Summary
Un modelo animal de hipoparatiroidismo adquirido (HypoPT) es crucial para comprender cómo HypoPT afecta la homeostasis de iones minerales y para verificar la efectividad de nuevos tratamientos. Aquí, se presenta una técnica para generar un modelo de rata de hipoparatiroidismo adquirido (AHypoPT) mediante paratiroidectomía (PTX) utilizando nanopartículas de carbono.
Abstract
El hipoparatiroidismo (HypoPT) es una enfermedad rara que afecta a las glándulas paratiroides que se caracteriza por una secreción reducida o potencia de la hormona paratiroidea (PTH), lo que conduce a altos niveles séricos de fósforo y bajos niveles de calcio sérico. HypoPT más comúnmente resulta de daño accidental a las glándulas o su extirpación durante la tiroides u otra cirugía anterior del cuello. La cirugía paratiroidea / tiroidea se ha vuelto más común en los últimos años, con un aumento correspondiente en la aparición de hipoPT como una complicación postoperatoria. Existe una necesidad crítica de un modelo animal HypoPT para comprender mejor los mecanismos subyacentes a los efectos de HypoPT en la homeostasis de iones minerales y para verificar la efectividad terapéutica de nuevos tratamientos. Aquí, se informa que una técnica crea HypoPT adquirido en ratas macho mediante la realización de paratiroidectomía (PTX) utilizando nanopartículas de carbono. El modelo de rata muestra una gran promesa sobre los modelos de ratón de hipoparatiroidismo. Es importante destacar que la región de unión al receptor de PTH humana tiene una similitud de secuencia del 84,2% con la de la rata, que es mayor que la similitud del 73,7% compartida con los ratones. Además, los efectos del estrógeno, que pueden afectar la vía de señalización del receptor PTH/PTHrP, no se han investigado completamente en ratas macho. Las nanopartículas de carbono son trazadores linfáticos que tiñen de negro los ganglios linfáticos tiroideos sin afectar su función, pero no tiñen las glándulas paratiroides, lo que las hace fáciles de identificar y eliminar. En este estudio, los niveles séricos de PTH fueron indetectables después de PTX, y esto resultó en hipocalcemia e hiperfosfatemia significativas. Por lo tanto, el estado clínico de HypoPT postoperatorio se puede representar notablemente en el modelo de rata. Por lo tanto, el PTX asistido por nanopartículas de carbono puede servir como un modelo extraordinariamente efectivo y fácilmente implementable para estudiar la patogénesis, el tratamiento y el pronóstico de HypoPT.
Introduction
La hormona paratiroidea (PTH) es secretada por las glándulas paratiroides. Es un modulador importante del balance de calcio, mantiene el metabolismo del fosfato y participa en el recambio óseo 1,2. El hipoparatiroidismo (HypoPT) se manifiesta como una disminución de la secreción o pérdida funcional de PTH. Es un trastorno endocrino raro, con una prevalencia de aproximadamente 9-37 por 100.000 años-persona 3,4,5. HypoPT se caracteriza por una disminución de la PTH sérica y los niveles de calcio acompañados de un aumento del fósforo sérico 6,7. La hipoPT se clasifica según su causa: hipoparatiroidismo adquirido (AHypoPT) o hipoparatiroidismo idiopático (IHypoPT)8. AHypoPT se encuentra más comúnmente en la práctica clínica; alrededor del 75% de los casos de AHypoPT son causados por resección o lesión accidental de las glándulas paratiroides durante la cirugía de tiroides u otras cirugías de cabeza y cuello. Otras causas incluyen radioterapia y quimioterapia para tumores de cabeza y cuello y toxicidad farmacológica 1,8. Los métodos de diagnóstico mejorados y un aumento en la detección de enfermedades asociadas a la glándula tiroides han aumentado el número de operaciones quirúrgicas de la glándula tiroides. Esto ha llevado a un aumento correspondiente en las complicaciones relacionadas con la glándula paratiroides 9,10.
Se necesitan modelos animales fácilmente establecidos con características estables para investigar mejor AHypoPT y verificar la efectividad terapéutica de nuevos tratamientos. La paratiroidectomía (PTX) realizada en ratas y ratones ha sido reportada en estudios previos 6,11; Sin embargo, debido al tamaño extremadamente pequeño de las glándulas paratiroides y la variabilidad en su distribución anatómica, la tasa de éxito es relativamente baja en la práctica. Así, la tiro-paratiroidectomía (TPTX) (es decir, la extirpación total de las glándulas tiroides y paratiroides) generalmente se realiza para asegurar la resección de las glándulas paratiroides12. Sin embargo, los niveles bajos de tiroxina resultantes pueden complicar los estudios con este modelo animal13. Los modelos de hipoPT establecidos por otros métodos, como la estimulación farmacológica y la edición de genes, no pueden representar adecuadamente la patogénesis más común de AHypoPT. Nuestro grupo utilizó previamente modelos de ratón knockout para etiquetar las glándulas paratiroides y permitir la extirpación de las glándulas paratiroides sin dañar las glándulas tiroides y las estructuras anatómicas circundantes14,15. Sin embargo, este método utiliza modelos de ratones transgénicos, que requieren un tiempo de desarrollo más largo debido a los requisitos de apareamiento y reproducción.
Por lo tanto, nuestro objetivo fue establecer un modelo fácilmente generado de AHypoPT. Este estudio describe un modelo de rata para PTX utilizando el etiquetado de nanopartículas de carbono. Una suspensión de nanopartículas de carbono de 50 mg/mL, que se usa comúnmente en cirugía de tiroides, se distribuye uniformemente en las glándulas tiroides después de la inyección local16. Las glándulas tiroides se vuelven negras, pero las glándulas paratiroides se dejan sin teñir17, distinguiendo así claramente las glándulas paratiroides de las glándulas tiroides y permitiendo que el PTX se realice sin afectar las glándulas tiroides. Este método es adecuado para ratas de diferentes edades. La inyección de la suspensión de nanopartículas de carbono es segura y tiene un efecto insignificante sobre la función tiroidea18. El modelo de rata PTX marcado con nanopartículas de carbono generado en este estudio mostró fenotipos significativos de hipocalcemia e hiperfosfatemia durante el período de observación de 4 semanas. Por lo tanto, este modelo AHypoPT es fácil de establecer y tiene un fenotipo reproducible.
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Protocol
Este estudio fue aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales en el Laboratorio Estatal Clave de Enfermedades Orales de la Universidad de Sichuan. Se obtuvo permiso de las agencias locales pertinentes antes del experimento. Para el presente estudio se utilizaron ocho ratas Sprague-Dawley (SD) macho de 8-10 semanas de edad, con un peso promedio de 200-250 g. Los animales fueron obtenidos de una fuente comercial (ver Tabla de Materiales). Se proporcionaron alimentos y agua ad libitum durante todo el período experimental.
1. Preparación preoperatoria para la generación de ratas PTX asistidas por nanopartículas de carbono
- Anestesiar a las ratas de 8-10 semanas de edad usando inhalación de isoflurano al 2,0% -2,5%, seguida de una inyección intraperitoneal (i.p.) de tribromoetanol a 10 mL/kg de peso corporal. Garantizar una profundidad suficiente de anestesia probando la ausencia del reflejo lumínico pupilar. Use ungüento veterinario en los ojos para prevenir la sequedad mientras está bajo anestesia.
NOTA: Las ratas que tienen entre 8 y 10 semanas de edad son reconocidas como ratas adultas. Sin embargo, este método de modelado se puede utilizar en ratas de tan solo 7 días de edad. - Preparar a las ratas SD anestesiadas para la cirugía afeitando el pelaje de la región ventral del cuello en posición supina. Desinfecte el área operatoria con bolas de algodón de povidona yodada (consulte la Tabla de materiales).
- Cubra al animal con cortinas quirúrgicas (ver Tabla de materiales) y exponga la región quirúrgica, con el objetivo de minimizar la contaminación microbiana.
2. Paratiroidectomía (PTX)
- Comience en el punto medio entre las dos orejas y corte una incisión de 2 cm longitudinalmente hacia la cola con un bisturí quirúrgico. Diseccionar la fascia y la capa de grasa sucesivamente con pinzas afiladas, curvas y dentadas.
- Separe los músculos paratraqueales y exponga la tráquea usando pinzas relativamente romas bajo un microscopio estereoscópico con un aumento de 4x-5x.
- Localice los lóbulos izquierdo y derecho de las glándulas tiroides en forma de mariposa al lado de la tráquea.
- Inyecte 1 μL de la suspensión de nanopartículas de carbono (consulte la Tabla de materiales) debajo de la membrana de las glándulas tiroides utilizando una jeringa de 10 μL con una aguja biselada de 30 G. Después de 5 minutos, irrigar la región operatoria con solución salina para limpiar la suspensión de nanopartículas de carbono adicional que cubre la membrana de la glándula tiroides.
NOTA: El punto de inyección recomendado es la porción mesial del lóbulo de la glándula tiroides, que tiene menos vasos sanguíneos. Una suspensión de nanopartículas de carbono se usa comúnmente en la cirugía de tiroides debido a su capacidad para detectar los ganglios linfáticos. Teñir las glándulas tiroides y dejar las glándulas paratiroides sin teñir facilita la identificación de estas últimas. - Verifique que las glándulas tiroides se vuelvan negras mientras que las glándulas paratiroides permanecen sin teñir en ~ 5 minutos. Observe las glándulas paratiroides resaltadas bajo luz ordinaria usando la luz de un microscopio estereoscópico o una lámpara de mesa.
NOTA: Por lo general, los roedores tienen dos glándulas paratiroides en forma de gota ubicadas en las superficies izquierda y derecha de las glándulas tiroides. Ocasionalmente, las glándulas paratiroides adicionales pueden estar ubicadas más lejos. - Corte con precisión las glándulas paratiroides sin teñir con pinzas y tijeras de microcirugía. Use bolas de algodón estériles para la hemostasia o una esponja de gelatina si hay más sangrado.
- Cierre los músculos, las capas de grasa y la piel, capa por capa, con una sutura horizontal interrumpida del colchón usando 6-0 suturas de poliglactina 910 (consulte la Tabla de materiales).
- Para el grupo simulado, realice todos los pasos de la preparación preoperatoria y PTX excepto el paso 2.6. Anestesiar a las ratas y separar los tejidos por encima de la tráquea. Localice las glándulas paratiroides, pero no las extirpe. Realizar recuperación postoperatoria y observación junto con las ratas del grupo PTX.
3. Recuperación postoperatoria y observación
- Después de la cirugía, coloque las ratas en una manta eléctrica termostática (37 ° C) para mantener su temperatura corporal. Inyectar clorhidrato de buprenorfina 0,01 mg/kg por vía subcutánea (s.c) cada 12 h como analgesia postoperatoria. Transfiera las ratas a una jaula estéril cuando comiencen a moverse y traten de gatear.
- Observe de cerca a las ratas después de la operación durante 2 h. Devuelva las ratas a la sala de cría, obsérvelas rutinariamente y registre su estado.
- Extraiga 10 μL de sangre de la vena de la cola 7 días después de la cirugía. Mida el Ca2+ sérico, el Pi sérico y la PTH sérica utilizando kits comerciales apropiados (consulte la Tabla de materiales). Una paratiroidectomía exitosa produce una reducción sérica ionizada de Ca2+ nivel 2 SD menor que la de las ratas operadas con simulacro (9.00 mmol / L, n = 16).
NOTA: Para el análisis estadístico se utilizó un software de estadísticas y gráficos (ver Tabla de materiales). Se utilizó una prueba t de Student para comparar los parámetros séricos y urinarios entre los grupos simulado y PTX. p < 0,05 se consideró estadísticamente significativo. El Ca2+ y Pi sérico y la urea y creatinina en suero se midieron con kits comerciales de acuerdo con las instrucciones del fabricante (ver Tabla de materiales). El telopéptido C sérico de colágeno tipo I y osteocalcina se midió con kits ELISA disponibles comercialmente (ver Tabla de materiales).
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Representative Results
Las ubicaciones y el número de glándulas paratiroides se observaron inicialmente en ratas bajo un microscopio de disección. Antes de la inyección de nanopartículas de carbono, las glándulas tiroides eran de un color rojo translúcido, y las glándulas paratiroides apenas se distinguían bajo el microscopio (Figura 1A). Después de la inyección de nanopartículas, las glándulas tiroides se tiñeron de negro, mientras que las glándulas paratiroides permanecieron sin teñir (Figura 1B). La disección cuidadosa de las glándulas paratiroides de color claro dejó intactas las glándulas tiroides (Figura 1C). En general, las glándulas paratiroides se distribuyeron sobre los bordes lateral o posterior de las glándulas tiroides.
Figura 1: La apariencia de las glándulas tiroides y paratiroides durante los procedimientos quirúrgicos. (A) Las glándulas tiroides (línea punteada blanca) se encuentran lateralmente a la tráquea. (B,C) Las glándulas tiroides mostraron tinción negra (línea punteada blanca) después de la inyección de las nanopartículas de carbono, mientras que las glándulas paratiroides (línea punteada amarilla) exhibieron un color claro. Barras de escala = 2 mm. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
El tiempo de operación desde la preparación preoperatoria hasta la finalización de PTX fue de aproximadamente 20 min. La tasa de supervivencia a las 4 semanas de las ratas postoperatorias fue del 90,9% (60/66). Se observó que las ratas PTX estaban jorobadas 1 semana después de la cirugía. Se estableció simultáneamente un grupo de control operado por simulacro realizando todos los pasos del protocolo, excepto el paso 2.6. Todas las ratas PTX marcadas con nanopartículas de carbono supervivientes tenían un nivel medio de Ca2+ ionizado más bajo, que era 2 SD más bajo que el del grupo operado con simulación. El fenotipo de hipoparatiroidismo en las ratas PTX marcadas con nanopartículas de carbono, evidenciado por calcio sérico reducido, fosfato sérico elevado y PTH no detectada, se mantuvo estable durante el período de monitoreo de 4 semanas.
A los 7 días después de la cirugía, los niveles séricos de Ca 2+ y PTH se redujeron significativamente en las ratas PTX en comparación con el grupo simulado (Ca 2+ = 4,97 mmol/L ± 0,99 mmol/L vs. 8,98 mmol/L ± 0,58 mmol/L, p < 0,05; PTH = 13,13 pg/mL ± 6,58 v pg/mL s. 313,06 pg/mL ± 75,24 pg/mL, p < 0,05). La Pi sérica aumentó significativamente después de la cirugía PTX (Pi = 13,90 mmol/L ± 1,77 mmol/L vs. 7,46 mmol/L ± 1,28 mmol/L). Los niveles séricos de urea y creatinina fueron comparables entre los grupos simulado y PTX 7 días después de la cirugía PTX (urea = 8,71 mmol/L ± 0,81 mmol/L vs. 8,84 mmol/L ± 0,89 mmol/L, p > 0,05; creatinina = 49,03 μmol/L ± 13,14 μmol/L vs. 53,15 μmol/L ± 18,28 μmol/L, p > 0,05). A los 14 días después de la cirugía de PTX, los niveles urinarios de Ca 2+ y Pi se redujeron significativamente (Ca 2+ = 2,33 mmol/L ± 0,53 mmol/L vs. 7,18 mmol/L ±4,27 mmol/L, p < 0,05; Pi = 2,40 mmol/L ± 1,90 mmol/L vs. 5,29 mmol/L ± 1,52 mmol/L, p < 0,05) (Figura 2).
Figura 2: Niveles séricos de Ca 2+, Pi, PTH, urea y creatinina y niveles urinarios de Ca2+ y Pi después de la paratiroidectomía asistida por nanopartículas de carbono. (A) Las ratas PTX exhibieron hipocalcemia e hiperfosfatemia estables durante el período de observación de 4 semanas (N = 4). (B) La PTH sérica fue indetectable en las ratas PTX 7 días después de la operación (N = 8). (C,D) Los niveles séricos de urea y creatinina fueron comparables entre los grupos simulado y PTX 7 días después de la cirugía (N = 5). (E,F) Los niveles urinarios de Ca2+ y Pi se redujeron significativamente 14 días después de la cirugía de PTX (N = 8). Las barras de error indican la desviación estándar. Abreviaturas: PTX = paratiroidectomía; Ca++ = calcio ionizado en suero; PTH = hormona paratiroidea; Pi = fósforo ionizado en suero. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
No hubo diferencias significativas en el peso corporal entre los grupos PTX y simulado en el día postoperatorio 7 (POD7), POD14 y POD28 (peso corporal en POD0 = 256.40 g ± 4.76 g vs. 252.56 g ± 6.69 g, p > 0.05; peso corporal en POD7 = 266.00 g ± 6.93 g vs. 257.44 g ± 30.56 g, p > 0.05; peso corporal en POD14 = 294.80 g ± 25.90 g vs. 288.22 g ± 37.35 g, p > 0,05; peso corporal en POD28 = 327,75 g ± 24,82 g vs. 324,17 g ± 57,97 g, p > 0,05). Además, el telopéptido C sérico de colágeno tipo I (CTX-1) disminuyó estadísticamente en POD28 (CTX-1 = 82,03 pg/mL ± 8,98 pg/mL vs. 100,33 pg/mL ± 6,36 pg/mL, p < 0,05). La osteocalcina sérica no mostró diferencias significativas en la DPM28 (osteocalcina = 913,66 pg/mL ± 378,03 pg/mL vs. 1066,17 pg/mL ± 549,80 pg/mL, p > 0,05) (Figura 3).
Figura 3: Peso corporal, telopéptido C en sangre de colágeno tipo I y niveles de osteocalcina después de la paratiroidectomía asistida por nanopartículas de carbono. (A) No hubo diferencias significativas en el peso corporal entre los grupos PTX y simulado en POD7, POD14 y POD28 (N = 14). (B) Las ratas PTX mostraron una disminución estadística en el telopéptido C sérico del colágeno tipo I (N = 4). (C) No hubo diferencias significativas en los niveles séricos de osteocalcina (N = 5). Las barras de error indican la desviación estándar. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Discussion
Los informes epidemiológicos indican que la detección de enfermedades tiroideas ha aumentado significativamente, y el número de cirugías relacionadas realizadas ha aumentado en consecuencia19,20. La tasa de incidencia de hipoparatiroidismo posquirúrgico es de aproximadamente 7,6%8,21, mientras que el aumento de la morbilidad del hipoparatiroidismo adquirido ha provocado que esta enfermedad rara gane mayor atención de la investigación. Por lo tanto, es particularmente importante establecer un modelo animal adecuado para investigar la patogénesis de la enfermedad, así como para probar los resultados de nuevos tratamientos terapéuticos. Sin embargo, en la actualidad, hay modelos animales limitados disponibles. Además, la tasa de éxito, la tasa de supervivencia y la dificultad de los procedimientos quirúrgicos para producir tales modelos siguen siendo problemáticas. Nuestro grupo ha reportado previamente dos modelos de HypoPT en ratones. En ratones PTHcre+/Rosa-mTmG, las glándulas paratiroides fueron marcadas fluorescentemente para ayudar a diseccionar con precisión las glándulas paratiroides, y este método también fue útil para encontrar glándulas paratiroides con distribución anatómica anormal para mejorar la tasa de éxito de la cirugía14. Otro enfoque de modelado utilizó ratones transgénicos, en los que las células de la glándula paratiroides podrían ser atacadas por la toxina de la difteria. Las glándulas paratiroides podrían ser destruidas por la administración sistémica de la toxina diftérica sin necesidad de cirugía14,15. Sin embargo, los métodos mencionados anteriormente requieren un cruce extensivo de ratones transgénicos, lo que resulta en requisitos de tiempo y costo relativamente altos. Además, la administración sistémica de toxina diftérica puede tener efectos secundarios generalizados. Actualmente, la tiro-paratiroidectomía (TPTX) es el procedimiento habitual realizado para asegurar la resección de las glándulas paratiroides12. Aunque la técnica se realiza fácilmente y tiene una alta tasa de éxito, no se puede ignorar el daño a las glándulas tiroides. El impacto potencial de la lesión o destrucción de las glándulas tiroides en los resultados experimentales podría ser significativo, lo que significa que esta es una limitación importante de todos los estudios en este campo21,22.
En el estudio actual, se inyectó una suspensión de nanopartículas de carbono, comúnmente utilizada para visualizar las glándulas tiroides en la práctica clínica, para mejorar la cirugía PTX. Este método es seguro, rápido y altamente factible. Puede etiquetar eficazmente las glándulas tiroides con una mancha negra y dejar las glándulas paratiroides sin teñir, lo que permite la identificación precisa y la disección de las glándulas paratiroides al tiempo que evita lesiones en las glándulas tiroides. Este método de etiquetado tiene el mismo efecto que el logrado utilizando el etiquetado fluorescente de ratones transgénicos, pero no está limitado por el genotipo. Además, el tiempo quirúrgico del PTX asistido por nanopartículas de carbono es de alrededor de 20 minutos, lo que ahorra tiempo en comparación con la cirugía de 2 h requerida para la identificación de fluorescencia 5-ALA23. Además, debido a la bioseguridad de las nanopartículas de carbono24, este método de modelado se puede utilizar en ratas de tan solo 7 días de edad. Un paso crítico a tener en cuenta durante la cirugía es que la dosis de la suspensión de nanopartículas de carbono se puede ajustar de acuerdo con el peso de las ratas. El volumen de suspensión de nanopartículas de carbono utilizado en este estudio (1 μL) es suficiente para la cirugía en ratas adultas, incluso si se pierde cierta cantidad en la jeringa. La distribución de todas las glándulas paratiroides es difícil de identificar para los principiantes, y se recomienda mucha práctica.
El estudio actual tiene algunas limitaciones. Por ejemplo, es imposible identificar glándulas paratiroides remotas no unidas a las tiroides utilizando nanopartículas de carbono. Si los parámetros séricos permanecen sin cambios después de la cirugía, puede indicar que algunas glándulas paratiroides remotas estaban presentes y no se extirparon. No se midió el período de tinción requerido para la diferenciación e identificación óptimas de las glándulas paratiroides; Sin embargo, las glándulas tiroides se tiñeron correctamente dentro de los 5 minutos posteriores a la administración de nanopartículas y retuvieron la tinción durante todo el procedimiento quirúrgico. El funcionamiento de las glándulas tiroides durante el período de seguimiento no se registró en este estudio. Sin embargo, en nuestro estudio anterior, que involucró la utilización de un modelo de ratón transgénico para identificar y eliminar las glándulas paratiroides, se demostró que la función de la glándula tiroides estaba preservada15. La tolerancia de las ratas a las nanopartículas de carbono tampoco se probó en este estudio; Sin embargo, estas nanopartículas han sido utilizadas comercialmente como productos farmacéuticos en cirugías clínicas16. En general, este método permite a los investigadores elegir un animal con un genotipo deseado y un punto de tiempo de operación. En última instancia, se espera que este enfoque proporcione modelos útiles de ratas para el hipoparatiroidismo adquirido.
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Disclosures
Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.
Acknowledgments
Este trabajo fue apoyado por la subvención NSFC 81800928, la financiación de la investigación de la Escuela / Hospital de Estomatología de la Universidad de Sichuan de China Occidental (No. RCDWJS2021-1) y la subvención de financiación abierta del Laboratorio Estatal Clave de Enfermedades Orales SKLOD-R013.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% Sodium Chloride Solution | Kelun Co. Sichuan, China | ||
| 10 µL 30G NanoFil Syringe | WPI | ||
| 6-0 polyglactin 910 suture with needle | Ethicon, Inc | J510G | |
| Calcium LiquiColor test | EKF | 0155-225 | For Ca2+ analysis |
| Carbon Nanoparticles Suspension Injection | Lummy, Chongqing, China | H20073246 | 1 mL : 50 mg |
| Creatinine (Cr) Assay kit ( sarcosine oxidase ) | Jiancheng, Nanjing, China | C011-2-1 | For creatinine analysis |
| Disposable Scalpel | Shinva, China | ||
| Dumstar Biology forceps | Shinva, China | ||
| Micro Dissecting Spring Scissors | Shinva, China | ||
| MicroVue Rat intact PTH ELISA | Immunotopics | 30-2531 | For the measurement of PTH in rat serum |
| Needle Holder | Shinva, China | ||
| Phosphorus Liqui-UV test | EKF | 0830-125 | For Pi analysis |
| Ply gauze | Weian Co. Henan, China | ||
| Povidone-Iodine | Yongan pharmaceutical Co.Ltd. Chengdu, China | ||
| Prism 9.0 (statistics and graphing software) | GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA | https://www.graphpad.com/scientific-software/prism/ | |
| Rat C-telopeptide of type I collagen (CTX-I) ELISA Kit | CUSABIO, Wuhan, China | CSB-E12776r | For CTX-I analysis |
| Rat Osteocalcin/Bone Gla Protein (OT/BGP) ELISA Kit | CUSABIO, Wuhan, China | CSB-E05129r | For osteocalcin analysis |
| Safety Single Edge Razor Blades | American Safety Razor Company | 66-0089 | |
| Sprague-Dawley Rats | 8 to 10 weeks old | ||
| Surgical Incise Drapes | Liangyou Co. Sichuan, China | ||
| Urea Assay Kit | Jiancheng, Nanjing, China | C013-2-1 | For urea analysis |
References
- Bilezikian, J. P., et al. Hypoparathyroidism in the adult: Epidemiology, diagnosis, pathophysiology, target-organ involvement, treatment, and challenges for future research. Journal of Bone and Mineral Research. 26 (10), 2317-2337 (2011).
- Bilezikian, J. P.
- Underbjerg, L., Sikjaer, T., Mosekilde, L., Rejnmark, L. Postsurgical hypoparathyroidism-Risk of fractures, psychiatric diseases, cancer, cataract, and infections. Journal of Bone and Mineral Research. 29 (11), 2504-2510 (2014).
- Underbjerg, L., Sikjaer, T., Mosekilde, L., Rejnmark, L. The epidemiology of nonsurgical hypoparathyroidism in Denmark: A nationwide case finding study. Journal of Bone and Mineral Research. 30 (9), 1738-1744 (2015).
- Astor, M. C., et al. Epidemiology and health-related quality of life in hypoparathyroidism in Norway. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 101 (8), 3045-3053 (2016).
- Rodriguez-Ortiz, M. E., et al. Calcium deficiency reduces circulating levels of FGF23. Journal of the American Society of Nephrology. 23 (7), 1190-1197 (2012).
- Davies, B. M., Gordon, A. H., Mussett, M. V. A plasma calcium assay for parathyroid hormone, using parathyroidectomized rats. The Journal of Physiology. 125 (2), 383-395 (1954).
- Clarke, B. L., et al.
- Liu, Y., Shan, Z. Expert consensus on diagnosis and treatment for elderly with thyroid diseases in China. Aging Medicine. 4 (2), 70-92 (2021).
- Sulejmanovic, M., Cickusic, A. J., Salkic, S., Bousbija, F. M. Annual incidence of thyroid disease in patients who first time visit department for thyroid diseases in Tuzla Canton. Materia Socio-Medica. 31 (2), 130-134 (2019).
- Liao, H. W., et al. Relationship between fibroblast growth factor 23 and biochemical and bone histomorphometric alterations in a chronic kidney disease rat model undergoing parathyroidectomy. PloS One. 10 (7), 0133278 (2015).
- Russell, P. S., Gittes, R. F. Parathyroid transplants in rats: A comparison of their survival time with that of skin grafts. The Journal of Experimental Medicine. 109 (6), 571-588 (1959).
- Sakai, A., et al. Osteoclast development in immobilized bone is suppressed by parathyroidectomy in mice. Journal of Bone and Mineral Metabolism. 23 (1), 8-14 (2005).
- Bi, R., Fan, Y., Luo, E., Yuan, Q., Mannstadt, M. Two techniques to create hypoparathyroid mice: parathyroidectomy using GFP glands and diphtheria-toxin-mediated parathyroid ablation. Journal of Visualized Experiments. (121), e55010 (2017).
- Bi, R., et al. Diphtheria toxin- and GFP-based mouse models of acquired hypoparathyroidism and treatment with a long-acting parathyroid hormone analog. Journal of Bone and Mineral Research. 31 (5), 975-984 (2016).
- Huang, Y., et al. Carbon nanoparticles suspension injection for photothermal therapy of xenografted human thyroid carcinoma in vivo. MedComm. 1 (2), 202-210 (2020).
- Zhang, R. J., Chen, Y. L., Deng, X., Yang, H. Carbon nanoparticles for thyroidectomy and central lymph node dissection for thyroid cancer. The American Surgeon. , (2022).
- Long, M., et al. A carbon nanoparticle lymphatic tracer protected parathyroid glands during radical thyroidectomy for papillary thyroid non-microcarcinoma. Surgical Innovation. 24 (1), 29-34 (2017).
- Li, Y., et al. Efficacy and safety of long-term universal salt iodization on thyroid disorders: Epidemiological evidence from 31 provinces of mainland China. Thyroid. 30 (4), 568-579 (2020).
- Powers, J., Joy, K., Ruscio, A., Lagast, H. Prevalence and incidence of hypoparathyroidism in the United States using a large claims database. Journal of Bone and Mineral Research. 28 (12), 2570-2576 (2013).
- Zihao, N., et al. Promotion of allogeneic parathyroid cell transplantation in rats with hypoparathyroidism. Gland Surgery. 10 (12), 3403-3414 (2021).
- Goncu, B., et al. Xenotransplantation of microencapsulated parathyroid cells as a potential treatment for autoimmune-related hypoparathyroidism. Experimental and Clinical Transplantation. , (2021).
- Jung, S. Y., et al. Standardization of a physiologic hypoparathyroidism animal model. PLoS One. 11 (10), 0163911 (2016).
- Chen, W., Lv, Y., Xie, R., Xu, D., Yu, J. Application of lymphatic mapping to recognize and protect parathyroid in thyroid carcinoma surgery by using carbon nanoparticles. Journal of Clinical Otorhinolaryngology, Head, and Neck Surgery. 28 (24), 1918-1920 (1924).
