Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Neuroscience
Click here for the English version

Neuroscience

Induksjon og vurdering av Levodopa-indusert dyskinesi i en rottemodell av Parkinsons sykdom

Published: October 14, 2021 doi: 10.3791/62970
Automatic Translation
1, 1, 1,2
1Department of Translational Neuroscience, College of Human Medicine, Michigan State University, 2Hauenstein Neuroscience Center, Mercy Health Saint Mary's

Summary

Denne artikkelen beskriver metoder for å indusere og evaluere levodopaindusert dyskinesi i en rottemodell av Parkinsons sykdom. Protokollen gir detaljert informasjon om intensiteten og frekvensen av en rekke dyskinetiske atferd, både dystoniske og hyperkinetiske, og gir et pålitelig verktøy for å teste behandlinger rettet mot dette udekkede medisinske behovet.

Abstract

Levodopa (L-DOPA) forblir gullstandardbehandlingen som brukes til å behandle Parkinsons sykdom (PD) motoriske symptomer. Imidlertid utvikler uønskede ufrivillige bevegelser kjent som L-DOPA-indusert dyskinesi (LIDs) med langvarig bruk av denne dopaminforløperen. Det er anslått at forekomsten av LIDer eskalerer til ca. 90% av personer med PD innen 10-15 års behandling. Å forstå mekanismene i denne sykdommen og utvikle både nye og effektive anti-dyskinesi behandlinger krever konsistent og nøyaktig modellering for pre-klinisk testing av terapeutiske intervensjoner. En detaljert metode for pålitelig induksjon og omfattende vurdering av LIDer etter 6-OHDA-indusert niggerlesjon i en rottemodell av PD presenteres her. Pålitelig LID-vurdering hos rotter gir et kraftig verktøy som lett kan brukes på tvers av laboratorier for å teste nye terapier fokusert på å redusere eller eliminere denne vanlige behandlingsinduserte byrden for personer med PD.

Introduction

Selv om det er mer enn 50 år siden levodopa (L-DOPA) først ble introdusert som en behandling for personer med PD 1,2, er det bemerkelsesverdig fortsatt den mest effektive terapien for parkinsonske motorsymptomer. De kliniske motoriske symptomene forbundet med PD stammer fra tap av dopamin (DA) nevroner i substantia nigra (SN) pars compacta, noe som resulterer i den dramatiske nedgangen i tilgjengelig dopamin i striatum. L-DOPA gjenoppretter effektivt striatal DA nivåer, noe som resulterer i motorisk fordel tidlig i sykdommen 3,4. Inopportunely, med langvarig behandling, vil de fleste individer med PD utvikle L-DOPA indusert dyskinesi (LID), inkludert chorea, dystoni og ateose, som ofte betydelig påvirker aktivitetene i dagliglivet 5,6,7.

Mens flere atferdsmodeller av LID hos gnagere eksisterer, har forskjeller i modellering og atferdsvurdering av LIDer stilt spørsmålstegn ved reproduserbarheten av resultater mellom laboratorier, samt påliteligheten til disse eksperimentelle verktøyene for preklinisk PD-forskning. Utviklet i samarbeid med en klinisk bevegelsesforstyrrelse spesialist8, er den nåværende protokollen en enkel metode for LID induksjon og vurdering og er egnet for bruk i en rottemodell av PD ved hjelp av 6-hydroksydopamin (6-OHDA)-indusert ensidig nigral lesjon 9,10. LID-vurderingsskalaen som er gitt her inkluderer scoring for både intensiteten og frekvensen av dyskinetisk oppførsel i ulike individuelle kroppsdeler. Relevant informasjon om arbeidsflytoptimalisering av eksperimenter og riktig pleie og håndtering av parkinson- og dyskinetiske dyr er også gitt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Dyrene som presenteres her ble vedlikeholdt og håndtert i samsvar med institusjonelle retningslinjer. Alle dyreprosedyrer ble godkjent av Michigan State University Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) i samsvar med føderale og statlige forskrifter.

1. Legemiddelfri bekreftelse på 6-OHDA lesjonsstatus

  1. Postural Hale henge test 11,12,13
    MERK: Vurder lesjonsstatus minst 1 uke etter 6 OHDA lesjonsinduksjon (Se 9,10,35 for detaljer om lesjon) hos eksperimentelle personer (f.eks. mannlige eller kvinnelige, voksne Sprague Dawley eller Fisher 344 rotter).
    1. Suspender rotten ca 6 cm over buret, hold fast ved foten av halen, i ~ 5 s.
    2. Registrer retningen av kroppskontrasjon som + for et vellykket lesjonert dyr som vrir seg kontralateralt til den lesjonerte siden og - for mangel på vridning eller vridning i begge retninger.
    3. MERK: Disse testene er valgfrie, men anbefales. Se 14,15,16,17 for ytterligere alternativer for narkotikafri testing/variasjoner.
  2. Trinnjustering drag test (tilpasset fra16)
    MERK: Vurder lesjonsstatus minst 1 uke etter ensidig 6-OHDA lesjonsinduksjon hos eksperimentelle forsøkspersoner (f.eks. mannlige eller kvinnelige, voksne Sprague Dawley- eller Fisher 344-rotter).
    1. Hold rotten ved foten av halen, løft bakføttene av overflaten med ~ 6 cm; dra bakover over en flat, glatt, men ikke glatt overflate, ~ 75 cm, over 5-10 s.
    2. Vær oppmerksom på og registrer antall tappe-/trinnjusteringsbevegelser for hver forpasning over tre gjentatte tester.
    3. Skår motivet som + for vellykket ensidig lesjon når 0-2 forepaw kraner observeres kontralateralt til den leionede siden, sammen med rask tapping (~ 10 kraner) fra forepaw ipsilateral til leioned side (f.eks. dyr ensidig leioned på venstre side viser tappeunderskudd (0-2 kraner) med kontralateral høyre forepaw).
    4. På den annen side, score moderat til rask tapping (5-10 trykk) fra begge forpaws som - for å indikere ufullstendig eller ukjent lesjon status.
      MERK: Et engstelig dyr kan vise rask tapping / trinnjustering selv om det er vellykket lesjonert. Hvis dette mistenkes, plasser rotten tilbake i hjemmeburet og test ≥30 minutter senere.

2. Tilberedning av reagenser og forsyninger

  1. Bestem L-3,4-dihydroksyfenylalaninmetylesterhydroklorid (levodopa eller L-DOPA) og benserazidhydroklorid, en perifer dekarboksylasehemmer (se Materialfortegnelse) dose, vurderingsfrekvens og eksperimentell tidslinje som passer for undersøkelsesspørsmålet 12,18,19,20 (figur 1).
    MERK: Undersøkelsesspørsmål kan stilles for å søke et hvilket som helst antall spørsmål som spenner fra å spørre om en bestemt terapi kan redusere eksisterende LID eller forhindre induksjon av LID. De kan også undersøke om terapeutisk effekt er avhengig av dosen av levodopa eller om LID-uttrykk og / eller terapeutisk effekt varierer avhengig av kjønn, art og alder av emnet.

Figure 1
Figur 1: Eksempel på tidslinjen for behandling. Eksempel L-DOPA dose-eskalering tidslinje på 12 uker i total lengde, med 8 uker med L-DOPA injeksjoner begynner 3 uker etter 6-OHDA lesjon og 4 uker etter eksperimentell behandling. I dette eksemplet injiseres L-DOPA subkutant 5x per uke (mandag-fredag) til omtrent samme tid hver dag, i 2 uker ved hver foreskrevne L-DOPA-dose (3, 6, 9 og 12 mg/kg). Behavioral LID-vurderinger finner sted på dag 1, 6 og 10 av hvert L-DOPA doseringsnivå. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

  1. Vei rotter ukentlig for å beregne riktig legemiddelmengde basert på de pågående vektendringene i løpet av studien.
    MERK: På grunn av økt aktivitet hos LID+-rotter er det potensial for vekttap med langsiktige L-DOPA-behandlinger. Hvis vekttap oppstår gi rotter ernæringsmessig komplette, svært velsmakende godbiter (se Tabell over materialer) etter L-DOPA injeksjoner.
  2. Beregn mengden L-DOPA og benserazid som kreves for hver ukentlige konsentrasjon, veier ut lyofiliserte aliquots for hver injeksjonsdag, og lagrer i kombinasjon i 1-2 uker ved -20 ° C i glassrino hetteglass til behandlingsdagen.
    MERK: Måldosen er 12 mg/kg eller 12 mg L-DOPA/1000 g kroppsvekt. Eksempel på beregninger for å bestemme mengden L-DOPA og saltvann som trengs for hver dag i uken ved bruk av 12 mg L-DOPA/kg kroppsvekt ved et injeksjonsvolum på 1 cc/kg rottevekt er gitt i tilleggsfil 1.

3. Oppsett av rom og bur

  1. På den første dagen av L-DOPA behandling 3-4 uker etter 6-OHDA lesjon kirurgi, overføre rotter til eneboliger, inkludert IACUC-godkjent berikelse.
  2. Oppretthold i eneboliger gjennom hele studien for å unngå gruppeinterferens med atferdsvurderinger.
  3. På LID-vurderingsdager plasserer du hjemmeburene på et ståltrådstativ, dreid i en omtrent 45° vinkel for optimal visning av rotten (figur 2A). Vend identifikasjonskodene (figur 2B) oppover og fjern vannflasker, matstativer og alle typer berikelse i buret (figur 2C) for å unngå interferens med atferdsvurderinger.

Figure 2
Figur 2: Eksempel på merden som er satt opp for LID-vurderinger av store rotteforsøk. (A) Flere bur kan settes opp for LID-klassifisering ved hjelp av store metallstativer som gir optimal visning av hvert dyr. Bure bør spres fra hverandre i en 45° vinkel med ID-kort vendt oppover (B), mat, vannflasker, hekkematerialer og annen berikelse fjernet for å begrense rottens visuelle uklarhet og distraksjoner til rotten mens du undersøker dyskinetisk oppførsel (C). Metallstativene må være noen få meter unna en hvilken som helst vegg for at rateren skal kunne undersøke rotten foran eller bak på buret etter behov. Det er viktig å merke berikelsesapparater (f.eks. C-røde rotte retreathus) med individuelle dyre-IDer for å erstatte dem i samme bur som de kom fra. Dette er spesielt viktig når du bruker dyr av forskjellige kjønn for ikke å øke stresset til de eksperimentelle fagene. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

4. Levodopa injeksjoner og dyskinesi vurdering

  1. Subkutane injeksjoner av L-DOPA 21,22
    1. Umiddelbart før den daglige injeksjonen av L-DOPA, tilsett riktig volum steril saltvann til den forhåndsveide lyofiliserte L-DOPA- og benserazidblandingen i det gule hetteglasset og rist godt i 10 s (trinn 2.3).
      MERK: Målinjeksjonsvolumet er 1 ml/1000 g kroppsvekt (med 12 mg L-DOPA per ml). Volumet av den sterile saltvann vil avhenge av antall dyr per studie.
    2. Fyll individuelle sprøyter (f.eks. 1,0 eller 0,5 ml med 26 G nål) med ønsket volum for hvert dyr (1 ml/kg rottevekt) og merk hver sprøyte med individuell dyreidentifikasjon.
      MERK: Hold de fylte sprøytene beskyttet mot lys i sterile poser til injeksjonstidspunktet. L-DOPA oksiderer raskt i nærvær av oksygen og lys i et vandig miljø 23,24,25,26.
    3. Ta det første buret til injeksjonsbenken.
    4. Fjern rotten fra buret og legg den på injeksjonsoverflaten.
    5. Hold forsiktig hodet og skuldrene mot overflaten der rotten hviler med håndflaten på den ikke-dominerende hånden.
    6. Forsiktig, scruff huden på baksiden overlyring scapulae med tommelen og pekefingeren av den ikke-dominerende hånden, injiser L-DOPA volum med den dominerende hånden inn i subkutan plass mellom / under fingrene, holde nålen så parallell til kroppen som mulig for å unngå intramuskulær injeksjon.
      MERK: Rottene bedøves ikke før injeksjon.
    7. Kast hver brukte sprøyte i en skarp beholder.
    8. Bytt ut rotten i sitt individuelle bur og legg til ernæringsmessig komplette godbiter bortsett fra på LID-vurderingsdager for å unngå forstyrrelser i atferdsvurderinger til etter at vurderingene er fullført.
    9. Still inn timeren i 1–2 minutter avhengig av ønsket vurderingstid og antall rotter i studien på vurderingsdager. Hent neste bur og injiser neste rotte når timeren indikerer.
    10. Gjenta dette, injisere en rotte hver 1-2 min, til alle rotter er injisert.
  2. Levodopa-indusert dyskinesi vurdering etter injeksjon
    1. Vurder intensiteten (tabell 1) og frekvensen (tabell 2) for dystoniske og hyperkinetiske dyskinesibevegelser ved ønsket antall tidspunkter, som bør inkludere den første utbruddet av LID-oppførsel, maksimal atferd og nedgangsfasen (se Tilleggsfil 2 for et eksempel på LID-vurderingsloggark).
    2. For mannlige og kvinnelige voksne Sprague Dawley eller Fisher 344 rotter, og en prøvestørrelse på N = 40 rotter, start dyskinesivurderingene 20 min etter den første L-DOPA-injeksjonen, og deretter med 50 minutters intervaller til 220 eller 270 min etter injeksjon, avhengig av når LID-atferden har avviklet i 90% -100% av rotter.
    3. Hvis du bruker 1 min. vurderingsintervaller, stiller du inn en timer på 1 min. Vurder den første rotten i ett minutt. Flytt til neste rotte og vurder den i 1 min. Fortsett gjennom alle rotter, vurdering for 1 min intervaller.
    4. Ha en timer plassert ved siden av buret synlig slik at LID-atferdsintensiteten (tabell 1) kan observeres mens du estimerer frekvensen av en gitt oppførsel (tabell 2) i løpet av vurderingsperioden.
    5. Etter at vurderinger for første gangs punkt er fullført, start igjen med den første rotten på neste tidspunkt (f.eks. 70 min etter injeksjon) og fortsett med ønsket intervall (f.eks. hvert 50. minutt) til alle tidspoengene er fullført.
      MERK: På grunn av overlappingen av L-DOPA-injeksjons- og LID-vurderingsoppgaver, er det nødvendig med to personer på vurderingsdagene, en for injeksjon og en for atferdsvurderinger.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

LIDer i parkinsonrotter kan manifestere seg som en rekke unormale ufrivillige bevegelser (AIMer), inkludert dystonisk, hyperkinetisk og stereotypisk oppførsel. LID-vurderingskriterier for slik atferd presenteres her for å inkludere både intensitet (tabell 1) og frekvens (tabell 2). Dette gir en samlet LID-alvorlighetsgrad for hver rotte som gjenspeiler både kvaliteten (intensiteten) og mengden tid som brukes til å engasjere (frekvens) i disse atferdene ved hvert vurderingstidspunkt. Den endelige LID-alvorlighetsgraden beregnes ved å multiplisere intensitetspoengsummen med frekvenspoengsummen for hver atferdskomponent. Poengkriterier for individuelle attributter for LID-atferd er her gitt som skriftlige beskrivelser (tabell 1–2), og eksempler vises som stillbilder med detaljerte rapporter (figur 3) og som videoer (Animerte videoer 1–4). Du finner mer beskrivende informasjon om individuelle bevegelser og poengregning i figurforklaringene.

En omfattende vurdering av virkningen av enhver behandling på ameliorasjon av LID-atferd over tid kan observeres ved hjelp av en L-DOPA dose-eskalering tilnærming, 12 uker i total lengde, med 8 uker med L-DOPA injeksjoner etter 6-OHDA lesjon (figur 1). I dette scenariet får L-DOPA 5x per uke (mandag-fredag) i 2 uker ved hver foreskrevet L-DOPA dose. Atferdsmessige vurderinger som finner sted på dag 1, 6 og 10 i hver L-DOPA-dose, gir en robust tilnærming for vurdering av behandlingseffekt (figur 1). Forskere kan imidlertid oppleve at endrede tidslinjer og doseringsordninger bedre svarer på deres eksperimentelle spørsmål. Faktisk kan dosen av L-DOPA og benserazid, den perifere dekarboksylasehemmeren, variere avhengig av undersøkerens erfaring med doser og / eller hypotesene som skal testes. Det er oppmerksom på at de vanligste dosene av benserazid er mellom 10-15 mg/kg, som støttes av rapporten fra Tayarani-Binazir et al. (2012)20 som viser at optimale atferdseffekter av L-DOPA finnes med 10 mg/kg benserazid, uten ekstra nytte ved 15 mg/kg.

Det er flere måter å presentere og analysere LID-data når du bestemmer om en gitt behandling har en meningsfull innvirkning på å forbedre denne avvikende oppførselen. Figur 4A gir et eksempel på data presentert som toppdose LID over hele den eksperimentelle tidslinjen. Peak dose LID kan defineres som det tidspunktet da gruppens gjennomsnittlige LID-skår er størst. Alternativt kan man rapportere "absolutt topp", som er den maksimale topp LID-poengsummen for et dyr uavhengig av når det oppstår i løpet av en vurderingsperiode. I tillegg kan LID-vurderingsdata undersøkes over hvert daglige vurderingstidskurs og presenteres enten som eksperimentelle gruppedata og/eller plottes for å vise det enkelte fagets LID-alvorlighetsgrad på hvert tidspunkt (figur 4B)19. Denne sistnevnte tilnærmingen tillater vurdering av om noen behandlinger kan redusere for eksempel den totale tiden et emne viser LID, men ikke nødvendigvis påvirke alvorlighetsgraden av maksimal dose. Til slutt kan man kvantifisere totale LID-alvorlighetsgrader over hele vurderingsøkten. For et gitt emne summeres LID-alvorlighetsgraden for hvert tidspoeng for å gi en total poengsum for den vurderingsperioden. Denne tilnærmingen emulerer området under kurveestimatene, som også kan beregnes.

Det er viktig å sette pris på at LID/AIMs scoringsdata, opprettet ved hjelp av vurderingsskalaer for å tilordne verdier til dyskinesi alvorlighetsgrad og/eller varighet (tabell 1 og 2), er ordenstalldata. Dermed er de mest hensiktsmessige statistiske testene ikke-parametriske. Selv om det ikke finnes noen direkte tilsvarende ikke-parametrisk test for toveis variansanalyse, kan LID-data analyseres med ikke-parametriske alternativer til enveis ANOVA. Spesielt brukes Kruskal-Wallis-testen til sammenligninger mellom emner av to eller flere uavhengige grupper. Friedman-testen er et ikke-parametrisk alternativ til en enveis ANOVA med gjentatte tiltak som brukes til sammenligninger innen. Begge brukes med post-hoc tester (dvs. Dunn eller Dunn-Bonferroni) etter en betydelig Kruskal-Wallis eller Friedmans test. For å undersøke om det er meningsfulle forskjeller mellom to uavhengige grupper, regnes Mann-Whitney U-testen som den ikke-parametriske ekvivalenten til den uavhengige t-testen 28,29.

Figure 3
Figur 3: Bilder med fryseramme som viser eksempler på LID-intensitetsscoring hos parkinsonrotter. (A) Representativt bilde av en ikke-dyskinetisk parkinsonrotte som viser den ofte typiske hunched parkinsonske holdningen i fravær av dystoni eller hyperkinesi. (B) Parkinsons rotte med generell mild LID-alvorlighetsgrad, noe som indikerer mild til moderat høyre forbensdystoni og mangel på nakke, koffert eller bakbensdystoni; i den medfølgende videoen (Animert video 1), kan du se små amplitude høyre forepaw dyskinesi (RFPD) og orolingual bevegelser. (C) Parkinsonrotter med moderat nakke og stammedystoni (fet tekst tilsvarer retningspiler som indikerer bagasjerommet vridd i 90° vinkel). (D) Dyskinetisk parkinsonrotte med mild nakke og moderat stammedystoni, moderat til alvorlig høyre forbensdystoni; i den medfølgende videoen (Animert video 3), kan blandet amplitude RFPD observeres. (E) Parkinsons rotte med moderat til alvorlig nakke og alvorlig stammedystoni, alvorlig høyre bakben og moderat høyre forbensdystoni (fet tekst tilsvarer retningspiler som indikerer at stammen er vridd ~ 180 °; dette er spesielt bemerkelsesverdig i eksempel #2). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 4
Figur 4: Eksempel på LID-data overholdt over 8 uker med LID-vurderinger med eskalerende L-DOPA-dosering. (A) Maksimal dose LID alvorlighetsgrad (80 min post-L-DOPA) over tid og doser. (B) Daglig tidskurs (20–170 min post-L-DOPA). For hver dose og dag reflekterer de øverste grafene gjennomsnittlig ± SEM; De nederste grafene viser individuelle emnesvar over tid. Statistikk ble beregnet ved hjelp av Kruskal-Wallis med Dunns multippel sammenligningstester (for mellomfagtester) og Friedman-tester med Dunns multisammenligningstester (for tester innen). Forkortelser: Kontroll (Ctr) (n = 7); Behandling (Tx) (n = 10). Denne figuren skrives ut på nytt og tilpasses med tillatelse fra referanse19. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Score Beskrivelse
Hals Dystoni 0 ingen
1 mild forskyvning av hodet, holdt i betydelig tid (>10-20 s); kan være ekstrem av normal
1.5 blanding av mild og moderat dystoni
2 hodet med mer bemerkelsesverdig forskyvning (ca 90 ° vinkel til kropp); hodet forblir trukket i retning av den dystoniske bevegelsen
2.5 blanding av moderat og alvorlig dystoni
3 konstant alvorlig torsjon av nakkemuskulaturen (>100° vinkel mellom hode og skuldre)
Trunk Dystoni 0 ingen
1 mild dystoni / vridning av stammen; 45° forskjell mellom øvre og nedre torso; holdt i merkbar tid (≥10-20 s) og ikke prediktiv for rotasjoner
1.5 blanding av mild og moderat dystoni
2 moderat dystoni / vridning av stammen; 90° forskjell mellom øvre og nedre torso
2.5 blanding av moderat og alvorlig dystoni
3 konstant alvorlig dystoni/vridning, "korketrekker"-lignende posturing (nærmer seg 180°; hode og føtter i motsatte retninger), ute av stand til å ambulate og kan gå inn i fat roll rotasjon
Forelimb Dystoni 0 ingen
1 mild; unormal posturing av håndledd eller sifre; enten knyttet knyttneve eller stiv underarm, men vanligvis ikke begge samtidig
1.5 blanding av mild og moderat dystoni
2 Moderat; knyttneve og stiv forben uten nedadgående hold i hypereksponert posisjon
2.5 blanding av moderat og alvorlig dystoni
3 Alvorlig; knyttneve og stiv underarm med nedadgående hyperekstensjon
Hindlimb dystoni 0 ingen
1 bakbenet mildt holdt i unormal holdning; fleksjon eller forlengelse.
1.5 blanding av mild og moderat dystoni
2 moderat stiv forlengelse eller fleksjon av bakbenet; w/o splaying av sifrene
2.5 blanding av moderat og alvorlig dystoni
3 alvorlig stiv kroppsholdning av lem med unormal hyperekstensjon +/- splaying av sifre
Høyre Forepaw Dyskinesia (RFPD) 0 fraværende
1 små amplitudebevegelser, enkel repeterende side til side, eller opp og ned tørking i ansiktet eller munnen; eller banke på burveggen eller søppelet
1.5 blanding av små og store amplitudebevegelser; Vanligste
2 store amplitude repeterende opp og ned bevegelser som involverer alvorlig forlengelse av høyre forben, trekker nedover og motsatt av nakken
Orolingual 0 ingen
1 hovedsakelig lukket munn ledig (meningsløs) tygge, tannsliping
1.5 ledig tygging, det kan være noe tungestikk, gjentatt biting på søppelet
2 fremtredende gjentatt tunge fremspring med fremtredende åpen munn tygge
Hodet bobbing / tremor 0 ingen
1 tilstede (repeterende og rytmisk bobbing av hodet (ca. 4 Hz))
Konstant tygging av søppel (CCL) 0 ingen
1 tilstede (konstant tygging av søppel; mål rettet obsessiv biting eller tygge av søppel, gjentatte ganger plukke opp, tygge, slippe, plukke opp, tygge, slippe søppel)

Tabell 1: LID-vurderingskriterier for intensitet av dystonisk eller hyperkinetisk atferd hos parkinsonrotter. Disse vurderingskriteriene gir en rekke intensitetstiltak knyttet til kvaliteten/alvorlighetsgraden av rottens unormale ufrivillige holdninger og/eller bevegelser. Spesifikke attributter som er beskrevet for holdninger og atferd, klassifiseres vanligvis som milde, moderate eller alvorlige, med spesifikke beskrivelser som er angitt her. En endelig alvorlighetsgrad bestemmes som produktet av Intensitet x Frekvens (tabell 2).

Score Beskrivelse
0 Fraværende
1 Periodisk < 50 % av observasjonsperioden
2 Periodisk ≥ 50 % av observasjonsperioden
3 Vedvarende gjennom hele observasjonsperioden og ikke avbrutt ved å tappe på merd

Tabell 2: LID Vurderingskriterier for Hyppighet av dystonisk eller hyperkinetisk atferd. Disse kriteriene gir et kvantifiseringsmål for hvor raskt en gitt atferd oppstår eller gjentas i observasjonsperioden. Dette er viktig for å vurdere den totale alvorlighetsgraden, gitt at sjelden oppførsel garanterer en mindre alvorlig poengsum enn en vedvarende. En endelig alvorlighetsgrad bestemmes som produktet av intensitet (tabell 1) x frekvens.

Animert video 1: Mildt LOKK med liten amplitude RFPD og tygge av venstre forpawsag. Dyskinetisk parkinsonrotte uten merkbar nakke- eller stammedystoni, men moderat høyre forepaw dystoni, liten amplitude RFPD bemerket som rask gjentatt flimrende bevegelse av riktig forepaw. Denne rotten viser også orolingval oppførsel som involverer ledig tygging rettet mot venstre forpawsag. L-DOPA dose: 12 mg/kg; videoopptak ~70 min etter injeksjon. Klikk her for å laste ned denne videoen.

Animert Video 2: Moderat stamme og nakke dystoni. Dyskinetisk parkinsonrotte med moderat stamme- og nakkedystoni eksemplifisert av 90° forskjellen i forbenenes og bakbenets posisjon (se figur 2C). Denne rotten viser også fremtredende stereotypisk snusing og sporadisk ledig biting på søppelet. L-DOPA dose: 12 mg/kg; videoopptak ~70 min etter injeksjon. Klikk her for å laste ned denne videoen.

Animert video 3: Moderat til alvorlig høyre forepaw dystoni med blandet amplitude RFPD. Dyskinetisk parkinsonrotte med mild nakke og moderat stammedystoni, moderat til alvorlig høyre forepaw dystoni, blandet amplitude RFPD sett på som mindre tørkebevegelser nær munnen blandet med større amplitude nedover trekking av høyre forepaw. Denne rotten har også hyppig rotasjonsadferd som kan kvantifiseres i tillegg til LID-profiler. L-DOPA dose: 12 mg/kg; videoopptak ~70 min etter injeksjon. Klikk her for å laste ned denne videoen.

Animert video 4: Hode bob og orolingual bevegelser med tunge fremspring. Dyskinetisk parkinsonrotte med alvorlig stamme og forepaw dystoni (bakbensdystoni ikke synlig), moderat til alvorlig nakkedystoni og en konstant hodebome med pågående tungeutstikk. Hodet bob ligner 4 Hz tremor sett i PD; Hos rotter er det imidlertid bare notert hos dyskinetiske parkinsonrotter etter L-DOPA-administrering. Denne rotten har også blandet amplitude RFPD, sett på som mer signifikante amplitudebevegelser tidlig i videoen og små tørkelignende bevegelser nær ansiktet, karakteristisk for liten amplitude RFPD sett senere. Liten bevegelse ble observert på den alvorlig dystoniske / utvidede forbenet tidlig i videoen; Dette er imidlertid relatert til hode- og nakkeskjelvaktiviteten og vil ikke bli klassifisert som liten amplitude RFPD. Når observatøren trykker sterkt på buret, er disse LID-atferdene ikke avbrytbare, noe som tyder på at dette er et alvorlig LID som ikke kan overvinnes med en start. Klikk her for å laste ned denne videoen.

Tilleggsfil 1: Eksempel for beregning av L-DOPA-beløpet. Eksempel på beregninger for å bestemme mengden L-DOPA og saltvann som trengs for hver dag i uken ved hjelp av 12 mg L-DOPA / kg kroppsvekt ved et injeksjonsvolum på 1 cc / kg rottevekt. Klikk her for å laste ned denne filen.

Tilleggsfil 2: Eksempel på LID-klassifiseringsloggark. Dette arket kan brukes eller tilpasses for å logge LID-intensitet og frekvenspoengsummer under vurderingsøkter. Den endelige alvorlighetsgraden bestemmes som produktet av intensitet (tabell 1) x frekvens (tabell 2). Disse klassifiseringsskalaene kan også brukes til å kvantifisere LID hos mus30. Klikk her for å laste ned denne filen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Presentert her er detaljer for reproduserbar induksjon og vurdering av LIDer i en parkinsonsk rotte modell etter ensidig 6-OHDA lesjon av nigrostriatal DA-systemet. Mens det en gang ble antatt at gnagere ikke utviklet LID, og at rotasjons asymmetri kan være analogen av LID hos rotter31, har rotte- og musemodeller blitt karakterisert de siste to tiårene og er et godt akseptert verktøy for LID-forskning 15,32,33,34. Protokollen som presenteres her er spesielt nyttig for større eksperimentelle design 18,19. Det gir detaljer for vurdering av intensiteten og frekvensen av en rekke dyskinetiske atferd, både dystoniske og hyperkinetiske. Spesielt vil bilder og videoer med tilsvarende detaljerte notater og skåring av dystonisk og hyperkinetisk LID-oppførsel hjelpe eksperimentets vurdering etter L-DOPA-administrasjon. Selv om et eksempel på alle mulige AIM ikke er gitt, tilbys en rekke atferder som varierer fra mild til moderat til alvorlig som et rammeverk for LID-vurdering. Denne protokollen er dokumentert for å bidra til å evaluere ulike terapier hos parkinsonrotter 19,35,36,37. Det utvider andre publiserte gnagervurderingsskalaer som hovedsakelig fokuserer på varigheten av foreskrevet LID-oppførsel 33,38,39. Videre søker den skisserte prosedyren å justere skåringsmetoder i en rotte PD-modell med dagens praksis som vurderer LIDer hos ikke-menneskelige primater (NHPer), benchmark PD-modellen40,41.

Vanligvis funnet i parkinsonian gnager litteraturen er LID, eller AIM vurdering skalaer som innebærer utelukkende å undersøke forekomsten eller frekvensen av (1) lem dyskinesi (f.eks, rytmiske jerks av forbenet kontralateral til lesjon33, eller rask, målrettet bevegelse av forbenet kontrollert av lesjonert halvkule39); (2) aksiale dyskinesi (f.eks. torsjon av aksiale muskler som påvirker nakke, stamme og hale33, eller dystonisk vridning av nakke og torso kontralateral til den lesjonerte halvkule39); og (3) orolingual dyskinesi (f.eks. masticatory bevegelser av den tomme munnen med tunge fremspring33, eller repeterende mastication eller tunge fremspring når rottens munn var tom og ikke i kontakt med noe objekt39). Disse tre atferdskategoriene får en alvorlighetsgrad basert på frekvensen i observasjonsperioden. Alvorlighetsgraden som representerer tiden et dyr brukte på å vise disse atferdene, ofte uten karakterisering av kvaliteten på atferden, kombineres deretter til den endelige ALO-poengsummen (aksial, lem og orolingual).

I motsetning gir den nåværende protokollen en mer detaljert skala som ikke bare tillater evaluering av globale AIMer, men også muliggjør undersøkelse av AIMer i uavhengige kroppsdeler (dvs. nakke, koffert, forben, bakhånd og munn), intensiteten / kvaliteten på AIM som vurderes, differensiering av dystoni fra hyperkinetisk oppførsel, og, som med andre skalaer, inkorporerer frekvensen av en gitt AIM forekomst. Det overordnede målet er å tillate en omfattende vurdering av LID-oppførselen uttrykt i hvert emne. For eksempel, for den enkle atferdsavlesningen av trunk dystoni, er en rotte som utviser mild trunk dystoni (dvs. 45 ° forskjell mellom øvre og nedre torso, ikke prediktiv for svingadferd) for en hel observasjonsperiode svært forskjellig fra en rotte som utviser alvorlig trunk dystoni (dvs. konstant alvorlig dystoni / vridning, korketrekkerlignende posturing, nærmer seg 180 °; kan ikke ambulate) for hele observasjonen. Videre, gitt den topografiske representasjonen av rottens kropp i striatum, kan differensiering av individuelle attributter av LIDer være informativ36.

En annen komponent i denne protokollen som bør vurderes nøye, er den eksperimentelle utformingen av eskalerende L-DOPA-dosering over et utvidet (f.eks. 8-ukers) behandlingstidskurs (figur 1). En studie som bare benytter lave doser av L-DOPA (f.eks. 3–6 mg/kg) og/eller administrerer den valgte dosen i en kort periode (f.eks. 2–4 uker), kan vise tegn på LID-ameliorasjon med terapeutisk inngrep hos parkinsonrotter; Disse studienes relevans for personer med PD, der kronisk administrering og doseøkning ofte er nødvendig, er imidlertid tvilsomt. Slike avvikende behandlingsprotokoller mellom prekliniske og kliniske undersøkelser kan foreslås å underveie mangelen på effekt sett i kliniske studier utført med legemidler som viste løfte i prekliniske gnagerstudier.

Mens protokollen som presenteres her gir instruksjoner om en omfattende tilnærming for vurdering LID i parkinsonrotter og rottemodellen til LID er etablert som en pålitelig modell av klinisk LID 3,15,38,42,43, er det iboende begrensninger for enhver modell. Dyremodeller er verktøy som er nyttige for å etterligne bestemte egenskaper ved menneskelig sykdom og gjøre spådommer om for eksempel virkningen terapeutisk inngrep kan ha på et sett med sykdomsegenskaper. Et trekk ved prekliniske LID-modeller som ofte diskuteres som en potensiell begrensning, er at rotter krever betydelig DA-uttømming for å uttrykke LID. I tillegg er det ofte sitert at LID utvikler seg raskere i gnager- og NHP-modeller enn hos pasienter, og dermed gjenspeiler disse modellegenskapene ikke klinisk LID. Imidlertid er det ofte undervurdert at uavhengig av arter (dvs. menneskelig, ikke-menneskelig primat eller gnager), er nesten fullstendig tap av striatal DA-innervering generelt nødvendig for LID å manifestere. Når L-DOPA administreres til personer med alvorlig striatal DA-uttømming, induserer LID 1,19,38,44,45,46. En annen funksjon som har fremmet skepsis mot gnagermodeller av LID kommer fra forventningen om at de nevrologiske tegnene på LID skal ligne de fysiske manifestasjonene av LID sett hos primater (dvs. menneskelig og ikke-menneskelig). Faktisk varierer utseendet på de unormale bevegelsene klassifisert som LIDer hos rotter i egenskaper fra det som ses hos primater (f.eks. choreoathetose hos primater vs. stereotypi / hyperkinesi hos gnagere). Mens det er utover denne artikkelen å grundig ta opp dette emnet, kort, er slike forskjeller i tegn mellom arter basert på det faktum at mennesker er vanlige bipeale, ikke-primater hyppige bipedale og gnagere firedoblet43,46. Dermed har ulike arter spesifikke repertoarer av atferd manifestert av spesifikke osteoartikulære og muskulære strukturer og modulert av artsspesifikke nevrale systemer43. Følgelig bør dyremodellering av menneskelignende symptomer først og fremst baseres på en forventning om funksjonell likhet i stedet for på fysisk identitet43. Tolkning av funn fra dyremodeller med behørig forsiktighet har, og vil fortsette å gi verdifulle spådommer for sykdomsbehandling.

Mens det for tiden er ett FDA-godkjent legemiddel for behandling av LID i PD, amantadin, og kirurgisk inngrep av DBS kan forbedre LID, er effekten og tolerabiliteten ikke optimal, og ikke alle pasienter vil kvalifisere for DBS-kirurgi. Som veltalende gjennomgått av Cenci og kolleger47, er det en forestilling uttrykt av noen at personer som er rammet av PD heller vil være PÅ (dvs. oppleve motorfordelen ved L-DOPA) med dyskinesi enn OFF. Som disse forfatterne gripende sier: "Den dypere sannheten er at pasienter i stor grad foretrekker å være PÅ uten dyskinesi. Som forskere og klinikere bør vi strebe etter å gjøre dette målet til virkelighet. For dette formål skal translasjonell forskning på LID oppmuntres og forfølges vedvarende. Når vi forfølger dette målet, presenterer vi vår metode for induksjon og vurdering av LID. Vår vurderingsskala er designet for å kombinere en rekke intensitetsmål relatert til kvaliteten / alvorlighetsgraden til AIM-ene og indikerer hvor lenge en rekke attributter av dyskinesi vises. Hensikten med denne modellen er å tillate bestemmelse av en numerisk verdi som nøyaktig gjenspeiler LID-alvorlighetsgraden mens den tar hensyn til både intensitet og frekvens. Videre indikerer denne verdien LID-alvorlighetsgrad ikke bare systemisk, men med referanse til spesifikke kroppsdeler. Med denne modellen tar vi sikte på å sikre at eksperimentelle terapeutiske behandlinger kan testes grundig for deres evne til å modifisere levodopaindusert dyskinesi.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen interessekonflikter ble erklært.

Acknowledgments

Vi ønsker å erkjenne kampene til alle de med Parkinsons sykdom og styrken og motstandskraften de viser hver dag, spesielt den elskede faren til KSC, Steece. Arbeidet som er representert her ble støttet av National Institute of Neurological Disorders and Stroke (NS090107, NS110398) og Parkinson Disease Foundation International Research Grant Program, nå Parkinson Foundation. Vi vil også gjerne anerkjenne Molly VanderWerp for hennes utmerkede redaksjonelle hjelp.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
 100 Minutes Digital Timer Staples 1111764
 Compass CX Compact Scale Ohaus 30428202
5-(2-aminoethyl)-1,2,4-benzenetriol, monohydrobromide Cayman Chemicals 25330 6-OHDA is a catecholaminergic neurotoxin that is used to induce dopaminergic lesions and parkinsonian symptoms in rodents.
Allentown cages Allentown, LLC Rat900 Allentown cages provide the ability to view the rats from all sides.
BD Allergist Trays with Permanently Attached Needle BD BD 305540 For subcutaneous L-DOPA injections
Benserazide hydrochloride Sigma-Aldrich B7283 Benserazide is a peripheral decarboxylase inhibitor used with L-DOPA to to induce dyskinesia in rodent models of PD.
Glass amber scintillation vials Thermo Scientific B7921 Used for storage of L-DOPA/benserazide at -20 °C until mixed with sterile saline.
L-3,4-Dihydroxyphenylalanine methyl ester hydrochloride Sigma-Aldrich D1507 L-3,4-Dihydroxyphenylalanine methyl ester is a precursor to L-DOPA that crosses the blood-brain barrierand use to treat parkinsonian symptoms in rodents.
Paper Mate Sharpwriter Mechanical Pencils Staples 107250
Rodent nutritionally complete enrichment treats Bio-Serv F05478
Round Ice Bucket with Lid, 2.5 L Corning 432129
Standard Plastic Clipboard Staples 1227770
Steel wired 6' long movable shelving units Uline H9488 Width/Height can be adjusted to need/number of rats per experiment
Sterile Saline 0.9% Covidien/Argyle 1020 For mixing with L-DOPA/benserazide prior to subcutaneous injections.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Cotzias, G. C., Papavasiliou, P. S., Gellene, R. L-dopa in parkinson's syndrome. New England Journal of Medicine. 281, 272 (1969).
  2. Yahr, M. D., Duvoisin, R. C., Schear, M. J., Barrett, R. E., Hoehn, M. M. Treatment of parkinsonism with levodopa. Archives of Neurology. 21 (4), 343-354 (1969).
  3. Bastide, M. F., et al. Pathophysiology of L-dopa-induced motor and non-motor complications in Parkinson's disease. Progress in Neurobiology. 132, 96-168 (2015).
  4. Sellnow, R. C., et al. Regulation of dopamine neurotransmission from serotonergic neurons by ectopic expression of the dopamine D2 autoreceptor blocks levodopa-induced dyskinesia. Acta Neuropathologica Communications. 7 (1), 8 (2019).
  5. Bastide, M. F., Bezard, E. L-dopa induced dyskinesia in Parkinson's disease]. Bulletin de l'Académie Nationale de Médecine. 199 (2-3), 201-212 (2015).
  6. Hauser, R. A., et al. ADS-5102 (Amantadine) extended-release capsules for levodopa-induced dyskinesia in Parkinson's Disease (EASE LID 2 study): Interim results of an open-label safety study. Journal of Parkinson's Disease. 7 (3), 511-522 (2017).
  7. Huot, P., Johnston, T. H., Koprich, J. B., Fox, S. H., Brotchie, J. M. The pharmacology of L-DOPA-induced dyskinesia in Parkinson's disease. Pharmacological Reviews. 65 (1), 171-222 (2013).
  8. Steece-Collier, K., et al. Embryonic mesencephalic grafts increase levodopa-induced forelimb hyperkinesia in parkinsonian rats. Movement Disorders. 18 (12), 1442-1454 (2003).
  9. Thiele, S. L., Warre, R., Nash, J. E. Development of a unilaterally-lesioned 6-OHDA mouse model of Parkinson's disease. Journal of Visualized Experiments. (60), e3234 (2012).
  10. Simola, N., Morelli, M., Carta, A. R. The 6-hydroxydopamine model of Parkinson's disease. Neurotoxicity Research. 11 (3-4), 151-167 (2007).
  11. Borlongan, C. V., Hida, H., Nishino, H. Early assessment of motor dysfunctions aids in successful occlusion of the middle cerebral artery. Neuroreport. 9 (16), 3615-3621 (1998).
  12. Fleming, S. M. Behavioral outcome measures for the assessment of sensorimotor function in animal models of movement disorders. International Review of Neurobiology. 89, 57-65 (2009).
  13. Borlongan, C. V., Sanberg, P. R. Elevated body swing test: a new behavioral parameter for rats with 6-hydroxydopamine-induced hemiparkinsonism. Journal of Neuroscience. 15 (7), Pt 2 5372-5378 (1995).
  14. Chang, J. W., Wachtel, S. R., Young, D., Kang, U. J. Biochemical and anatomical characterization of forepaw adjusting steps in rat models of Parkinson's disease: studies on medial forebrain bundle and striatal lesions. Neuroscience. 88 (2), 617-628 (1999).
  15. Lundblad, M., et al. Pharmacological validation of behavioural measures of akinesia and dyskinesia in a rat model of Parkinson's disease. European Journal of Neuroscience. 15 (1), 120-132 (2002).
  16. Olsson, M., Nikkhah, G., Bentlage, C., Bjorklund, A. Forelimb akinesia in the rat Parkinson model: differential effects of dopamine agonists and nigral transplants as assessed by a new stepping test. Journal of Neuroscience. 15 (5), Pt 2 3863-3875 (1995).
  17. Monville, C., Torres, E. M., Dunnett, S. B. Comparison of incremental and accelerating protocols of the rotarod test for the assessment of motor deficits in the 6-OHDA model. Journal of Neuroscience Methods. 158 (2), 219-223 (2006).
  18. Steece-Collier, K., et al. Striatal Nurr1, but not FosB expression links a levodopa-induced dyskinesia phenotype to genotype in Fisher 344 vs. Lewis hemiparkinsonian rats. Experimental Neurology. 330, 113327 (2020).
  19. Steece-Collier, K., et al. Genetic silencing of striatal CaV1.3 prevents and ameliorates levodopa dyskinesia. Movement Disorders. 34 (5), 697-707 (2019).
  20. Tayarani-Binazir, K. A., Jackson, M. J., Strang, I., Jairaj, M., Rose, S., Jenner, P. Benserazide dosing regimen affects the response to L-3,4-dihydroxyphenylalanine in the 6-hydroxydopamine-lesioned rat. Behavioral Pharmacology. 23 (2), 126-133 (2012).
  21. Lindgren, H. S., Rylander, D., Ohlin, K. E., Lundblad, M., Cenci, M. A. The "motor complication syndrome" in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with L-DOPA: relation to dose and route of administration. Behavioural Brain Research. 177 (1), 150-159 (2007).
  22. Suckow, M. A., Stevens, K. A., Wilson, R. P. American College of Laboratory Animal Medicine series xvii. , Academic Press/Elsevier. London; Waltham, MA. 1268 (2012).
  23. Zhou, Y. Z., Alany, R. G., Chuang, V., Wen, J. Studies of the Rate Constant of l-DOPA Oxidation and Decarboxylation by HPLC. Chromatographia. 75, 597-606 (2012).
  24. Stroomer, A. E., Overmars, H., Abeling, N. G., van Gennip, A. H. Simultaneous determination of acidic 3,4-dihydroxyphenylalanine metabolites and 5-hydroxyindole-3-acetic acid in urine by high-performance liquid chromatography. Clinical Chemistry. 36 (10), 1834-1837 (1990).
  25. PubChem Compound Summary for CID 6047, Levodopa. , Available from: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Levodopa (2021).
  26. Merck. The Merck Index 13th edn. , Entry# 5485 (2021).
  27. Ortner, N. J., et al. Lower affinity of isradipine for L-Type Ca(2+) channels during substantia nigra dopamine neuron-like activity: Implications for neuroprotection in Parkinson's Disease. Journal of Neuroscience. 37 (228), 6761-6777 (2017).
  28. Hazra, A., Gogtay, N. Biostatistics series module 3: Comparing groups: Numerical variables. Indian Journal of Dermatology. 61 (3), 251-260 (2016).
  29. Mishra, P., Pandey, C. M., Singh, U., Keshri, A., Sabaretnam, M. Selection of appropriate statistical methods for data analysis. Annals of Cardiac Anaesthesia. 22 (3), 297-301 (2019).
  30. Divito, C. B., et al. Loss of VGLUT3 produces circadian-dependent hyperdopaminergia and ameliorates motor dysfunction and l-Dopa-Mediated dyskinesias in a model of Parkinson's Disease. Journal of Neuroscience. 35 (45), 14983-14999 (2015).
  31. Henry, B., Crossman, A. R., Brotchie, J. M. Characterization of enhanced behavioral responses to L-DOPA following repeated administration in the 6-hydroxydopamine-lesioned rat model of Parkinson's disease. Experimental Neurology. 151 (2), 334-342 (1998).
  32. Andersson, M., Hilbertson, A., Cenci, M. A. Striatal fosB expression is causally linked with l-DOPA-induced abnormal involuntary movements and the associated upregulation of striatal prodynorphin mRNA in a rat model of Parkinson's disease. Neurobiology of Disease. 6 (6), 461-474 (1999).
  33. Cenci, M. A., Lee, C. S., Bjorklund, A. L-DOPA-induced dyskinesia in the rat is associated with striatal overexpression of prodynorphin- and glutamic acid decarboxylase mRNA. European Journal of Neuroscience. 10 (8), 2694-2706 (1998).
  34. Dekundy, A., Lundblad, M., Danysz, W., Cenci, M. A. Modulation of L-DOPA-induced abnormal involuntary movements by clinically tested compounds: further validation of the rat dyskinesia model. Behavioural Brain Research. 179 (1), 76-89 (2007).
  35. Collier, T. J., et al. Interrogating the aged striatum: robust survival of grafted dopamine neurons in aging rats produces inferior behavioral recovery and evidence of impaired integration. Neurobiology of Disease. 77, 191-203 (2015).
  36. Maries, E., et al. Focal not widespread grafts induce novel dyskinetic behavior in parkinsonian rats. Neurobiology of Disease. 21 (1), 165-180 (2006).
  37. Mercado, N. M., et al. The BDNF Val66Met polymorphism (rs6265) enhances dopamine neuron graft efficacy and side-effect liability in rs6265 knock-in rats. Neurobiology of Disease. 148, 105175 (2021).
  38. Cenci, M. A., Crossman, A. R. Animal models of l-dopa-induced dyskinesia in Parkinson's disease. Movement Disorders. 33 (6), 889-899 (2018).
  39. Lindenbach, D. Behavioral and cellular modulation of L-DOPA-induced dyskinesia by beta-adrenoceptor blockade in the 6-hydroxydopamine-lesioned rat. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 337 (3), 755-765 (2011).
  40. Petzinger, G. M. Reliability and validity of a new global dyskinesia rating scale in the MPTP-lesioned non-human primate. Movement Disorders. 16 (2), 202-207 (2001).
  41. Fox, S. H., Johnston, T. H., Li, Q., Brotchie, J., Bezard, E. A critique of available scales and presentation of the Non-Human Primate Dyskinesia Rating Scale. Movement Disorders. 27 (11), 1373-1378 (2012).
  42. Cenci, M. A., Ohlin, K. E. Rodent models of treatment-induced motor complications in Parkinson's disease. Parkinsonism & Related Disorders. 15, Suppl 4 13-17 (2009).
  43. Cenci, M. A., Whishaw, I. Q., Schallert, T. Animal models of neurological deficits: how relevant is the rat. Nature Reviews: Neuroscience. 3 (7), 574-579 (2002).
  44. Zhang, Y., et al. Aberrant restoration of spines and their synapses in L-DOPA-induced dyskinesia: involvement of corticostriatal but not thalamostriatal synapses. Journal of Neuroscience. 33 (28), 11655-11667 (2013).
  45. Konradi, C., et al. Transcriptome analysis in a rat model of L-DOPA-induced dyskinesia. Neurobiology of Disease. 17 (2), 219-236 (2004).
  46. Morin, N., Jourdain, V. A., Di Paolo, T. Modeling dyskinesia in animal models of Parkinson disease. Experimental Neurology. 256, 105-116 (2014).
  47. Cenci, M. A., Riggare, S., Pahwa, R., Eidelberg, D., Hauser, R. A. Dyskinesia matters. Movement Disorders. 35 (3), 392-396 (2020).

Tags

Nevrovitenskap Utgave 176 Tom verdi Utgave
Induksjon og vurdering av Levodopa-indusert dyskinesi i en rottemodell av Parkinsons sykdom
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Caulfield, M. E., Stancati, J. A.,… More

Caulfield, M. E., Stancati, J. A., Steece-Collier, K. Induction and Assessment of Levodopa-induced Dyskinesias in a Rat Model of Parkinson's Disease. J. Vis. Exp. (176), e62970, doi:10.3791/62970 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter