Summary
ريبرودوكابل نماذج حيوانية التجريبية اللازمة لاختبار المواد الانصمام الرواية، التي تم تصميمها لمعالجة انسداد اللمفاوية لتمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة (IA). هذه الدراسة تهدف إلى تطوير تقنية جراحية آمنة وموحدة الانصمام ساعد تركيب دعامات من الكييس تمدد الأوعية الدموية في نموذج الفئران حيوان.
Abstract
تقدم مطرد في عتاد التقنيات المتاحة لعلاج تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة اللمفاوية يتطلب نماذج حيوانية تجريبية ريبرودوكابل وبأسعار معقولة لاختبار المواد الانصمام رواية مثل الموجهات الدعامات والتدفق. يهدف هذا المشروع تصميم آمنة وسريعة، وساعدت الموحد تقنية جراحية لتركيب دعامات الانصمام من الكييس تمدد الأوعية الدموية في نموذج الفئران حيوان.
تمدد الأوعية الدموية الكييس تم إنشاؤها من الاختلاس الشرياني من الشريان الاورطي تنازلي. تمدد الأوعية الدموية تم زرع ميكروسورجيكالي عن طريق ملامسة نهاية إلى جانب إلى إينفرارينال الشريان الاورطي البطني من سينجينيك الذكور ويستار الفئران وزنها > 500 غرام. عقب ملامسة تمدد الأوعية الدموية، أجرى الانصمام تمدد الأوعية الدموية باستخدام البالون المغنيسيوم قابلة للتوسيع الدعامات (2.5 مم × 6 مم). وكان النظام تركيب دعامات رجعية قدم من الشريان الاورطي البطني السفلي باستخدام تقنية Seldinger معدلة.
عقب مجموعة من 6 الحيوانات تجريبية، تعمل مجموعة فئران 67 وفقا لإجراءات التشغيل القياسية. يعني وقت الجراحة، ووقت ملامسة يعني ويعني خياطة الوقت الموقع ثقب الشريان كانت 167 ± 22 دقيقة، 26 ± دقيقة 6 و 11 ± 5 دقائق، على التوالي. وكان معدل الوفيات 6% (n = 4). كان معدل الاعتلال 7.5% (n = 5)، وعثر في تركيب دعامات تجلط الدم في 4 حالات (ن = 2 المبكر، ن = 2 في تركيب دعامات تجلط الدم أواخر).
النتائج إثبات إمكانية انسداد تركيب دعامات موحدة لجدار الكييس تمدد الأوعية الدموية في الفئران--مع انخفاض معدلات الاعتلال والوفيات. يجمع هذا الإجراء الانصمام تركيب دعامات الفرصة لدراسة مفاهيم جديدة لتركيب دعامات أو مذيبات تدفق القائمة على الأجهزة، فضلا عن الجوانب الجزيئية للشفاء.
Introduction
نزيف تحت العنكبوتية نظراً تمزق الأوعية الدموية داخل الجمجمة يرتبط مع ارتفاع معدل الوفيات ونتائج العصبية الفقيرة في العديد من الباقين على قيد الحياة. لا يوجد حاليا نهجين عامين أوككلودي ألف: أما القطع ميكروسورجيكال (الذي يتطلب التعرض المنطوق تمدد الأوعية الدموية)، أو انسداد اللمفاوية. كما تبين أن تكون مرتبطة بالمرض أقل بشكل طفيف (خاصة في تداولها اللاحق1،2) اللمفاوية معاملة أقل الغازية لفائف IA العنق الضيقة، أصبحت خيارات العلاج اللمفاوية الطريقة المفضلة للعديد من مراكز الجراحة العصبية. تم تطوير العديد من الأجهزة من أجل تمديد البوادر التي تشير إلى معاملة اللمفاوية، والتغلب على القيد الرئيسي لتكرار IA بعد تصفية. الدعامات داخل الجمجمة خاصة واعدة للتغلب على هذه القيود، كما أنها بمثابة سقالة للأجسام القريبة من الأرض-اندوثيليزاتيون ولفائف منع فتق، فضلا عن حماية الشريان الأصل وتحسين إينترالومينال إينترانيوريسمال تجلط الدم الناجم عن الحد تدفق الدم. وهناك حاجة إلى دراسة رواية الدعامات داخل الجمجمة في نموذج حيوانية منخفضة تكلفة؛ المستويات العيانية والجزيئية على حد سواء.
أن الهدف من هذه الدراسة هو تصميم آمنة وسريعة، وتوحيد تقنية جراحية لتركيب دعامات التطبيق في نموذج المنشأة بالفعل الكييس تمدد الأوعية الدموية في الفئران3،،من45. في هذا المشروع، ونحن تقييم دور دعامات المغنيسيوم القابلة للتحلل.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
الذكور ويستار الفئران مع متوسط وزن ز 592 (±50 التنمية المستدامة)، ومتوسط عمر 20 أسبوعا داخل مرافق الحيوانات عند درجة حرارة الغرفة 22-24 درجة مئوية ودورة الضوء/الظلام اثنتي عشرة ساعة، مع حرية الوصول إلى ماء الصنبور واتباع نظام غذائي بيليه. الحيوانات تلقي الرعاية من البشر وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية. التجارب التي أقرتها اللجنة للحيوان رعاية "كانتون برن، سويسرا" (تكون 102/13). تابعنا دقة التوصيات "بحوث الحيوان": الإبلاغ عن التجارب في فيفو (سيصلون المبادئ التوجيهية).
1-مختبر المعدات، واللوازم الاستهلاكية، الأدوات الجراحية
- استخدام غرفة التشغيل الهادئة والعقيم والحفاظ على درجة حرارة 23 ± 3 درجة مئوية.
- استخدام طاولة العمليات جراحية مع سطح التي من السهل لتنظيف وتطهير، وتغطية ذلك مع ثني جراحة. استخدام مجهر جراحي أعلى الجدول مع كاميرا لتسجيل عملية جراحية، وعلى ضوء الأشعة تحت حمراء الحارة الحيوان قبل وبعد الجراحة.
- الحصول على اللوازم الاستهلاكية التالية لإنشاء جدار تمدد الأوعية الدموية وزرع في تركيب دعامات.
- الحصول على مسحات السليولوز وشاش معقم الأصغر والأكبر، والحقن بالإبر جوفاء ز 18 و 26 ز وابرة مقلوب صريحا لاستبدال الري/وحدة التخزين.
- الحصول على مواد خياطة الجروح بما في ذلك غير امتصاص 10-0 وخياطة الصغرى 9-0، 6-0 غير الامتصاص وخياطة 5-0 وخياطة الامتصاص 3-0.
- الحصول على حل متساوي التوتر كلوريد الصوديوم 0.9% لاستبدال الري/وحدة التخزين وضمان نظافة الأدوات أثناء الجراحة
- الحصول على الأدوات التالية زرع تركيب دعامات: ثقب الإبرة حقنه inflator لتوسيع بالون وغمد فوجاتي 4، ز 19 وسلك دليل مسعور.
- الحصول على اللوازم الاستهلاكية التالية لتمدد الأوعية الدموية في الجدار ديسيلولاريزيشن:
- الحصول على microtubes لتخزين الأوعية الدموية عند-24 درجة مئوية وتسميات لتحديد الهوية، فضلا عن شاكر مختبر لضمان العلاج الكيميائي الكامل لتمدد الأوعية الدموية.
- الحصول على 0.1% الصوديوم دوديسيل كبريتات (الحزب الديمقراطي الصربي) والفوسفات مخزنة المالحة (PBS) لعملية ديسيلولاريزيشن السليم.
- الحصول على أدوات الجراحة القياسية التالية:
- الحصول على الأدوات الجراحية خشونة: المقص الجراحي، ملقط الأنسجة اللينة، الناشرة الأنسجة اللينة، الملقط المستقيمة والمنحنية، ثلاثة البعوض المشابك، حامل الإبرة.
- الحصول على الأدوات الجراحية الصغرى: مقص الدقيقة المستقيمة والمنحنية والملقط الصغير المستقيمة والمنحنية وأربعة مقاطع مصغرة الأوعية الدموية المؤقتة مع قضيب تطبيق مقطع الأوعية الدموية المقابلة.
2-التخدير
- وضع الفئران في غرفة الغاز وتخدير بمزيج من إيسوفلوراني والأكسجين (4% إيسوفلوراني). الحفاظ على استنشاق حتى الحيوان يفقد وعيه.
- إزالة هذا الحيوان أنيسثيتيزيد من غرفة الغاز وحقن التخدير نهائي يتكون من خليط مقتبس من الوزن ميديتوميديني هيدروكلوريد (0.5 ملغ/كغ) والكيتامين هيدروكلوريد (50 مغ/كغ) إينترابيريتونيلي (عن طريق حقن في الحق أو البطن السفلي الأيسر).
- رصد عمق التخدير في فترات محددة أثناء الجراحة مع إصبع القدم-قرصه المؤذية لتأكيد أن الفئران لا يستجيب وتخديره تماما. إذا كان هناك ريدمينستير لا إرادي، تو-رشة التخدير بحقنه داخل الوزن تكيف الكيتامين وميديتوميديني. مطلوب التخدير كافية قبل فتح تجويف البطن، وتؤدي ملامسة نهاية إلى جانب وتركيب دعامات الإدراج.
- مكان الفئران تحت مصباح الأشعة تحت الحمراء تدفئة حتى يسري مفعول التخدير داخل، كما الاحترار قبل الجراحة فعال يتجنب تبريد واسعة النطاق أثناء الجراحة.
3-العمليات الجراحية إعداد وتحديد المواقع من الفئران
- وزن الفئران واستخراج اللسان لتأمين الخطوط الجوية العليا، وتطبيق مرهم العين لتجنب جفاف القرنية.
- استخدم شريط لاصق لإصلاح الفئران لمجلس صغير قابل لغسل، وتجنب ممارسة أي ضغط أو الجر للكفوف.
- يحلق الفئران في منطقة العمليات مع آلة حلاقة حيوانات صغيرة وتطهير المنطقة الجراحية.
- وضع علامات سميكة اثنين 2-3 سم عن بعضها تحت الجزء الخلفي الحيوان تسبب قدر قعس القطنية والقطني thoraco قدر الإمكان. وهذا ما يضمن المعرض أفضل من ريتروبيريتونيوم وتطبيق أسهل تركيب دعامات.
- تغطية الفئران مع ثني فتحه معقمة ووضعه تحت المجهر التشغيل. إعداد يدعم اثنين بجانب الحيوان لتيسير وضع مريح أكثر للأيدي المجرب.
- غسل وتطهير الأيدي ووضع قفازات معقمة. ومفيد يكون مساعدا الحالية خاصة بالنسبة لغرس دعامات.
- إجراء الجراحة تحت ظروف معقمة وفقا للتوصيات للحيوانات المختبرية6،7.
4-تمدد الأوعية الدموية في حصاد الفساد
- تحت التخدير العام، فتح البطن أدناه عملية الرهابه. أولاً، قطع الجلد في خط ميدفينترال مع مقص حاد وفصل الجلد عن العضلات. ثم قطع عضلات البطن وتحديد الحجاب الحاجز فوق الكبد عند نقطة الإدراج تجويف الصدر.
- قطع الحجاب الحاجز والنسيج الضام مع مقص حاد الوصول إلى تجويف الصدر والاضلاع مع خفض كبير المقص سنتيمتر ونصف إلى اليمين واليسار للقص.
- عند فتح القفص الصدري، التضحية بالفئران بجرعة intracardiac الكيتامين هيدروكلوريد (120 ملغ/كغ).
- تعبئة الرئة اليسرى وإصلاحه في الجانب الأيمن مع المساعدة من مسحه السليلوز.
- عقب التعرض المناسب من قوس الابهر، المشبك azygos وعروق كابل الجمجمة الأيسر مع اثنين من المشابك البعوض فوق الشريان الاورطي وقطع بينهما. ترك المشابك في نهايات قطع السفينة لتجنب نزيف وريدي إلى الوراء. استخدام المشابك لنقل قلب وعروق إلى الجانب، مما يتيح الوصول الأفضل إلى قوس الابهر والشريان الاورطي تنازلي.
- تشريح الشريان الاورطي باستخدام تقنية ميكروسورجيكال مع مايكرو-المقص والملقط الصغير.
- تتبع الشريان الاورطي صعودا من قسم تنازلي للقوس الاورطي وتحديد الشريان subclavian الأيسر والشريان ربية الأولى ترك الشريان الاورطي.
- مكان غير الامتصاص خياطة 6-0 فقط الجمجمة الشريان ربية الأولى وحتى التعادل. في نهاية الدانية، قطع الشريان الاورطي مباشرة بعد منشأ الشريان سوبكلافيان اليسرى. من المهم استخدام خط عمودي واحد قص كما أنه يقلل من فرصة حدوث مخالفات في طليعة الابتزاز والأوعية الدموية. وأخيراً، إزالة تمدد الأوعية الدموية التي تم إنشاؤها حديثا مع قطع فقط أدناه حرف مزدوج.
- فورا بعد قياس تمدد الأوعية الدموية، زرع الفساد في الفئران المستفيدة.
5-تمدد الأوعية الدموية في إنشاء وتركيب دعامات التطبيق
- النهج الجراحية
- بدء شق الجلد في الثلث القاصي من البطن مع مقص حاد وقطع في ميدفينترال موقف القاصي عملية الرهابه يصل إلى 1 سم. فصل بعناية بالجلد والنسيج تحت الجلد عن العضلات. استخدام مقص واحد لفتح عضلات البطن على طول ينيا ألبا. استخدام الملقط لرفع العضلات بينما قطع لتجنب إتلاف أجهزة إينترابدومينال.
- وعقب فتح البطن، نقل الأمعاء الصغيرة وفي الأعور والقولون إلى اليمين. استخدام ضام عقد ذاتيا للحفاظ على فتح تجويف البطن وإصلاح الأجهزة. ضع مسحه تحت الكبد إلى إزالته من منطقة العمليات الجراحية، وتعزيز التعرض خلف الصفاق.
ملاحظة: إذا كانت كتلة الدهون هو عرقلة الرأي، يمكن وضع خارج تجويف البطن ومغطاة بالشاش الرطب لتجنب نضوب السوائل واسعة النطاق. - إفراغ المثانة البولية تحقيق أقصى حد من التعرض للشريان الاورطي البطني إينفرارينال. يمكن أن يكون هذا التصريف إنجازه أما عن طريق ضغط لطيف على الجدار المثانة، أو الناصور باستخدام إبرة مجوفة ز 26.
- حماية المثانة والخصيتين من الجفاف والتلاعب واسعة النطاق أثناء الجراحة بتغطي لهم مع مسحه السليلوز عقيمة رطب.
- فتح الجدارية الصفاق الذي يغطي الشريان الاورطي مع الملقط حادة اثنين. العناية مع الحالب تقريبا شفافة وسفن الخصية وفي الشريان المساريقي العلوي. بمجرد فتح الصفاق الجدارية، سيقام الشريان الاورطي البطني فقط تحته. غالباً ما تغطي طبقة رقيقة من الأنسجة الدهنية.
- وتبدأ صراحة تشريح الشريان الاورطي البطني باستخدام الملقط الصغير اثنين للإفراج عنها من الدهون خلف الصفاق المحيطة بها حتى مرئياً طول أطول من السفينة. تواصل مع تشريح حاد باستخدام مقص الصغيرة والصغرى-الملقط. فقط أمسك الغلالة أثناء هذا الإجراء لتجنب إلحاق الضرر بجدار الوعاء.
- تسلخ الابهر البطني
ملاحظة: لتسهيل وصف الاستراتيجية الجراحية نحن قسمت الشريان الاورطي البطني إلى ثلاثة أجزاء متميزة (الشكل 1).- بدء التشريح في الجزء القاصي-التي من الناحية التقنية أكثر صعوبة.
ملاحظة: ينقسم الجزء القاصي بين حرقفي التشعب وحرقفي قطني الوريد والشريان. ويقدم هذا الجزء كنقطة للإدراج الثقب وتركيب دعامات الشريان الاورطي البطني القاصي.- تشريح الشريان الاورطي مع مايكرو-المقص والملقط الصغير من الأجوف ف قطع جنبا إلى جنب مع الطبقة أدفينتيتيال الشرياني بين السفينتين.
ملاحظة: قد تنشأ نادراً كسفن القطاعي من السطح الظهرية للشريان الاورطي البطني الشرايين القطنية الصغيرة وتتداخل مع الإجراء. تخثر الدم وقطع من السفن ضروري لتجنب ناز إلى الوراء خلال خياطة سفينة. - تحديد شريان حرقفي قطني الحق؛ يمكن أن تختلف إلى حد كبير في هذا الجزء من مصدره فيقع في معظم الأحيان والذيلية أكثر من نظيره اليمنى.
ملاحظة: هذا الشرط نادراً ما يتداخل مع موقع ثقب الإدراج المزمع تركيب دعامات في الشريان، ولكن قد يتطلب نقطة ثقب أبعد إزالتها أو-لتقلب التشريحية الأكثر تطرفاً-ربط سفينة من شريان حرقفي قطني الصحيح. - بعد إعداد الشريان الاورطي في هذا الجزء، ضع وسادة مطاطية ملونة صغيرة تحت السفينة تشير إلى حيث سيتم إجراء الثقب الشرياني. تجنب تمتد السفينة في هذا الجزء. تمتد الشد على جدار الوعاء الدموي قد يؤدي إلى تمزق السفينة غير المنضبط عقب الثقب الشرياني، التي بدورها سوف تعرقل إعادة الإعمار النهائية. ولذلك من المهم لإطلاق سراح من جميع الالتصاقات في موقع ثقب الشريان الاورطي وتجنب أي وضع مسحات شاش تحت الشريان الاورطي.
- تشريح الشريان الاورطي مع مايكرو-المقص والملقط الصغير من الأجوف ف قطع جنبا إلى جنب مع الطبقة أدفينتيتيال الشرياني بين السفينتين.
- تشريح الشريان الاورطي من الأجوف خامسا في الجزء الأوسط بنفس الطريقة كما هو موضح من قبل.
ملاحظة: ينقسم الجزء الأوسط بين حرقفي قطني الوريد والشريان والوريد الكلوي. يتم استخدام هذا الجزء لغرس تمدد الأوعية الدموية وتركيب دعامات لتحديد المواقع.- التعرف الشريان المساريقي العلوي في أصله من الشريان الاورطي البطني والحفاظ عليه من خلال جميع الإجراءات.
- سد أو يتجمد الشرايين من السطح الظهرية للشريان الاورطي في هذا الفرع، وكذلك. لتجنب إتلاف الضفيرة lumbosacral، ضمان بيغ كافية وأن تضع في اعتبارها الوقت التخثر قصيرة.
- إنشاء الموقع لتركيب دعامات عقب تسلخ الابهر في هذا الجزء. توقع التدخلات الممكنة لتركيب دعامات سفن البطن قبل تحديد الموقع النهائي للأوعية الدموية، وتركيب دعامات.
- بعد إنشاء موقع تمدد الأوعية الدموية، وتركيب دعامات، ضع قطعة صغيرة من الشاش ووسادة مطاطية ملونة تحت الشريان الاورطي للتعرض أفضل.
- وأخيراً، تشريح الجزء الدانية للشريان الاورطي البطني. وهذا أبسط تقنيا من نفس الإجراء في الجزء الأعلى والأوسط.
ملاحظة: يقع الجزء الدانية الدانية إلى الوريد الكلوي. يتم استخدامه لتطبيق القصاصة المؤقتة الأكثر الدانية خلال غرس دعامات تقنية Seldinger.- بعد فتح الغشاء البريتوني الجدارية، فصل هذه السفن مع الملقط حادة اثنين.
- عقب الطواف الظهرية الابهر مع الملقط المنحنية، كليلة، ضع قطعة صغيرة من وسادة مطاطية ملونة تحته لتيسير التطبيق في وقت لاحق الدانية القصاصة.
- بدء التشريح في الجزء القاصي-التي من الناحية التقنية أكثر صعوبة.
- إنشاء تمدد الأوعية الدموية
- المشبك الشريان الاورطي في الجزء الأوسط بأول تطبيق المشبك القاصي، تليها الدانية لضمان ملء راسخ للسفينة وييسر أرتيريوتومي اللاحقة.
- إزالة الغلالة في موقع ملامسة المخططة. فهم الغلالة مع الملقط الصغير وقطع بعناية مع المقص الصغير دون إصابة جدار الوعاء.
- رفع قطعة صغيرة من جدار الوعاء مع الملقط الصغير وتنفيذ شق خطية مع المقص الصغير. وينبغي أرتيريوتومي بنفس حجم قاعدة الأوعية الدموية.
- تدفق الشريان في كلا الاتجاهين مع المحلول الملحي بإبرة مقلوب غير حادة.
- مكان غرز الأولين من ملامسة نهاية إلى الجانب، التي تتم مع خياطة غير امتصاص 9-0، في نهاية أرتيريوتومي القريبة والبعيدة. فهم جدار الوعاء أقل قدر ممكن أثناء خياطة وضمان أن خياطة الجروح تمر عبر كل طبقة من جدار الوعاء. وينبغي إلا قبض الجزء البطني من الشريان الاورطي لتجنب انقباض الشريان؛ مما قد يؤدي إلى تمزق السفينة أثناء تطبيق تركيب دعامات.
- إغلاق الشق مع توقف خياطة الجروح. نبدأ الخياطة على الجانب الأيسر وإنهاء هذا قبل المتابعة إلى الجانب الآخر. عند الانتهاء من الجدار الخلفي، والتحقق من المقطع اندولومينال من ملامسة خيوط توضع خاطئ.
ملاحظة: عند هذه النقطة، المداواة داخل التوسعات المختلفة مثل تطبيق اللولب يمكن إدخال. - بعد الانتهاء ملامسة، إزالة المشبك القاصي أولاً. المكان خياطة إضافي في حالة النزيف الرئيسية من الدفق. إدارة ناز طفيفة بالضغط بلطف على قطعة صغيرة من الشاش لمصدر النزيف. الأنسجة الدهنية أو طبقة أدفينتيتيال التي تم الحصول عليها سابقا يمكن أن تكون مفيدة أيضا. الآن قم بإزالة المشبك الدانية.
- شطف الموقع ملامسة وقص نهايات المتبقية من حرف مزدوج في قبة تمدد الأوعية الدموية.
- مراقبة سالكيه الشريان الاورطي البطني القاصي مع اختبار الحلب مباشرة.
- إزالة مسحه شاش صغيرة تحت الوسادة المطاطية الملونة، كما ينبغي أن تكون جميع قطاعات الشريان الاورطي تقريبا في نفس الارتفاع قبل تركيب دعامات الإدراج. تجنب تغطية خطوط خياطة ملامسة مع الأنسجة الدهنية كما يجب أن تكون الدعامات تركيب دعامات مرئية أثناء وضع دعامات تحت تمدد الأوعية الدموية التي تم إنشاؤها حديثا.
- لتجنب الأضرار الناجمة عن الاسكيمية المطول، السماح لمدة 10 دقائق لضخه قبل المتابعة مع لقط الابهر الدانية وتركيب دعامات الإدراج.
- إفراغ المثانة قبل غرس في تركيب دعامات.
- تركيب دعامات زرع
ملاحظة: من المفيد أن يكون مساعدا في متناول اليد للخطوات التالية، لا سيما بالنسبة إلى التضخم النهائي تركيب دعامات.- مقطع الموقع ثقب الشريان في الجزء الأعلى أولاً. تبدأ مع المشبك القاصي واتبع مع الدانية. إزالة النسيج الضام فضفاضة والغلالة في موقع الثقب مع مايكرو-مقص (جزئيا).
- ضع المشبك مؤقتة كبيرة في الجزء الأقرب لتجنب نزيف الرئيسية خلال الثقب الشرياني.
- إجراء الثقب الشرياني في الجزء القاصي بإبرة ثقب 18 جرام. رفع قطعة صغيرة من الجدار السفينة مع الملقط الصغير تيسير الثقب والحد من مخاطر ثقب جدران الابهر السفينة على حد سواء.
- تدفق الشريان تماما بعد الثقب مع المياه المالحة في كلا الاتجاهين باستخدام إبرة مقلوب كليلة.
- إدراج سلك دليل مسعور في موقع الثقب وإزالة المشبك الدانية في الجزء القاصي.
- دفع السلك الدليل إلى الأمام حتى مستوى المشبك في الجزء الدانية. إدراج المقدم تفلون وفقا لتقنية Seldinger استخدام سلك دليل تم إدراجه مسبقاً.
ملاحظة: دليل مسعور الأسلاك أكثر مناسبة من ماء منها كما أنها قبضة متفوقة، وتوفير أفضل التحكم اليدوي. كما المعرّفين تفلون أسهل لإدراج من المعرّفين البوليبروبيلين، أنها تقلل من خطر تمزق غير المنضبط في موقع الثقب. - دفع ديلاتور الدانية صعودا فقط إلى موقع ملامسة، الغمد يقع حوالي نصف سنتيمتر أدناه.
- إزالة الأسلاك دليل وديلاتور، والتأكد من إيقاف تشغيل محبس الحنفية 3-طريقة لتجنب الخسائر غير الضرورية في الدم.
- بعد كنس النظام بالون، إدراج تركيب دعامات امتصاص المغنيسيوم استخدام المقدم فوغارتي 4. تضخيم البالون مع شريط واحد من الضغط قبل إزالة الجهاز المقدم لحماية البطانة السفينة المنهارة من الأضرار التي يسببها تبختر والحد من خطر تبختر التورط في إينترانيوريسمال سابقا مزروع مادة (الشكل 2).
- عندما يكون تركيب دعامات في موقفها النهائي، بعناية تضخيم البالون مع شريط 8-9. تحقق باستمرار خيوط نهاية إلى جانب ملامسة لتمزيق الممكنة.
- وبعد تمدد تركيب دعامات كافية والالتصاق بالجدار الابهري السفينة، تنكمش وإزالة البالون.
- عند إزالة في المقدم، قد قصاصة مؤقتة في متناول اليد للتطبيق الفوري الدانية إلى موقع ثقب ناز تراجعية من الدانية الشرايين البراءات قد تكون كبيرة.
- إزالة المشبك مؤقتة في الجزء الدانية بعد وضع القصاصة الدانية في الجزء القاصي. مراقبة ملامسة نهاية إلى جانب أي زيادة في ضغط الدم داخل الابهر بسبب القطع البعيدة قد يسبب نزيف في موقع خياطة الجروح.
- مسح الموقع ثقب مع المياه المالحة من إبرة مقلوب كليلة في كلا الاتجاهين. ثم خياطة مع أسلوب توقف استخدام مؤشر ترابط غير امتصاص 10-0. إذا كان ذلك ممكناً، تجنب استيعاب الجدار السفينة مع مايكرو--الملقط والتأكد من أن كل خياطة يمر عبر جميع طبقات جدار الوعاء. خياطة في السفينة قصوى ثقب الموقع لتجنب تضيق السفينة.
- إضافة خيوط إضافية إذا كان النزف الرئيسية يحدث نتيجة للدفق. في حالة ناز طفيفة، تأمين الأرقاء من خلال ضغط لطيف على الموقع النزيف باستخدام مسحه شاش أو قطعة محفوظة مسبقاً من الغلالة. يمكن أن تكون قطعة صغيرة من الأنسجة الدهنية مفيدة كذلك.
- قم بإزالة لوحة المطاط الملونة في أسفل الموقع ثقب. نبض الابهر ستكون مرئية بوضوح الدانية والبعيدة إلى موقع ملامسة. التحقق من وجود سالكيه الشريان القاصي مع اختبار الحلب مباشرة.
6-إغلاق
- إزالة جميع شاش مسحات ومسح تجويف البطن مع المالحة إيستون لمسح أي الحطام وتشجيع استبدال وحدة التخزين بلطف.
- إزالة الناشرة الأنسجة اللينة والعودة في الأمعاء الصغيرة والاعور وكتلة الدهون إلى موقفهم التشريحية الصحيحة.
- استخدام خياطة غير امتصاص 5-0 للانضمام إلى عضلات البطن. للحد من جر الجلد، ضع بعض خيوط تحت الجلد باستخدام خياطة الامتصاص 3-0. استخدام نفس خياطة 3-0 لإغلاق الجلد.
- وبعد الإغلاق، تطهير الجلد ووضع الحيوان تحت ضوء الأشعة تحت الحمراء لتزويده بالدفء.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
وكان متوسط مدة الجراحة 167 دقيقة (± 22)، 26 دقيقة (± 6) التي تلزم لإنشاء الأوعية الدموية و 23 أخرى (± 7) الحد الأدنى المطلوب لتركيب دعامات التطبيق وإعادة إعمار أرتيريوتومي (الشكل 3).
وكانت الوفيات والاعتلال، وتجلط العيانية في تركيب دعامات نقاط النهاية الأساسي من هذه الدراسة. فترات المتابعة العادية 7 أيام (n = 28)، و 21 يوما (n = 32) على التوالي. الوفيات أو المراضة حافل يؤدي إلى إنهاء مبكر للدراسة. لا توجد أي حالة وفاة أثناء الجراحة. توفي الحيوانات الأربعة (6 في المائة) ضمن البروتوكول الاختياري بعد أول ثلاثة أيام بسبب تجلط الدم في تركيب دعامات المبكر. خمسة الفئران (7.5 ٪) شهدت مضاعفات ما بعد الجراحة مع اثنين الناجم عن تجلط الدم في تركيب دعامات المبكر، مما أدى إلى شلل الخلفيتين. وقد euthanized هذه الحيوانات بسبب عجز الموازنة عصبية شديدة. التأخر في تركيب دعامات تجلط في حالتين أخريين، كان ينظر في يوم 21، بعد انتهاء التجربة. وقد أظهرت هذه الحيوانات لا عجز عصبي ما يصل إلى تلك النقطة. عانت dehiscence الجرح جميع طبقات جدار البطن في اليوم بعد العملية الجراحية الثانية مع خسائر متتالية في حجم فأر واحد وكان euthanized وكنتيجة لذلك. وكان معدل الوفيات والمراضة 13.4 ٪ (الشكل 4 و الشكل 5).
الشكل 1 : شكل توضيحي لثلاثة أجزاء متميزة من الشريان الاورطي البطني.
يتم تلوين الوريد الأجوف والتصرف فيها الأزرق، بينما الشريان الاورطي البطني والتصرف بها هي اللون الأحمر. * يمثل الجزء القاصي، الذي يتم إدراج الثقب وتركيب دعامات الشريان الاورطي البطني. * * يمثل الجزء الأوسط، الذي تحدث فيه بغرس تمدد الأوعية الدموية وتركيب دعامات النهائي لتحديد المواقع. ويمثل الجزء الدانية، التي تستخدم لتطبيق القصاصة المؤقتة الأكثر الدانية خلال غرس دعامات. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2 : تركيب دعامات المغنيسيوم مضخمة في 1 بار الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3 : الخصائص الجراحية.
كل نقطة تمثل واحدة من الحيوان؛ يعني القيم (خط طويل)؛ والانحراف المعياري الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4 : مخطط التدفق.
عدد الحيوانات التي استخدمت في الدراسة؛ معدلات الوفيات والاعتلال الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 5 : تعامل العيانية والمجهرية (10 x التكبير) نظرة عامة على تركيب دعامات مغ نهاية إلى جانب مزروع تمدد الأوعية الدموية عقب الحصاد الأنسجة في أيام 21-
ج: في الصورة على اليسار يظهر الشريان الاورطي البطني براءات الاختراع. يظهر الصورة على اليمين الشريان الاورطي فتحت طوليا مع نيوينتيما رقيقة تغطي تركيب دعامات و ostium أحد الأوعية الدموية خلف تركيب دعامات. باء: في الصورة على اليسار يظهر تجلط الدم في تركيب دعامات للشريان الاورطي البطني. يظهر الصورة على اليمين الشريان الاورطي فتحت طوليا مع خثرة تغطية التجويف السفينة. كان سببها الدعامات تركيب دعامات تحولت خثرة. C: نظرة عامة على مجهرية (الهيماتوكسيلين ويوزين وصمة عار) تمدد الأوعية الدموية هو موضح في أ الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
نماذج الدعامات والحيوان بيوابسوربابل
في السنوات الأخيرة كان الاتجاه العام في الطب بعيداً عن يزرع الدائمة (التي لا تزال في جسم المريض لبقية حياتهم) للمواد البيولوجية-قابلة للامتصاص. الفعل تماما إنشاء الدعامات المغنيزيوم، على وجه الخصوص، في القلب8،9. للأسف هذه الدعامات لم تختبر بعد لتطبيقات أخرى، مثل الأمراض القلبية الوعائية. لهذا السبب قررنا دراسة قابليتها للاستخدام دعامات بيوابسوربابل في علاج تمدد الأوعية الدموية في الكييس. وأجرى الدراسة مع الفئران أنها-مثل تجربة صغيرة أخرى الحيوانات-مناسبة نظراً لانخفاض الشراء المرتبطة بها ونفقات المعيشة. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدامها في مختلف مجالات البحث بفضل إمكانية التعديل الوراثي10. منخفضة التكاليف، وسهولة التعامل، والعمليات الجراحية نسبيا سريعة تتيح الدراسات التي يمكن القيام بها مع عدد كبير من الحيوانات. من أجل تقييم الأجهزة داخل الأوعية الجديدة، من الأهمية بمكان استخدام نموذج موحد تمدد الأوعية الدموية مما يسمح لظروف interindividual المستمر؛ لا سيما فيما يتعلق بتدفق الدم وإجهاد القص الجدار، تورتوسيتي سفينة، تمدد الأوعية الدموية في موقع وحجم تمدد الأوعية الدموية. يوفر النموذج تمدد الأوعية الدموية في جدار الفئران ووصف كل من هذه المزايا. وعلاوة على ذلك يسمح النموذج اختبار النهج اللمفاوية الرواية في ظروف مختلفة من الجدار. ويعرض نموذج الحيوان ممكن أصغر التي يمكن تحليل المفاهيم البيولوجية لالتئام الأوعية الدموية والتطبيقات العلاجية-مثل الدعامات. بفضل أبعادها، فإنه يسمح الأجهزة المماثلة في الحجم لفحصها فيما بعد للاستخدام السريري في البشر. يرجى الرجوع إلى الأعمال المنشورة سابقا لوصف تفصيلي لمزايا وعيوب، والاختلافات البيولوجية نماذج الأوعية الدموية خارج القحف السريرية في مختلف الأنواع4،11.
معدلات الاعتلال والوفيات
وقد أظهرت الدراسات السابقة المعدلات المرتفعة لوفيات في غرس دعامات البطن. تختلف القيم من 5.7-57%12،13،،من1415. وتوفي معظم الحيوانات تجلط الدم بعد إصابة البطانية أثناء تركيب دعامات زرع16. على الرغم من أن معدل الوفيات في دراستنا كان منخفضا، تظل الجلطة المرتبطة بتركيب دعامات سببا هاما لمضاعفات ما بعد الجراحة والوفيات (7.5% أوائل في تركيب دعامات تجلط الدم، 3% التأخر في تركيب دعامات تجلط الدم). نحن افترض أن جهة الاتصال انخفاض بين دعامات والسفينة أحد أسباب هامة لمعدل وفيات منخفض 6% (5 من أصل 67 الحيوانات) في دراستنا. تم تخفيض الاتصال فضل تقنية Seldinger وتضخم البالون إلى 1 بار قبل إزالة المقدم؛ كالبالون ويغطي حافة حادة من دعامات المغنيسيوم. من خلال توسيع لطيف، المستمر لموقع الثقب بالأسلاك دليل، ديلاتاتور، وغمد، الموقع ثقب يمكن الاحتفاظ الصغيرة، الذي بدوره يسهل إعادة بناء جدار الوعاء ويقلل من خطر انقباض الشريان علاجية المنشأ. يجب وزن الفئران مالا يقل عن 500 غرام لإدراج تقنية Seldinger إشكالية من المقدم 4F. العلاج الصفيحات قد ثبت للحد من تجلط الدم في تركيب دعامات بغض النظر عن البطانية ميكانيكي الضرر الناجم عن تركيب دعامات التنسيب12،17،،من1819. وعلاوة على ذلك، تقلل أجهزة تركيب دعامات أرق-تبختر تضيق السفينة بعد تركيب دعامات العلاج20. برج الدلو وآخرون. 12 معاملة جدار تمدد الأوعية الدموية مع الموجهات التدفق في الفئران باستخدام تقنية منطوق مماثلة لتلك المذكورة أعلاه. وأفادوا لا تجلط الدم في تركيب دعامات في سلسلة. والفرق الرئيسي لهذه الدراسة أنها تستخدم العلاج المزدوج الصفيحات وأرق أجهزة تركيب دعامات تبختر مقارنة بالدعامات المغنيسيوم لدينا. كما تهدف دراستنا لاستكشاف بيولوجيا الأوعية الدموية الشفاء بعد تطبيق تركيب دعامات، قررنا إجراء التجارب دون المخدرات حتى لا يؤدي إلى التأثير على حالة تخثر الدم و proinflammatory إينترانيوريسمال الطبيعية. ولذلك فإننا قبلنا ارتفاع خطر تجلط الدم.
وضع دعامات ترانساورتيك
يمكن أن تتعارض مع تركيب دعامات الإدراج عن طريق الشريان السباتي13،15،،من2122 التي تضحي السفينة، تعمير الأولية لموقع الثقب (والحفاظ على السفينة) يتحقق عن طريق إدراج دعامات من خلال سفينة كبيرة مثل الشريان الاورطي البطني أو شريان حرقفي14. ميزة أخرى من الدعامات ترانساورتيك هو أنه يتيح رصد البصرية المباشرة اللازمة لتركيب دعامات دقيقة التنسيب ويمنع الضرر إلى مغذيات البطن ذات الصلة. دون مراقبة بصرية، يحدث التنسيب كاذبة في مدة تصل إلى 12 في المائة من الحالات21. وعلاوة على ذلك، يمكن ملاحظة حجم البالون والشريان لتجنب أوفيريكسبانسيون لجدار الوعاء. يسمح تطبيق إنشاء وتركيب دعامات تمدد الأوعية الدموية في البطن تمدد الأوعية الدموية تنمو دون عائق، الذي يعتبر بريفايلينجلي في الأوعية الدموية مع الجدران ديسيلولاريزيد5. والعيب الوحيد لهذا الموقف التشريحية هو التفاعل الخلوية والجزيئية الممكنة بين الجهاز الهضمي وتمدد الأوعية الدموية.
لا يوجد حاليا لا الأخرى متعدية الجنسيات، خارج القحف النماذج الحيوانية التي تعكس تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة البشرية في الفضاء تحت العنكبوتية.
الاختلافات من المنطوق
ووصف الدلو et al.12 طريقة لعلاج تمدد الأوعية الدموية في جدار في نموذج الفئران باستخدام الموجهات التدفق. بينما كان الوقت اللازم لتركيب دعامات الإدراج مماثلة لسلسلة لدينا (24.5±6.4 مقابل 26±6 دقيقة)، كان لديهم مجموعة أقصر التشغيل (126±23.0 مقابل 167±22 دقيقة) ووقت ملامسة (16.3±6.4 مقابل 23±7 دقيقة). ويمكن تفسير الوقت جراحة أطول في السلسلة تسلخ الابهر البطني موسعة أكثر. كما أدرجنا في تركيب دعامات مع البالون قبل الموسعة لتجنب الإصابة إينتيمال، فقد اضطررنا لوضع القصاصة الدانية متفوقة على شريان كلوي. تطبيق القاصي أكثر من مقطع الدانية السفينة يمكن أن تؤدي إلى عائق المبكر بالون، ويحتمل أن يعني أن ostium الأوعية الدموية لا تغطيها تركيب دعامات. وكان الوقت الدماغية منشقة (40 مقابل 23 دقيقة) في هذا البروتوكول إلى خفض خطر الإصابة بضرر التاكسج. كانت ريوكسيجيناتيد الأجهزة خلال مرحلة ضخه من 10 دقيقة على الأقل. مرة واحدة منذ فترة طويلة الدماغية واحد إلى تقصير مدة عملية جراحية ولكن قد تزيد من خطر الفشل العضوي متعدد بعد العملية الجراحية-الذي لم يحدث في أي حالة من الحالات المعروضة. بعد فترة تعلم ضرورية، ينبغي أن تكون الإجراءات المعروضة يمكن التحكم فيها حتى بالنسبة للجراحين دون تدريب مسبق ميكروسورجيكال.
الاستنتاج
وفي الختام، ثبت هذا الأسلوب تطبيق تركيب دعامات في نموذج الفئران البطني الجدار الجانبي المناسب، مع درجة عالية من التوحيد، انخفاض معدل الاعتلال والوفيات وانخفاض تكاليف. هذه الخصائص تجعل النموذج مناسب للدراسة في المستقبل للمواد المعدة الانصمام ساعد تركيب دعامات الأوعية الدموية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وأيد هذا العمل أموال البحث من مجلس البحوث، اراو Kantonsspital اراو، سويسرا. الدعامات المغنيسيوم القابلة للتحلل الحيوي التي تم توفيرها قبل بيوترونيك AG، مركز "التدخل والأوعية الدموية"، وبالاك، سويسرا. الكتاب هي وحدها المسؤولة عن تصميم وإجراء الدراسة المقدمة وتعلن لا تضارب المصالح.
Acknowledgments
ونحن نشكر يوجين هوفمان وزومستين فلين لمساعداتها التقنية الممتازة وتقاسم خبراتهم في تركيب دعامات تطبيق إجراءات. ونشكر كالانديري مايلندا للرسم التشريحية.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Medetomidine | any generic | ||
| Ketamin | any generic | ||
| Buprenorphine | any generic | ||
| Phosphate buffered saline | |||
| Sodium dodecyl sulfate (0.1%) | |||
| 3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP428G | |
| 5-0 non absorbable suture | Ethicon Inc., USA | 8618G | |
| 6-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
| 9-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
| 10-0 non-absorbable suture | Covidien, USA | N2530 Monosof | |
| Operation microscope | Zeiss, Germany | ||
| Digital microscope camera | Sony, Japan | HXR-MC1P | |
| Standard surgical instruments | multiple | see protocol 7.a | |
| Microsurgical instruments | multiple | see protocol 7.b | |
| Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
| Temporary vascular clamps | B. Braun, Germany | ||
| 19G Puncture needle | Angiomed GmbH, Germany | 15820010 | |
| Hydrophobic guide wire | Cook Medical, USA | G00650 | |
| 4F sheat | Cordis Corporation, USA | 504-604A | |
| Inflation syringe | |||
| Laboratory shaker | Stuart | SRT6 | |
| Magnesium Stent 2.5/6 AMS with Polymer coating | Biotronik, Switzerland | ||
| Surgery drape | |||
| Sterile cellulose swabs | |||
| Syringes 1 ml and 2 ml | |||
| Hollow needles 18G and 26G | |||
| Isotonic sodium chloride | |||
| Microtubes | |||
| Eye ointment | Bausch + Lomb Inc, USA | Lacrinorm | any generic |
| Small animal shaver |
References
- Molyneux, A., et al. International Subarachnoid Aneurysm Trial (ISAT) of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143 patients with ruptured intracranial aneurysms: a randomised trial. Lancet. 360 (9342), 1267-1274 (2002).
- Molyneux, A. J., et al. International subarachnoid aneurysm trial (ISAT) of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143 patients with ruptured intracranial aneurysms: a randomised comparison of effects on survival, dependency, seizures, rebleeding, subgroups, and aneurysm occlusion. Lancet. 366 (9488), 809-817 (2005).
- Marbacher, S., et al. Intraluminal cell transplantation prevents growth and rupture in a model of rupture-prone saccular aneurysms. Stroke. 45 (12), 3684-3690 (2014).
- Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemela, M., Frosen, J. The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model. J Vis Exp. (92), e51071 (2014).
- Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45 (1), 248-254 (2014).
- Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new surgeon. J Vis Exp. (47), (2011).
- Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J Invest Surg. 22 (6), 445-451 (2009).
- Flege, C., et al. Development and characterization of a coronary polylactic acid stent prototype generated by selective laser melting. J Mater Sci Mater Med. 24 (1), 241-255 (2013).
- Zartner, P., Cesnjevar, R., Singer, H., Weyand, M. First successful implantation of a biodegradable metal stent into the left pulmonary artery of a preterm baby. Catheter Cardiovasc Interv. 66 (4), 590-594 (2005).
- Hakamata, Y., et al. Green fluorescent protein-transgenic rat: a tool for organ transplantation research. Biochem Biophys Res Commun. 286 (4), 779-785 (2001).
- Bouzeghrane, F., Naggara, O., Kallmes, D. F., Berenstein, A., Raymond, J. International Consortium of Neuroendovascular C. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31 (3), 418-423 (2010).
- Aquarius, R., Smits, D., Gounis, M. J., Leenders, W. P., De Vries, J. Flow diverter implantation in a rat model of sidewall aneurysm: a feasibility study. J Neurointerv Surg. , (2017).
- Indolfi, C., et al. A new rat model of small vessel stenting. Basic Res Cardiol. 95 (3), 179-185 (2000).
- Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. J Surg Res. 166 (1), e91-e95 (2011).
- Kwon, J. S., et al. Comparison of bare metal stent and paclitaxel-eluting stent using a novel rat aorta stent model. J Vet Sci. 12 (2), 143-149 (2011).
- Rouer, M., Meilhac, O., Delbosc, S., et al. A new murine model of endovascular aortic aneurysm repair. J Vis Exp. (77), e50740 (2013).
- Hardhammar, P. A., et al. Reduction in thrombotic events with heparin-coated Palmaz-Schatz stents in normal porcine coronary arteries. Circulation. 93 (3), 423-430 (1996).
- Guerrero, A., et al. Antioxidant effects of a single dose of acetylsalicylic acid and salicylic acid in rat brain slices subjected to oxygen-glucose deprivation in relation with its antiplatelet effect. Neurosci Lett. 358 (3), 153-156 (2004).
- Niitsu, Y., et al. Repeat oral dosing of prasugrel, a novel P2Y12 receptor inhibitor, results in cumulative and potent antiplatelet and antithrombotic activity in several animal species. Eur J Pharmacol. 579 (1-3), 276-282 (2008).
- Kastrati, A., et al. Intracoronary stenting and angiographic results: strut thickness effect on restenosis outcome (ISAR-STEREO) trial. Circulation. 103 (23), 2816-2821 (2001).
- Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91 (3), 393-395 (2005).
- Finn, A. V., et al. A novel rat model of carotid artery stenting for the understanding of restenosis in metabolic diseases. J Vasc Res. 39 (5), 414-425 (2002).
