Summary
후천성 부갑상선 기능 저하증(HypoPT)의 동물 모델은 HypoPT가 미네랄 이온 항상성에 미치는 영향을 이해하고 새로운 치료법의 효과를 검증하는 데 중요합니다. 여기서, 탄소 나노입자를 이용하여 부갑상선 절제술(PTX)에 의해 후천성 부갑상선기능저하증(AHypoPT) 쥐 모델을 생성하는 기술이 제시된다.
Abstract
부갑상선 기능 저하증(HypoPT)은 부갑상선을 침범하는 희귀 질환으로 부갑상선 호르몬(PTH)의 분비 또는 효능이 감소하여 혈청 인 수치가 높고 혈청 칼슘 수치가 낮습니다. HypoPT는 가장 일반적으로 갑상선 또는 기타 전방 목 수술 중 땀샘의 우발적 손상 또는 제거로 인해 발생합니다. 부갑상선/갑상선 수술은 최근 몇 년 동안 더 보편화되었으며 이에 따라 수술 후 합병증으로 HypoPT의 발생이 증가했습니다. 미네랄 이온 항상성에 대한 HypoPT의 효과의 기본 메커니즘을 더 잘 이해하고 새로운 치료법의 치료 효과를 검증하기 위해 HypoPT 동물 모델이 매우 필요합니다. 여기서, 탄소나노입자를 이용하여 부갑상선 절제술(PTX)을 수행하여 수컷 쥐에서 후천성 HypoPT를 생성하는 기술이 보고되어 있다. 쥐 모델은 부갑상선 기능 저하증의 마우스 모델에 비해 큰 가능성을 보여줍니다. 중요하게도, 인간 PTH 수용체 결합 영역은 쥐의 서열 유사성과 84.2%의 서열 유사성을 가지며, 이는 마우스와 공유된 73.7%의 유사성보다 높습니다. 또한, PTH/PTHrP 수용체 신호 전달 경로에 영향을 미칠 수 있는 에스트로겐의 영향은 수컷 쥐에서 완전히 조사되지 않았습니다. 탄소 나노 입자는 기능에 영향을 미치지 않고 갑상선 림프절을 검게 염색하는 림프 추적자이지만 부갑상선을 염색하지 않아 쉽게 식별하고 제거 할 수 있습니다. 이 연구에서 혈청 PTH 수치는 PTX 후 감지할 수 없었고, 이로 인해 상당한 저칼슘혈증과 고인산혈증이 발생했습니다. 따라서 수술 후 HypoPT의 임상 상태는 쥐 모델에서 현저하게 나타낼 수 있습니다. 따라서 탄소 나노입자 보조 PTX는 HypoPT의 발병기전, 치료 및 예후를 연구하기 위한 매우 효과적이고 쉽게 구현할 수 있는 모델 역할을 할 수 있습니다.
Introduction
부갑상선 호르몬(PTH)은 부갑상선에서 분비됩니다. 칼슘 균형의 주요 조절제이며 인산염 대사를 유지하며 뼈 회전율 1,2에 참여합니다. 부갑상선 기능 저하증(HypoPT)은 PTH의 분비 감소 또는 기능 상실로 나타납니다. 희귀 내분비 질환으로 유병률은 100,000인년당 약 9-37명입니다 3,4,5. HypoPT는 혈청 인 6,7의 증가와 함께 혈청 PTH 및 칼슘 수치가 감소하는 것이 특징입니다. HypoPT는 원인에 따라 후천성 부갑상선 기능 저하증(AHypoPT) 또는 특발성 부갑상선 기능 저하증(IHypoPT)으로 분류됩니다8. AHypoPT는 임상 실습에서 더 일반적으로 접하게 됩니다. AHypoPT 사례의 약 75%는 갑상선 수술 또는 기타 두경부 수술 중 부갑상선의 절제 또는 우발적 손상으로 인해 발생합니다. 다른 원인으로는 두경부 종양에 대한 방사선 요법 및 화학 요법 및 약물 독성이 있습니다 1,8. 진단 방법이 업그레이드되고 갑상선 관련 질환에 대한 선별 검사가 증가함에 따라 갑상선 수술 횟수가 증가했습니다. 이로 인해 관련 부갑상선 합병증이 증가했습니다 9,10.
AHypoPT를 더 잘 조사하고 새로운 치료법의 치료 효과를 검증하기 위해서는 안정적인 특성을 가진 쉽게 확립된 동물 모델이 필요합니다. 쥐와 생쥐에서 수행된 부갑상선 절제술(PTX)은 이전 연구에서 보고되었습니다 6,11; 그러나 부갑상선의 크기가 극히 작고 해부학 적 분포의 다양성으로 인해 성공률은 실제로 상대적으로 낮습니다. 따라서, 부갑상선 절제술(thyro-parathyroidectomy, TPTX)(즉, 갑상선과 부갑상선의 완전한 제거)은 일반적으로 부갑상선의 절제를 보장하기 위해 시행된다12. 그러나 그 결과 티록신 수치가 낮아지면 이 동물 모델에 대한 연구가 복잡해질 수 있다13. 약물 자극 및 유전자 편집과 같은 다른 방법으로 확립된 HypoPT 모델은 가장 일반적인 AHypoPT 발병기전을 적절하게 나타낼 수 없습니다. 우리 그룹은 이전에 녹아웃 마우스 모델을 사용하여 부갑상선에 라벨을 붙이고 갑상선과 주변 해부학적 구조를 손상시키지 않고 부갑상선을 제거할 수 있도록 했습니다14,15. 그러나 이 방법은 짝짓기 및 번식 요구 사항으로 인해 더 긴 개발 시간이 필요한 형질전환 마우스 모델을 사용합니다.
따라서 우리는 AHypoPT의 쉽게 생성 할 수있는 모델을 확립하는 것을 목표로했습니다. 이 연구는 탄소 나노입자 라벨링을 사용하는 PTX에 대한 쥐 모델을 설명합니다. 갑상선 수술에 일반적으로 사용되는 50 mg/mL의 탄소나노입자 현탁액은 국소 주사 후 갑상선에 고르게 분포한다16. 갑상선은 검게 변하지만, 부갑상선은 염색되지 않은 채로 남아 있다17따라서 부갑상선과 갑상선을 명확하게 구별하고 갑상선에 영향을 주지 않고 PTX를 시행할 수 있다. 이 방법은 연령대가 다른 쥐에게 적합합니다. 탄소 나노 입자 현탁액의 주입은 안전하며 갑상선 기능에 무시할 수있는 영향을 미친다18. 본 연구에서 생성된 탄소나노입자 표지 PTX 쥐 모델은 4주간의 관찰 기간 동안 유의한 저칼슘혈증 및 고인산혈증 표현형을 보였다. 따라서 이 AHypoPT 모델은 확립하기 쉽고 재현 가능한 표현형을 가지고 있습니다.
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Protocol
이 연구는 쓰촨 대학교 구강 질환 국가 핵심 연구소의 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 승인을 받았습니다. 실험 전에 관련 지역 기관으로부터 허가를 받았습니다. 평균 체중이 200-250g인 8-10주령의 수컷 Sprague-Dawley(SD) 래트 8마리를 본 연구에 사용했습니다. 동물들은 상업적 공급원으로부터 입수하였다 ( 재료의 표 참조). 실험 기간 동안 음식과 물이 임의로 제공되었습니다.
1. 탄소 나노 입자 보조 PTX 쥐 생성을 위한 수술 전 준비
- 2.0%-2.5% 이소플루란 흡입을 사용하여 8-10주령 쥐를 마취한 다음 10mL/kg 체중의 트리브로모에탄올을 복강내(i.p.) 주사합니다. 동공 광 반사의 부재를 테스트하여 충분한 마취 깊이를 보장합니다. 마취 상태에서 건조를 방지하기 위해 눈에 수의사 연고를 사용하십시오.
참고: 생후 8-10주 된 쥐는 성체 쥐로 인식됩니다. 그러나 이 모델링 방법은 생후 7일 정도의 어린 쥐에게 사용할 수 있습니다. - 마취된 SD 랫을 앙와위 자세로 복부 목 부위의 털을 면도하여 수술을 준비합니다. 포비돈 요오드 면봉을 사용하여 수술 부위를 소독합니다( 재료 표 참조).
- 동물을 수술용 커튼으로 덮고( 재료 표 참조) 미생물 오염을 최소화하기 위해 수술 부위를 노출시킵니다.
2. 부갑상선 절제술(PTX)
- 두 귀 사이의 중간 지점에서 시작하여 수술용 메스를 사용하여 꼬리 쪽으로 세로로 2cm 절개를 자릅니다. 날카롭고 구부러진 톱니 모양의 집게로 근막과 지방층을 연속적으로 해부합니다.
- 기관주위 근육을 분리하고 4x-5x 배율의 실체 현미경으로 비교적 뭉툭한 집게를 사용하여 기관을 노출시킵니다.
- 기관 옆에 있는 나비 모양의 갑상선의 왼쪽과 오른쪽 엽을 찾습니다.
- 30G 경사진 바늘이 있는 10μL 주사기를 사용하여 갑상선 막 아래에 1μL의 탄소 나노입자 현탁액( 재료 표 참조)을 주입합니다. 5분 후, 수술 부위를 식염수로 세척하여 갑상선 막을 덮고 있는 여분의 탄소 나노입자 현탁액을 세척합니다.
참고: 권장되는 주사 지점은 혈관이 적은 갑상선 엽의 근심 부분입니다. 탄소 나노 입자 현탁액은 림프절을 감지하는 능력 때문에 갑상선 수술에 일반적으로 사용됩니다. 갑상선을 염색하고 부갑상선을 염색하지 않은 상태로 두면 후자를 쉽게 식별할 수 있습니다. - 부갑상선이 ~ 5 분 안에 염색되지 않은 채로 유지되는 동안 갑상선이 검게 변하는지 확인하십시오. 강조 표시된 부갑상선을 실체 현미경 또는 테이블 램프의 빛을 사용하여 일반 조명 아래에서 관찰하십시오.
참고: 일반적으로 설치류에는 갑상선의 왼쪽과 오른쪽 표면에 두 개의 물방울 모양의 부갑상선이 있습니다. 때로는 추가 부갑상선이 더 멀리 위치할 수 있습니다. - 미세 수술 겸자와 가위로 염색되지 않은 부갑상선을 정확하게 자릅니다. 지혈을 위해 멸균 면봉을 사용하거나 출혈이 더 많으면 젤라틴 스폰지를 사용하십시오.
- 6-0 polyglactin 910 봉합사를 사용하여 중단된 수평 매트리스 봉합사로 근육, 지방층 및 피부를 층별로 닫습니다( 재료 표 참조).
- 가짜 그룹의 경우 2.6 단계를 제외한 수술 전 준비 및 PTX의 모든 단계를 수행하십시오. 쥐를 마취시키고 기관 위의 조직을 분리하십시오. 부갑상선을 찾되 제거하지는 마십시오. PTX 그룹의 쥐와 함께 수술 후 회복 및 관찰을 수행합니다.
3. 수술 후 회복 및 관찰
- 수술 후 쥐를 온도 조절 전기 담요(37°C)에 올려 체온을 유지합니다. 수술 후 진통제로 부프레노르핀 염산염 0.01mg/kg을 12시간마다 피하(s.c) 주사합니다. 쥐가 움직이기 시작하고 기어 다니기 시작할 때 쥐를 멸균 케이지로 옮깁니다.
- 수술 후 2 시간 동안 쥐를 면밀히 관찰하십시오. 쥐를 사육실로 돌려보내고 일상적으로 관찰하고 상태를 기록합니다.
- 수술 7일 후 꼬리 정맥에서 10μL의 혈액을 채취합니다. 적절한 상용 키트를 사용하여 혈청 Ca2+, 혈청 Pi 및 혈청 PTH를 측정합니다( 재료 표 참조). 성공적인 부갑상선 절제술은 가짜 수술 쥐보다 감소된 혈청 이온화 Ca2+ 수준 2 SD를 생성합니다(9.00mmol/L, n = 16).
참고: 통계 및 그래프 소프트웨어( 재료 표 참조)가 통계 분석에 사용되었습니다. Student's t-test를 사용하여 가짜 그룹과 PTX 그룹 간의 혈청 및 소변 매개변수를 비교했습니다. p < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었다. 혈청 및 소변Ca2+ 및 Pi 및 혈청 요소 및 크레아티닌은 제조업체의 지침에 따라 상용 키트로 측정되었습니다( 재료 표 참조). 유형 I 콜라겐 및 오스테오칼신의 혈청 C-텔로펩티드를 시판되는 ELISA 키트로 측정하였다( 재료 표 참조).
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Representative Results
부갑상선의 위치와 수는 처음에 해부 현미경으로 쥐에서 관찰되었습니다. 탄소 나노 입자 주입 전에 갑상선은 반투명 한 붉은 색이었고 부갑상선은 현미경으로 거의 구별 할 수 없었습니다 (그림 1A). 나노 입자 주입 후, 갑상선은 검은 색으로 염색되었고, 부갑상선은 염색되지 않은 채로 남아있었습니다 (그림 1B). 밝은 색의 부갑상선을 조심스럽게 해부한 결과 갑상선은 그대로 유지되었습니다(그림 1C). 일반적으로 부갑상선은 갑상선의 측면 또는 뒤쪽 가장자리에 분포되어 있습니다.
그림 1 : 수술 중 갑상선 및 부갑상선의 모습. (A) 갑상선 땀샘 (흰색 점선)은 기관 측면에 위치합니다. (나,씨) 갑상선은 탄소나노입자 주입 후 검은색 염색(흰색 점선)을 보인 반면, 부갑상선(노란색 점선)은 밝은 색을 나타내었다. 스케일 바 = 2mm. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
수술 전 준비부터 PTX 완료까지의 수술 시간은 약 20분이었습니다. 수술 후 쥐의 4주 생존율은 90.9%(60/66)였다. PTX 쥐는 수술 1주일 후 직감으로 지지되는 것으로 관찰되었습니다. 가짜 운영 대조군은 2.6단계를 제외한 프로토콜의 모든 단계를 수행하여 동시에 설정되었습니다. 살아남은 모든 탄소 나노 입자 표지 된 PTX 쥐는 평균 이온화 된 Ca2+ 수준이 낮았으며, 이는 가짜 수술 그룹보다 2 SD 낮았다. 탄소 나노 입자 표지 PTX 쥐의 부갑상선 기능 저하증 표현형은 혈청 칼슘 감소, 혈청 인산염 상승 및 검출되지 않은 PTH로 입증되었으며 4 주 모니터링 기간 동안 일정하게 유지되었습니다.
수술 후 7일째, 혈청Ca2+ 및 PTH 수치는 가짜 그룹에 비해 PTX 쥐에서 유의하게 감소하였다(Ca2+ = 4.97mmol/L ± 0.99mmol/L 대 8.98mmol/L ± 0.58mmol/L, p < 0.05; PTH = 13.13pg/mL± 6.58v pg/mL s. 313.06pg/mL± 75.24pg/mL, p< 0.05). 혈청 Pi는 PTX 수술 후 유의하게 증가했습니다(Pi = 13.90mmol/L ± 1.77mmol/L 대 7.46mmol/L ± 1.28mmol/L). 요소와 크레아티닌의 혈청 수치는 PTX 수술 7일 후 가짜 그룹과 PTX 그룹 간에 비슷했습니다(요소 = 8.71mmol/L ± 0.81mmol/L 대 8.84mmol/L ± 0.89mmol/L, p > 0.05; 크레아티닌 = 49.03μmol/L ± 13.14μmol/L 대 53.15μmol/L ± 18.28μmol/L, p > 0.05). PTX 수술 후 14일째에 소변Ca2+ 및 Pi 수치가 유의하게 감소했습니다(Ca 2+ = 2.33mmol/L ± 0.53mmol/L 대 7.18mmol/L ±4.27mmol/L, p < 0.05; Pi = 2.40mmol/L ± 1.90mmol/L 대 5.29mmol/L ± 1.52mmol/L, p < 0.05)(그림 2).
그림 2: 탄소 나노입자 보조 부갑상선 절제술 후 혈청 Ca 2+, Pi, PTH, 요소 및 크레아티닌 수치와 소변 Ca2+ 및 Pi 수치. (A) PTX 래트는 4주간의 관찰 기간 동안 안정적인 저칼슘혈증 및 고인산혈증을 나타냈다(N=4). (B) 수술 7일째 PTX 래트에서 혈청 PTH가 검출되지 않았다(N=8). (씨, 디) 요소와 크레아티닌의 혈청 수치는 수술 7일 후 가짜 그룹과 PTX 그룹 간에 비슷했습니다(N = 5). (E,에프) 소변 Ca2+ 및 Pi 수치는 PTX 수술 후 14일에 유의하게 감소했습니다(N = 8). 오차 막대는 표준 편차를 나타냅니다. 약어: PTX = 부갑상선 절제술; Ca++ = 혈청 내 이온화 칼슘; PTH = 부갑상선 호르몬; Pi = 혈청 내 이온화된 인. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
수술 후 7일째(POD7), POD14 및 POD28에서 PTX군과 가짜 군 간에 체중에 유의한 차이가 없었습니다(POD0 체중 = 256.40g ± 4.76g 대 252.56g ± 6.69g, p > 0.05; POD7 체중 = 266.00g ± 6.93g 대 257.44g ± 30.56g, p > 0.05; POD14의 체중 = 294.80g ± 25.90g 대 288.22g ± 37.35g, p > 0.05; POD28의 체중 = 327.75g ± 24.82g 대 324.17g ± 57.97g, p > 0.05). 또한, I형 콜라겐(CTX-1)의 혈청 C-텔로펩티드는 POD28에서 통계적으로 감소했습니다(CTX-1 = 82.03pg/mL ± 8.98pg/mL 대 100.33pg/mL ± 6.36pg/mL, p < 0.05). 혈청 오스테오칼신은 POD28에서 유의미한 차이를 보이지 않았습니다(오스테오칼신 = 913.66pg/mL ± 378.03pg/mL 대 1066.17pg/mL ± 549.80pg/mL, p > 0.05)(그림 3).
그림 3: 체중, I형 콜라겐의 혈중 C-텔로펩티드, 탄소 나노입자 보조 부갑상선 절제술 후 오스테오칼신 수치. (A) POD7, POD14 및 POD28에서 PTX와 가짜 그룹 간에 체중에 유의미한 차이가 없었습니다(N = 14). (B) PTX 래트는 유형 I 콜라겐의 혈청 C-텔로펩티드에서 통계적 감소를 나타냈다(N=4). (C) 혈청 오스테오칼신 수치에는 유의한 차이가 없었다(N=5). 오차 막대는 표준 편차를 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
역학 보고서에 따르면 갑상선 질환의 발견이 크게 증가했으며 그에 따라 수행 된 관련 수술 건수가19,20 건으로 증가했습니다. 수술 후 부갑상선 기능 저하증의 발병률은 약 7.6%8,21이며, 후천성 부갑상선 기능 저하증의 이환율 증가로 인해 이 희귀 질환이 더 많은 연구 관심을 받고 있습니다. 따라서 질병의 발병기전을 조사하고 새로운 치료법의 결과를 테스트하기 위해 적합한 동물 모델을 확립하는 것이 특히 중요합니다. 그러나 현재로서는 제한된 동물 모델이 있습니다. 더욱이 이러한 모델을 생산하는 데 있어 성공률, 생존율 및 수술 절차의 어려움은 여전히 문제로 남아 있습니다. 우리 그룹은 이전에 생쥐에서 두 개의 HypoPT 모델을 보고했습니다. PTHcre+/Rosa-mTmG 마우스에서 부갑상선을 정확하게 해부하기 위해 부갑상선을 형광 표지했으며, 이 방법은 해부학적 분포가 비정상적인 부갑상선을 찾아 수술 성공률을 높이는 데에도 도움이 되었다14. 또 다른 모델링 접근법은 부갑상선 세포가 디프테리아 독소에 의해 표적이 될 수 있는 형질전환 마우스를 사용했습니다. 부갑상선은 수술없이 디프테리아 독소의 전신 투여에 의해 파괴 될 수 있습니다14,15. 그러나, 상기 언급된 방법들은 형질전환 마우스의 광범위한 교배를 필요로 하며, 그 결과 상대적으로 높은 시간 및 비용 요구가 요구된다. 또한, 디프테리아 독소의 전신 투여는 광범위한 부작용을 가질 수 있습니다. 현재, 갑상선-부갑상선 절제술(thyro-parathyroidectomy, TPTX)은 부갑상선의 절제를 보장하기 위해 행해지는 일반적인 시술이다12. 이 기술은 쉽게 수행되고 성공률이 높지만 갑상선 손상은 무시할 수 없습니다. 실험 결과에 대한 갑상선 손상 또는 파괴의 잠재적 영향은 중요 할 수 있으며, 이는 이것이이 분야의 모든 연구의 주요 한계임을 의미합니다21,22.
현재 연구에서는 임상 실습에서 갑상선을 시각화하는 데 일반적으로 사용되는 탄소 나노 입자 현탁액을 주입하여 PTX 수술을 강화했습니다. 이 방법은 안전하고 빠르며 실현 가능성이 높습니다. 갑상선에 검은 얼룩을 효과적으로 표시하고 부갑상선을 염색하지 않은 상태로 둘 수 있으므로 갑상선 손상을 피하면서 부갑상선을 정확하게 식별하고 해부할 수 있습니다. 이러한 표지 방법은 형질전환 마우스의 형광 표지를 사용하여 달성한 것과 동일한 효과를 갖지만, 유전자형에 의해 제한되지는 않는다. 또한, 탄소 나노입자 보조 PTX의 수술 시간은 약 20분으로, 5-ALA 형광 식별에 필요한 2시간 수술에 비해 시간이 절약된다23. 또한, 탄소 나노입자(24)의 생물학적 안전성으로 인해, 이 모델링 방법은 생후 7일 정도의 어린 쥐에게 사용될 수 있다. 수술 중에 주목해야 할 한 가지 중요한 단계는 탄소 나노 입자 현탁액의 투여 량이 쥐의 체중에 따라 조절될 수 있다는 것입니다. 이 연구에 사용된 탄소 나노입자 현탁액의 부피(1μL)는 주사기에서 일부 양이 손실되더라도 성인 쥐의 수술에 충분합니다. 모든 부갑상선의 분포는 초보자가 식별하기 어렵고 많은 연습이 권장됩니다.
현재 연구에는 몇 가지 한계가 있습니다. 예를 들어, 탄소 나노 입자를 사용하여 갑상선에 부착되지 않은 원격 부갑상선을 식별하는 것은 불가능합니다. 수술 후 혈청 매개 변수가 변하지 않으면 일부 원격 부갑상선이 존재하고 제거되지 않았 음을 나타낼 수 있습니다. 부갑상선의 최적 분화 및 식별에 필요한 염색 기간은 측정되지 않았습니다. 그러나 갑상선은 나노 입자 투여 후 5 분 이내에 적절하게 염색되었고 전체 수술 과정에서 얼룩을 유지했습니다. 추적 관찰 기간 동안 갑상선의 기능은 이 연구에서 기록되지 않았습니다. 그러나, 부갑상선을 식별하고 제거하기 위해 형질전환 마우스 모델을 활용한 이전 연구에서는 갑상선 기능이 보존된 것으로 나타났다15. 탄소 나노 입자에 대한 래트의 내성도 본 연구에서 테스트되지 않았다. 그러나, 이들 나노입자는 임상 수술에서 의약품으로 상업적으로 사용되어 왔다16. 일반적으로 이 방법을 통해 연구자는 원하는 유전자형과 수술 시점을 가진 동물을 선택할 수 있습니다. 궁극적으로, 이 접근법은 후천성 부갑상선 기능 저하증에 유용한 쥐 모델을 제공할 것으로 기대됩니다.
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Disclosures
저자는 경쟁하는 재정적 이익이 없다고 선언합니다.
Acknowledgments
이 작업은 NSFC 보조금 81800928, 쓰촨 대학교 서중국 학교/병원 구강학 연구소의 연구 자금(No. RCDWJS2021-1) 및 국가 구강 질환 연구소 오픈 펀딩 보조금 SKLOD-R013의 지원을 받았습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% Sodium Chloride Solution | Kelun Co. Sichuan, China | ||
| 10 µL 30G NanoFil Syringe | WPI | ||
| 6-0 polyglactin 910 suture with needle | Ethicon, Inc | J510G | |
| Calcium LiquiColor test | EKF | 0155-225 | For Ca2+ analysis |
| Carbon Nanoparticles Suspension Injection | Lummy, Chongqing, China | H20073246 | 1 mL : 50 mg |
| Creatinine (Cr) Assay kit ( sarcosine oxidase ) | Jiancheng, Nanjing, China | C011-2-1 | For creatinine analysis |
| Disposable Scalpel | Shinva, China | ||
| Dumstar Biology forceps | Shinva, China | ||
| Micro Dissecting Spring Scissors | Shinva, China | ||
| MicroVue Rat intact PTH ELISA | Immunotopics | 30-2531 | For the measurement of PTH in rat serum |
| Needle Holder | Shinva, China | ||
| Phosphorus Liqui-UV test | EKF | 0830-125 | For Pi analysis |
| Ply gauze | Weian Co. Henan, China | ||
| Povidone-Iodine | Yongan pharmaceutical Co.Ltd. Chengdu, China | ||
| Prism 9.0 (statistics and graphing software) | GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA | https://www.graphpad.com/scientific-software/prism/ | |
| Rat C-telopeptide of type I collagen (CTX-I) ELISA Kit | CUSABIO, Wuhan, China | CSB-E12776r | For CTX-I analysis |
| Rat Osteocalcin/Bone Gla Protein (OT/BGP) ELISA Kit | CUSABIO, Wuhan, China | CSB-E05129r | For osteocalcin analysis |
| Safety Single Edge Razor Blades | American Safety Razor Company | 66-0089 | |
| Sprague-Dawley Rats | 8 to 10 weeks old | ||
| Surgical Incise Drapes | Liangyou Co. Sichuan, China | ||
| Urea Assay Kit | Jiancheng, Nanjing, China | C013-2-1 | For urea analysis |
References
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