقنية قابلة للتطبيق لاختيار التوت فقط لذيذة من كل تلك حصادها، والتي لا يمكن أن يتحقق مع التقنيات التحليلية التقليدية الأخرى. 8،9 على الرغم من أن إجراءات التحاليل الكيميائية قد تبدو معقدة، يتم تضمينها في التقنيات التحليلية شعبية وليست يرافقه صعوبات كبيرة. فمن المهم للحصول على نتائج دقيقة للتحاليل الكيميائية لأن النتائج هي أساس نموذج بناؤها. في هذه الدراسة، كان RSD (نسبة الانحراف المعياري) للقياسات HPLC حوالي 1٪. ومن الضروري أيضا أن يتبع الإجراء الأساسي، على سبيل المثال كما هو موضح في الشكل رقم 1، لبناء نماذج قابلة للتطبيق عمليا.

أساليب بسيطة وسريعة بدلا من HPLC يمكن تطبيقها على التحاليل الكيميائية. إجمالي محتوى السكر والحموضة يمكن أن يقاس على التوالي، مع الإنكسار(متر بركس) ومقياس درجة الحموضة. على 16،17 درجة الحموضة الطريقة التفاضلية للتطبيق لقياس المحتوى الكلي للالأنثوسيانين. تطبيق طرق بسيطة تجعل بناء نماذج أسهل بكثير على الرغم من أن دقة القيم التي تنبأ بها نماذج قد تكون أقل من تلك التي تنبأ بها النماذج التي شيدت على أساس القياسات HPLC هو موضح هنا. ومع ذلك، فإن دقة النماذج التي شيدت على أساس تحليلات كيميائية بسيطة قد تكون قابلة للتطبيق عمليا في مواقع الإنتاج والعمليات الدورة الدموية بسبب دقتها العالية ليست هناك حاجة دائما هناك. طرق للتحاليل الكيميائية، لذلك، يجب أن يكون محددا وفقا لدقتها اللازمة للنماذج التي يتم بناؤها.

على الرغم من أن بعض الفواكه مثل التفاح والبرتقال وتباع عموما مع محتويات السكر مضمونة والحموضة، لم يتم بيعها من العنب البري مع صفات مضمونة. ونتيجة لذلك، فإن نوعية العنب التجارية يفعللا يبدو مستقرا على الأقل في اليابان. في بعض الأحيان يتم بيع التوت جودة منخفضة في الأسواق. ومن المتوقع أن تمكن، من حيث المبدأ، والشحن وبيع العنب البري مع صفات مضمونة الأساليب التحليلية تدميري نير الطيفي هو موضح هنا.

وأخيرا، هناك قيود من هذا الأسلوب. أولا، على النحو المذكور أعلاه، وبناء نماذج التنبؤ مزعجة إلى حد ما. وعلاوة على ذلك، يجب بناء نموذج التنبؤ في كل موقع وفي كل عام من زراعة لأن الفرق في القيمة من المكونات المتعايشة (التي تعتمد على الموقع وسنة زراعة) يؤثر على دقة التنبؤ. لذلك، هناك حاجة إلى بعض الجهد للحفاظ على نماذج التنبؤ. ثانيا، على الرغم من أننا قد أظهرت أن التحليل الطيفي الأشعة تحت الحمراء القريبة، من حيث المبدأ، قابلة للتطبيق لفحص الجودة من العنب البري، يتم استخدام المعدات والتقنيات التي تظهر هنا فقط في المختبر، وغير قابلة للتطبيق في مواقع الإنتاج يكونتسبب فحص سريع لكميات كبيرة من التوت في مواقع الإنتاج أمر مستحيل. التطوير العملي من المعدات وتطوير نماذج المعايرة قوية مناسبة للاستخدام في مواقع الإنتاج والعمليات التداول المناسبة هي التوجهات المستقبلية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
FT-NIR spectrophotometer Bruker Optics GmbH MPA 
High-Performance Liquid Chromatography Shimadzu Corporation 228-45041-91, 228-45000-31, 228-45018-31 For sugar analysis
223-04500-31, 228-45010-31, 228-45095-31 Refractive Index Detector
High-Performance Liquid Chromatography Shimadzu Corporation 228-45041-91, 228-45003-31, 228-45000-31 For organic acid analysis
228-45018-31, 228-45010-31, 223-04500-31 Ultraviolet-Visible Detector
High-Performance Liquid Chromatography Shimadzu Corporation 228-45041-91, 228-45018-31, 228-45000-31 For anthocyanin analysis
228-45012-31, 228-45119-31, 228-45005-31 Photodiode Array Detector
228-45009-31
pH meter Mettler-Toledo 30019028 S220, Automatic temperature compensation
Ultra-pure water treatment equipment ORGANO Corporation ORG-ULXXXM1; PRA-0015-0V0 PURELAB ultra; PURELITE
Biomedical Freezers  SANYO 2-6780-01 MDF-U338
Ultra-Low Temperature Freezer Panasonic healthcare Co.,Ltd. KM-DU73Y1 -80 °C
Vacuum lyophilizer IWAKI GLASS Co.,Ltd 119770 DRC-3L; FRD-82M
Homoginizer Microtec Co., Ltd.  Physcotron
Ultracentrifuge Hitachi Koki Co.,Ltd S204567 CF15RXII
Mini-centrifuge LMS CO.,LTD. KN3136572 MCF-2360
Centrifuge Kokusan Co.,Ltd 2-5534-01 H-103N
Filter Paper  Advantec 1521070 5B, Eqivalent to Whatman 40
Sep-Pak C18 column Waters Corporation Milford WAT020515
Sep-Pak CM column Waters Corporation Milford WAT020550
Sep-Pak QMA column Waters Corporation Milford WAT020545
Centrifugal Filter Unit Merck Millipore Corporation R2SA18503 PVDF, 0.45 μm
Microtube As One Corporation 1-1600-02 PP, 2 ml
Syringe Filter GE Healthcare CO.,LTD. 6788-1304 PP, 0.45 μm
Sucrose Wako Pure Chemical Industries,Ltd 194-00011 Reagent-grade
Glucose Wako Pure Chemical Industries,Ltd 049-31165 Reagent-grade
Fructose Wako Pure Chemical Industries,Ltd 123-02762 Reagent-grade
Citric acid Wako Pure Chemical Industries,Ltd 036-05522 Reagent-grade
Malic acid Wako Pure Chemical Industries,Ltd 355-17971 Reagent-grade
Succinic acid  Wako Pure Chemical Industries,Ltd 190-04332 Reagent-grade
Quinic acid Alfa Aesar, A Johnson Matthey Company 10176328 Reagent-grade
Phosphoric acid Wako Pure Chemical Industries,Ltd 162-20492 HPLC-grade
Trifluoroacetic acid Wako Pure Chemical Industries,Ltd 208-02746 Reagent-grade
Methanol Wako Pure Chemical Industries,Ltd 131-01826 Reagent-grade
Acetonitrile Wako Pure Chemical Industries,Ltd 015-08633 HPLC-grade
Grade cyanidin-3-O-glucoside chloride Wako Pure Chemical Industries,Ltd 306-37661 HPLC-grade
Software for analyses Bruker Optics GmbH OPUS ver. 6.5
Softoware for preprocessing Microsoft Excel powered by Visual Basic for Applications
Software for construction of models Freemat 4.0 http://freemat.sourceforge.net/

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ozaki, Y., McClure, W. F., Christy, A. A. Near-infrared Spectroscopy in Food Science and Technology. , John Wiley & Sons, Inc. Hoboken. (2007).
  2. Sun, D. W. Infrared Spectroscopy for Food Quality Analysis and Control. , Academic Press. New York. (2009).
  3. Bai, W., Yoshimura, N., Takayanagi, M. Quantitative analysis of ingredients of blueberry fruits by near infrared spectroscopy. J. Near Infrared Spectrosc. 22, 357-365 (2014).
  4. Hasegawa, T. Chemometrics in infrared spectroscopic analysis. In: Introduction to Experimental Infrared Spectroscopy. Tasumi, M. , John Wiley & Sons. Chichester. 97-113 (2015).
  5. Varmuza, K., Filzmoser, P. Introduction to Multivariate Statistical Analysis in Chemometrics. , CRC Press. Boca Raton. (2009).
  6. Kubelka, P. New contributions to the optics of intensely light-scattering materials. Part I. J. Opt. Soc. Am. 38, 448-457 (1948).
  7. Juang, R. H., Storey, D. E. Quantitative determination of the extent of neutralization of carboxylic acid functionality in carbopol 974P NF by diffuse reflectance fourier transform infrared spectrometry using Kubelka-Munk function. Pharm Res. 15, 1714-1720 (1998).
  8. Ogiwara, I., Ohtsuka, Y., Yoneda, Y., Sakurai, K., Hakoda, N., Shimura, I. Extraction method by water followed by microwave heating for analyzing sugars in strawberry fruits. J. Jpn. Soc. Hort. Sci. 68, 949-953 (1999).
  9. Che, J., Suzuki, S., Ishikawa, S., Koike, H., Ogiwara, I. Fruit ripening and quality profile of 64 cultivars in three species of blueberries grown in Tokyo. Hort. Res. (Japan). 8, 257-265 (2009).
  10. Pomerantsev, A. L. Chemometrics in Excel. , John Wiley & Sons, Inc. Hoboken. (2014).
  11. Jiang, H. J., Berry, R. J., Siesler, H. W., Ozaki, Y. Wavelength Interval Selection in Multicomponent spectral analysis by moving window partial least-squares regression with applications to mid-infrared and near-infrared spectroscopic data. Anal. Chem. 74, 3555-3565 (2002).
  12. Edney, M. J., Morgan, J. E., Williams, P. C., Campbell, L. D. Analysis of feed barley by near infrared reflectance spectroscopy. J. Near-Infrared Spectrosc. 2, 33-41 (1994).
  13. Mathison, G. W., et al. Prediction of composition and ruminal degradability characteristics of barley straw by near infrared reflectance spectroscopy. Can. J. Anim. Sci. 79, 519-523 (1999).
  14. Chiara, F., et al. Analysis of anthocyanins in commercial fruit juices by using nano-liquid chromatography electrospray-mass spectrometry and high performance liquid chromatography with UV-vis detector. J. Separation Sci. 34, 150-159 (2011).
  15. Li, Q., et al. Antioxidant anthocyanins screening through spectrum-effect relationships and DPPH-HPLC-DAD analysis on nine cultivars of introduced rabbiteye blueberry in China. Food Chemistry. 132, 759-765 (2013).
  16. Sinelli, N. Evaluation of quality and nutraceutical content of blueberries (Vaccinium corymbosum L.) by near and mid-infrared spectroscopy. Postharvest Biol. Technol. 50, 31-36 (2008).
  17. Giusti, M. M., Wrolsted, R. E. Anthocyanins: characterization and measurement with UV-visible spectroscopy. Current Protocols in Food Analytical Chemistry. Wrolstad, R. E., Schwartz, S. J. , John Wiley & Sons. New York. 1-13 (2001).

Tags

الكيمياء، العدد 112، الكيمياء التحليلية، عنبية، القريبة من الأشعة تحت الحمراء الطيفي، السكر، حمض عضوي، الأنثوسيانين، Chemometrics، الجزئي المربعات (PLS) الانحدار، HPLC
بناء نماذج التنبؤ تدميري من مكونات المحتويات في العنب البري بواسطة التحليل الطيفي القريبة من الأشعة تحت الحمراء بناء على قياسات HPLC
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Bai, W., Yoshimura, N., Takayanagi,… More

Bai, W., Yoshimura, N., Takayanagi, M., Che, J., Horiuchi, N., Ogiwara, I. Construction of Models for Nondestructive Prediction of Ingredient Contents in Blueberries by Near-infrared Spectroscopy Based on HPLC Measurements. J. Vis. Exp. (112), e53981, doi:10.3791/53981 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter