Summary
Cet article décrit en détail les procédures opératoires et les précautions à prendre lors de la Du-moxibustion dans le traitement de la spondylarthrite ankylosante chez la souris expérimentale.
Abstract
La spondylarthrite ankylosante (SA) est une forme d’arthrite qui s’aggrave progressivement et qui touche principalement le squelette axial. Cette maladie touche principalement la colonne vertébrale et l’articulation sacro-iliaque. La fusion de la colonne vertébrale et de l’articulation sacro-iliaque peut se produire à un stade avancé de la maladie, entraînant une raideur de la colonne vertébrale et une cyphose, ainsi que des difficultés à marcher, ce qui affecte gravement la qualité du travail et des activités de la vie quotidienne et impose un lourd fardeau au patient, à la famille et à la société. Une attention croissante a été accordée à la non-pharmacothérapie en tant que traitement alternatif de la SA. La moxibustion est une technique thérapeutique ancienne utilisée en médecine traditionnelle chinoise (MTC). La thérapie de du-moxibustion, un traitement externe unique et innovant développé sur la base de la moxibustion ordinaire, a un effet thérapeutique certain sur la SA. La damoxibustion combine habilement les techniques compatibles de la MTC pour intégrer les méridiens, les points d’acupuncture, la phytothérapie chinoise et la moxibustion. Cet article décrit en détail les procédures opératoires et les précautions à prendre lors de la Du-moxibustion chez les souris expérimentales afin de fournir une base expérimentale pour l’étude du mécanisme de la Du-moxibustion dans le traitement de la SA.
Introduction
La spondylarthrite ankylosante (SA) est une forme d’arthrite qui s’aggrave progressivement et qui touche principalement le squelette axial. Selon la dernière enquête épidémiologique, ~0,01 % à 1,8 % des personnes dans le monde souffrent de cette maladie1, dont la plupart sont de jeunes hommes (le rapport hommes/femmes est de ~2-3 :1)2. L’incidence de la SA dans la population chinoise est de 0,2 % à 0,4 %. Cette maladie touche principalement la colonne vertébrale et l’articulation sacro-iliaque. La fusion de la colonne vertébrale et de l’articulation sacro-iliaque peut se produire dans les derniers stades de la maladie, entraînant une raideur de la colonne vertébrale et une cyphose, ainsi que des difficultés à marcher, ce qui affecte gravement la qualité du travail et des activités de la vie quotidienne et impose un lourd fardeau au patient, à sa famille et à la société1. À l’heure actuelle, il n’existe pas de solution définitive pour la SA, et les traitements fournis, tant pharmacologiques que non pharmacologiques, visent principalement à soulager la douleur, à ralentir la progression de la maladie et à améliorer la qualité de vie. Au cours des dernières années, les options pharmacothérapeutiques ayant ététrès limitées3, une attention croissante a été accordée à la non-pharmacothérapie, qui est devenue une thérapie alternative pour la SA. En Chine, les patients préfèrent souvent un traitement externe consistant en la médecine traditionnelle chinoise (MTC), qui a des effets secondaires mineurs et une grande commodité pendant le traitement.
La moxibustion est une technique thérapeutique ancienne utilisée en MTC. La durobustion est une technique de traitement externe consistant en une « moxibustion médicamenteuse avec de la mousse » sur le segment rachidien du méridien du Du. Il est principalement utilisé dans le traitement de la spondylarthrite ankylosante et a démontré son innocuité et son efficacité. Par rapport à la moxibustion ordinaire, la Du-moxibustion présente les caractéristiques d’une large zone de moxibustion, d’un grand cône de moxa, d’une forte puissance de feu et d’une température élevée4. Une revue systématique et une méta-analyse suggèrent que la moxibustion est un traitement complémentaire efficace pour la SA5. Une étude récente a confirmé que les symptômes cliniques et certains facteurs inflammatoires des patients atteints de SA étaient améliorés par la moxibustion6. Des études ont révélé que la Du-moxibustion peut augmenter le contenu cérébral en β-endorphine et exercer un effet analgésique central7, réguler à la baisse l’expression du gène HLA-B27 8 et retarder le taux de récurrence de la SA. La du-moxibustion a également un effet d’amélioration sur la progression de la SA en diminuant l’indice inflammatoire VS (ESR) et les niveaux de protéine C-réactive (CRP), de peptide C-terminal de collagène de type I (CTX-I) et de protéine Dickkopf1 (DKK1)9,10.
Une autre étude clinique a montré que la Du-moxibustion peut ajuster davantage les sous-ensembles désordonnés de lymphocytes T, Ig, et compléter C3 pour équilibrer le mécanisme immunitaire11. En termes de métabolisme osseux, la moxibustion peut inhiber l’augmentation de la phosphatase alcaline sérique (ALP) et du phosphore sérique (S-P), augmenter le calcium sérique (S-Ca), la densité minérale osseuse (DMO) et la solidité osseuse12. De plus, la Du-moxibustion peut réparer la fonction de la colonne vertébrale en plusieurs points pour soulager les symptômes de fatigue chez les patients atteints de SA13. Certaines études animales ont révélé le mécanisme potentiel de la moxibustion dans le traitement de la SA. Une étude a indiqué que la moxibustion améliorait considérablement l’état de santé général, réduisait les niveaux d’épaisseur des pattes et diminuait les niveaux d’IL-1β, de PGE2, d’IL-6 et de TNF-α dans les échantillons de tissu ligamentaire de la colonne vertébrale. L’analyse des voies métaboliques a permis d’établir un lien entre les métabolites identifiés et le cycle du TCA, ainsi que le métabolisme des lipides, des acides aminés, de la flore intestinale et des purines14. Une autre étude a montré que la moxibustion supprimait l’expression des cytokines pro-inflammatoires, l’IL-1β, le TNF-α, l’IL-17 et l’IL-6 ; réduit les niveaux d’ARNm de RANKL, RANK, ALP et OCN ; et amélioré les caractéristiques histopathologiques chez les souris AS15.
Bien que ces études suggèrent que la moxibustion peut être efficace dans le traitement de la SA, des recherches supplémentaires sont nécessaires pour confirmer ces résultats et déterminer le protocole de traitement optimal pour la moxibustion chez les patients atteints de SA. Notre équipe a créé et modifié la thérapie de moxibustion basée sur la théorie de base et le fonctionnement pratique de la moxibustion traditionnelle chinoise, qui a été largement réalisée et appliquée dans la pratique clinique chinoise depuis plus de 35 ans. Bien qu’il existe peu d’études de haute qualité sur le traitement de la SA par la Du-moxibustion, son indication dans le traitement de la SA a été étayée par des preuves. Cependant, le mécanisme de traitement de la SA avec la Du-moxibustion mérite une étude plus approfondie. L’étude animale est une méthode importante pour explorer le mécanisme de la Du-moxibustion dans le traitement de la SA. L’opération clinique de la Du-moxibustion est relativement mature mais rarement utilisée dans l’étude du mécanisme en expérimentation animale. Cet article décrit en détail le fonctionnement et les précautions à prendre lors de la Du-moxibustion dans le traitement des souris expérimentales SA.
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Protocol
Toutes les expériences sur les animaux ont été approuvées par le Comité d’examen de l’éthique du bien-être animal expérimental de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Shandong (No. SDUTCM20230831301).
1. Préparation des animaux
- Déterminez à l’avance les groupes expérimentaux et le nombre d’animaux par groupe.
- Choisissez des souris BALb/c mâles, abritez-les à une température constante de 22 ± 1 °C, à une humidité constante de 60 ± 5 % et à un environnement lumineux à cycle diurne de 12 h.
2. Mise en place du modèle de souris AS
NOTE : Le modèle AS a été induit avec du protéoglycane cartilagineux (PG), qui est une méthode de modélisation classique 16,17,18,19,20,21. Des souris de souche BALB/c ont été immunisées à plusieurs reprises avec du PG pour induire une tendinite et une spondylarthrite. Reportez-vous au tableau des matériaux pour plus de détails sur les matériaux, les réactifs et les instruments utilisés dans ce protocole.
- À l’aide d’une pipette de 200 μL, aspirer 200 μL de PG et de CFA (ou IFA) dans un tube à centrifuger de 1,5 mL. Agiter doucement pour mélanger le liquide dans le tube de la centrifugeuse.
- Placez le tube de centrifugation dans le broyeur de tissus pour l’homogénéisation, puis incubez sur de la glace pendant 4 min. Répétez 5 fois. Réglez les paramètres suivants dans la meuleuse de tissus : 60 Hz, broyage 30 s, intervalle de 10 s pour un total de 6 cycles.
- Extraire 0,2 mL de protéine PG émulsionnée du tube à centrifuger à l’aide d’une seringue de 1 mL.
- Saisissez et fixez la souris avec la main gauche. Posez la souris en décubitus dorsal, en gardant la tête plus basse que la queue pour éviter d’endommager les organes abdominaux lors de l’insertion de la seringue.
- Stérilisez l’abdomen avec des tampons imbibés d’alcool à l’aide de la main droite.
- Avec la seringue dans la main droite, insérez légèrement l’aiguille par voie sous-cutanée à gauche ou à droite de la linea alba ventralis dans la moitié inférieure de l’abdomen.
- Poussez l’aiguille de 3 à 5 mm par voie sous-cutanée parallèlement à la ligne médio-abdominale, puis enfoncez l’aiguille dans la cavité abdominale à un angle de 45° par rapport à la peau.
- Pénétrez dans le péritoine, retirez le bouchon de l’aiguille et injectez lentement la protéine PG émulsionnée.
3. Du-moxibustion
REMARQUE : Préparez à l’avance les trois matières premières les plus importantes pour la Du-moxibustion (Figure 1).
- Préparez les cornets de moxa. Prenez le velours dans la main, avec deux paumes tournées dans des directions opposées exerçant une force de torsion pour frotter le velours en forme de fuseau (Figure 2)
- Coupez le gingembre en petits morceaux et réduisez-le en purée dans un presse-agrumes (Figure 3). Filtrez la purée de gingembre à travers de la gaze de coton. Séparez le jus de gingembre et la boue de gingembre de la purée de gingembre pour vous préparer à l’étape suivante.
- Préparez 10 g de boue de gingembre et 20 ml de jus de gingembre et placez-les dans des gobelets en carton pour une utilisation ultérieure.
- Pesez 0,1 g de poudre de MTC (un mélange de poudre de cannelle, de poudre de clou de girofle, de poudre de notoptérygion, de poudre d’antharidine et de musc artificiel)22 et broyez-la dans un mortier.
- Placez les souris dans la boîte d’induction d’anesthésie de l’appareil d’anesthésie animale et anesthésiez-les avec un mélange de 2 à 3 % d’isoflurane et d’oxygène à un débit de 2 L/min.
- Évaluez la profondeur de l’anesthésie en observant l’absence d’un réflexe de sursaut dans un premier temps et vérifiez le niveau d’anesthésie chirurgicale en vérifiant l’absence d’un réflexe de la pédale en réponse à un léger pincement des orteils.
- Une fois que la souris a atteint l’anesthésie du plan chirurgical, sortez-la de la boîte et fixez-la sur la table d’opération en position couchée. Alignez la bouche et le nez de la souris avec la sortie de l’anesthésique.
- Administrer l’anesthésie à l’aide d’un masque fixé à l’appareil d’anesthésie, à travers lequel l’isoflurane et l’oxygène sont délivrés via un circuit sans réinspiration. Maintenez l’anesthésie et maintenez la souris sur un coussin chauffant à 37 °C pendant toute la durée de l’opération. Appliquez du lubrifiant sur les yeux pour éviter la dessiccation.
- Localisez les points d’acupuncture et identifiez la zone de stimulation (Figure 4).
- Rasez les poils sur le dos de la souris jusqu’à ce que la peau de couleur chair sur le dos de la souris soit visible. Assurez-vous que la largeur de l’épilation est de ~1,5 cm et que la longueur va de la septième vertèbre cervicale à la vertèbre caudale (Figure 5A).
- Appliquez le jus de gingembre préparé à l’aide d’une gaze de coton sur la zone rasée (Figure 3).
- Saupoudrez uniformément la poudre de MTC à l’aide d’un pinceau d’écriture sur la ligne médiane du dos de la souris et recouvrez-la de papier mûrier (Figure 5B-D).
- Faites une colonne de gingembre trapézoïdale de 6 cm de long, 1,5 cm de large et 3 mm d’épaisseur avec de la boue de gingembre. Fixez la colonne de gingembre sur le papier de mûrier (Figure 5E).
- Faites une rainure au-dessus de la ligne médiane de la colonne de gingembre (Figure 3) et placez le cône de moxa sur la colonne de gingembre.
- Allumez le cône de moxa, en plaçant un nouveau cône de moxa après que le précédent ait brûlé. Vérifiez la fermeté de la colonne de gingembre pour éviter de brûler la souris, brûlant un total de trois cônes (Figure 5F).
- Après avoir brûlé les cônes de moxa, essuyez le gingembre et la poudre de MTC et nettoyez l’arrière de la souris. Arrêtez l’anesthésie à ce stade.
- Permettez à la souris de reprendre conscience dans une nouvelle cage avec un accès illimité à la nourriture et à l’eau. Placez la cage sur un coussin chauffant pour faciliter le processus de récupération. Surveillez l’animal jusqu’à ce qu’il reprenne suffisamment conscience.
- Une fois que la souris a complètement récupéré, confirmez la présence du réflexe de redressement avant de la remettre dans son logement habituel.
REMARQUE : Pendant l’opération, il est nécessaire de surveiller l’état mental des souris pour éviter une respiration faible. Évitez les brûlures, mais gardez les souris au chaud et évitez les ecchymoses aux griffes et à la queue.
4. Évaluation de l’indice d’arthrite (IA)
- Évaluez le score de l’IA trois fois : avant la modélisation, après la modélisation et après le traitement. Les normes d’évaluation sont les suivantes : 0, pas de rougeur ou d’enflure ; 1, légère rougeur ou gonflement de quelques orteils ; 2, rougeur et gonflement dans la plupart des articulations des orteils et des orteils ; 3, rougeur grave et gonflement des pieds et de l’articulation inférieure de la cheville ; et 4, rougeur et gonflement des pieds et de l’articulation de la cheville23.
- Calculez les scores d’IA des quatre pattes, avec une valeur maximale de 16.
5. Test de Rotarod
REMARQUE : Le test rotarod est utilisé pour évaluer la coordination motrice et l’équilibre en enregistrant le temps que les souris passent sur le tambour rotatif. Cette expérience consistait en trois essais séparés par des intervalles de 20 minutes. Les données officielles des tests ont été enregistrées lors du troisième essai, les deux premiers servant d’exercices d’entraînement.
- Placez les souris sur des tambours rotatifs qui tournent sous l’effet d’une accélération continue de 4 à 40 tr/min pendant 300 s24.
- Mesurez le temps de latence (le temps jusqu’à ce que la souris tombe de la tige). Prévoyez un rembourrage pour éviter les blessures lorsqu’il tombe.
6. Test en champ ouvert (OFT)
REMARQUE : L’OFT est utilisé pour évaluer l’état du mouvement autonome, dans le but d’identifier le comportement pathologique. Quatre arènes carrées en plein champ (50 cm x 50 cm x 40 cm) ont été placées ensemble pour former l’agrès. Le fond de la boîte était divisé en neuf carrés égaux.
- Contrôlez le bruit de fond du laboratoire en dessous de 65 dB.
- Essuyez l’ensemble de l’appareil avec de l’éthanol à 75 % avant chaque essai.
- Placez toutes les souris dans la salle de test 1 h avant le test pour leur permettre de s’adapter à leur environnement.
- Placez les souris dans les arènes carrées en plein champ et laissez-les explorer pendant 10 minutes.
- Enregistrez la distance totale et la vitesse de déplacement pendant 10 min.
7. Euthanasie et prélèvement d’échantillons
- Placez la souris dans la boîte d’induction d’anesthésie et anesthésiez-la avec un mélange de 2 à 3 % d’isoflurane et d’oxygène à un débit de 2 L/min. Une fois que la souris entre dans un état d’anesthésie profonde confirmé par un manque de réflexe de la pédale, transférez-la sur la table d’opération pour une anesthésie d’entretien.
- Saisissez et fixez la souris avec la main non dominante.
- Appuyez légèrement sur le contour des yeux pour que les globes oculaires soient congestionnés et saillants.
- Utilisez des ciseaux pour couper les moustaches de la souris afin d’éviter l’hémolyse causée par les poils.
- Confirmez la profondeur de l’anesthésie en vérifiant l’absence d’un réflexe de pédale en réponse à un pincement des orteils. Utilisez une pince pour saisir le globe oculaire et le retirer rapidement, permettant au sang de s’écouler dans un tube de microcentrifugation à partir de l’orbite.
REMARQUE : D’autres méthodes de prélèvement sanguin, telles que la ponction cardiaque, peuvent également être utilisées. - Lorsque le taux d’écoulement du sang ralentit, appuyez doucement sur la zone cardiaque de la souris pour accélérer le pompage du sang et obtenir plus de sang. Ensuite, euthanasiez la souris à l’aide d’une luxation cervicale.
- Tenez la jambe juste au-dessus de l’articulation de la cheville à l’aide d’une pince dans la main non dominante. Ensuite, coupez la jambe juste au-dessus de l’articulation de la cheville à l’aide de ciseaux.
8. Analyse histologique
- Immergez les échantillons de cheville dans du paraformaldéhyde à 4 % pendant plus de 24 h. Détartrer dans 10% EDTA (pH = 7,4) pendant 1 mois.
- Faire tremper les échantillons dans du paraformaldéhyde à 4 % pendant 2 h.
- Ensuite, faites tremper les échantillons dans un gradient de concentrations croissantes d’éthanol (70 %, 80 %, 90 %, 100 %, 100 %, 100 %). Faire tremper chaque concentration d’éthanol pendant 1 h.
- Faire tremper les échantillons dans du xylène pendant 3 h.
- Immergez les spécimens de cheville dans de la paraffine pendant 7 h. Réserver les blocs de paraffine au réfrigérateur à 4 °C.
- Coupez les blocs de paraffine à une épaisseur de 6 μm à l’aide d’une sectionneuse de paraffine semi-automatique.
- Faites tremper les tranches pendant 4 x 5 min dans du xylène pour terminer le déparaffinage.
- Faites tremper les tranches dans un gradient de concentrations d’éthanol décroissantes (100 %, 100 %, 95 %, 75 %) pendant 2 min chacune. Faire tremper dans de l’eau distillée pendant 2 min.
- Colorer les tranches avec de l’hématoxyline pendant 10 min et rincer à l’eau distillée pendant 5 s.
- Faites tremper les tranches pendant 30 s dans le liquide de différenciation et rincez à l’eau distillée pendant 5 s.
- Colorez les tranches avec de l’éosine pendant 1 min et rincez à l’eau distillée pendant 3 min.
- Faites tremper les tranches dans un gradient de concentrations croissantes d’éthanol (80 %, 95 %, 100 %, 100 %) pendant 1 min chacune. Faire tremper dans le xylène pendant 3 x 3 min et sceller lestranches 25.
9. Test immuno-enzymatique (ELISA)
- Mesurez les concentrations d’IL-17 et de TNF-α dans le plasma à l’aide des kits respectifs conformément aux instructions du fabricant.
10. Analyse statistique
- Exprimez les données sous forme de moyenne ± d’erreur type de la moyenne (SEM).
- Déterminer la signification par une analyse de variance à un facteur (ANOVA) ou une ANOVA à mesures répétées à deux facteurs, suivie des tests post hoc de Bonferroni ou Tamhane T2.
- Considérez que P < 0,05 sont statistiquement significatifs.
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Representative Results
Les souris modèles induites par le PG ont développé des symptômes d’arthrite périphérique, caractérisés par une rougeur et un gonflement des extrémités et des orteils, et ont progressivement développé une arthrite axiale dès la semaine 14, qui est très similaire à la manifestation de la SA. Par conséquent, le modèle murin AS était considéré comme réussi si l’indice d’arthrite (IA) était supérieur à 3 points à 14 semaines après la dernière injection22. Lorsque les pattes des souris semblaient enflées, le traitement de Du-moxibustion a été effectué une fois par semaine pour un total de 3x. Après le traitement, les souris ont été euthanasiées par luxation cervicale sous anesthésie profonde à l’isoflurane, leur sang a été prélevé et les chevilles ont été excisées.
Effets de la Du-moxibustion sur la coordination motrice et le mouvement autonome
La SA induite par le PG bovin a été adoptée comme modèle pour observer l’effet de la Du-moxibustion au méridien du Du sur la coordination motrice. Initialement, le score de gonflement des articulations a été utilisé pour évaluer si le modèle était réussi, et la coordination motrice et le mouvement autonome ont été évalués à l’aide du test rotarod et de l’OFT.
L’évaluation de l’IA a permis de déterminer la gravité de l’arthrite périphérique. Après modélisation, l’ANOVA à mesures répétées à deux facteurs a révélé que les scores de gonflement articulaire dans les groupes modèle et Du-moxibustion augmentaient significativement par rapport à ceux du groupe témoin avant la Du-moxibustion (P < 0,01 ; Graphique 6A). Le traitement de la du-moxibustion a diminué les scores de gonflement des articulations par rapport à ceux du groupe modèle après la du-moxibustion (p < 0,05 ; Graphique 6A).
Le test rotarod a été utilisé pour évaluer la coordination motrice et l’équilibre. L’ANOVA à mesures répétées à deux facteurs a révélé des différences significatives au fil du temps (F = 13,928, P = 0,000 < 0,05) et des effets d’interaction du temps et du groupe (F = 12,583, P = 0,000 < 0,05). Après la modélisation, le temps de latence du groupe témoin n’était pas différent de celui d’avant la modélisation. Cependant, après modélisation, les temps de latence des groupes modèle et Du-moxibustion ont significativement diminué par rapport à ceux du groupe témoin (P < 0,01 ; Figure 6B), et il n’y avait pas de différences significatives entre le groupe modèle et le groupe Du-moxibustion (P > 0,05 ; Graphique 6B). Après traitement, le temps de latence du groupe Du-moxibustion a significativement augmenté par rapport à celui du groupe modèle (P < 0,05 ; Graphique 6B). Ces résultats ont indiqué que la Du-moxibustion était efficace pour améliorer la coordination motrice chez les souris SA.
L’OFT a été réalisée pour détecter les mouvements autonomes. Les paramètres ont été collectés et analysés automatiquement à l’aide du logiciel (Figure 6C-E) ; La distance totale et la vitesse moyenne ont été principalement observées dans cette étude. Il n’y avait pas de différence significative dans la distance totale et la vitesse moyenne entre les groupes avant la modélisation (P > 0,05 ; Graphique 6C et D). Après modélisation, la distance totale et la vitesse moyenne ont considérablement diminué par rapport au groupe témoin (P < 0,05 ; Graphique 6C et D). Après traitement, la distance totale et la vitesse moyenne du groupe Du-moxibustion ont augmenté significativement par rapport à celles du groupe modèle (P < 0,05 ; Graphique 6C et D). Ces résultats ont indiqué que la Du-moxibustion était efficace pour améliorer le mouvement autonome chez les souris SA.
Effets de la Du-moxibustion sur la pathologie de l’articulation de la cheville
La coloration HE a été utilisée pour observer les changements pathologiques dans l’articulation de la cheville. Dans le groupe témoin, il n’y avait pas de dommages à la structure de la synovia, pas de congestion dans la synoviale et pas d’infiltration et de nécrose évidentes des cellules inflammatoires. Cependant, dans le groupe modèle, une hyperplasie et une infiltration de la synoviale ont été observées dans la cavité articulaire, en plus de l’infiltration de cellules inflammatoires et d’un œdème tissulaire. Combiné à l’évaluation de l’IA, il a été prouvé que le modèle AS a été établi avec succès. Par rapport au groupe modèle, la synoviale des souris du groupe Du-moxibustion était plus intacte, l’œdème interstitiel était réduit et le cartilage articulaire était relativement intact (Figure 7).
Effets de la Du-moxibustion sur les taux plasmatiques d’IL-17 et de TNF-α
Un test ELISA a été réalisé pour mesurer l’IL-17 et le TNF-α dans le plasma. Les taux plasmatiques d’IL-17 et de TNF-α du groupe modèle ont été significativement augmentés par rapport à ceux du groupe témoin (P < 0,01 ; Graphique 6F, G). La du-moxibustion a diminué les taux plasmatiques d’IL-17 et de TNF-α (P < 0,05 ; Graphique 6F, G).
Figure 1 : Les matières premières nécessaires à la moxibustion. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 2 : Fabrication d’un cône de moxa. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 3 : Préparez de l’eau de gingembre et faites une colonne de gingembre trapézoïdale. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 4 : Localisation de GV14 et GV2 chez la souris. (A) GV14 situé au niveau de l’apophyse sous-épineuse de la septième vertèbre cervicale ; GV2 situé dans le canal sacré hiatus. (B) Schéma de principe de la moxibustion de Du sur la souris. (C) Zone stimulée de la moxibustion du du. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 5 : Déroulement de la Du-moxibustion chez la souris. (A) Rasez les cheveux et étalez le jus de gingembre sur la souris en position couchée. (B,C) Saupoudrer uniformément la poudre de MTC. (D) Couvrir la poudre de papier de mûrier. (E) Fixez fermement la colonne de gingembre sur le papier de mûrier. (F) Mettez un cône de moxa sur la colonne de gingembre ; Ensuite, allumez-le. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 6 : Effets de la Du-moxibustion sur la coordination motrice, le mouvement autonome et les niveaux d’IL-17 et de TNF-α. (A) Le gonflement de l’articulation marque chez la souris. (B) Le temps de latence dans le test rotarod. (C-E) Distance totale, vitesse moyenne et diagramme de trajectoire de l’OFT. (F) Taux d’IL-17 dans le plasma. (G) Taux de TNF-α dans le plasma. Les valeurs sont exprimées sous la forme de la moyenne ± MEB (n = 6). ##P < 0,01, #P < 0,05 par rapport au groupe témoin ; $$P < 0,01, $P < 0,05 par rapport au groupe modèle. Abréviations : IL = interleukine ; TNF = facteur de nécrose tumorale ; OFT = test en champ ouvert. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 7 : Coloration de l’articulation de la cheville par l’explosif. (A) La cavité articulaire était lisse sans infiltration inflammatoire dans le groupe témoin. (B) Dans le groupe modèle, une hyperplasie synoviale et une infiltration ont été observées dans la cavité articulaire. (C) Dans le groupe Du-moxibustion, la cavité articulaire des souris était lisse et l’œdème était atténué. Barres d’échelle = 200 μm. Abréviation : HE = hématoxyline-éosine. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
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Discussion
La SA se manifeste cliniquement par un gonflement du dos, des lombaires et des articulations, et une déformation de la colonne vertébrale et une rigidité articulaire peuvent survenir dans les cas graves26. Un diagnostic et un traitement précoces peuvent améliorer la qualité de vie, réduire les taux d’invalidité et améliorer le pronostic des patients atteints de SA. Selon la médecine traditionnelle chinoise (MTC), on pense que la sida ankylosante est causée par une carence en Yang dans le rein et le méridien Du, ainsi que par une accumulation de mal froid à l’intérieur. La MTC soutient que la moxibustion, basée sur le concept de méridiens, peut générer du Qi qui réchauffe la surface du corps. Ce Qi se déplace ensuite vers le bas le long des méridiens et des points d’acupuncture. Dans le Canon Intérieur de Huangdi (un chef-d’œuvre très classique et important de la MTC), il est écrit que « le méridien de Du malade est traité ». Comme l’AS est situé dans le méridien du Du, la stimulation du méridien du est utilisée comme point thérapeutique. Le méridien du Du est considéré comme l’océan des canaux Yang où le Yang Qi atteint son apogée. La moxibustion sur le méridien du Du peut compléter le qi du Yang, activer l’effet du méridien du Du et ajuster l’effet de réchauffement du Yang des reins, c’est-à-dire améliorer la fonction de régulation immunitaire de la médecine occidentale.
Du point de vue de la médecine occidentale, la moelle épinière joue un rôle important dans la transmission de l’information neuronale. La moxibustion, qui agit sur l’entrée et la sortie des racines nerveuses spinales, peut affecter la fonction et le mécanisme de régulation du système nerveux par la régulation des neurotransmetteurs. Dans les années 1990, il a été démontré que la Du-moxibustion augmentait la teneur en β-endorphines dans l’hypothalamus des rats, ayant ainsi un effet analgésique central7. De plus, l’enthésite est une complication fréquente de la SA, caractérisée par une douleur persistante et une raideur musculaire, qui peuvent affecter les mouvements articulaires et corporels lorsqu’elles sont sévères. En tant que méthode de traitement de la MTC qui a été cliniquement validée, la Du-moxibustion peut soulager efficacement l’inflammation, favoriser la réparation des tissus et améliorer l’enthésite dans le traitement de la SA.
Plus précisément, les effets de l’acupuncture et de la moxibustion se reflètent principalement dans les aspects suivants. Tout d’abord, ils favorisent la circulation sanguine et l’absorption de l’inflammation. La du-moxibustion stimule la circulation sanguine et le métabolisme dans les tissus entourant la colonne vertébrale grâce à l’effet chauffant et favorise l’absorption de l’inflammation et la réparation des tissus, réduisant ainsi le degré d’inflammation et la douleur de l’inflammation de l’attache tendineuse. Deuxièmement, ils améliorent la tension musculaire et ligamentaire. L’effet stimulant de la Du-moxibustion peut améliorer la tension musculaire autour de la colonne vertébrale, détendre les tissus mous durcis, favoriser l’activité des articulations de la colonne vertébrale et réduire la douleur et la raideur causées par la tension musculaire et l’étirement des ligaments. En résumé, la Du-moxibustion, en tant que thérapie d’appoint, peut réguler de manière globale les activités des systèmes nerveux, immunitaire et circulatoire du corps en agissant sur la région vertébrale, rendant le corps plus équilibré dans son ensemble.
L’inflammation est la principale manifestation de la SA27. Le TNF-α est une cytokine multi-effectrice et un facteur inflammatoire produit sous la stimulation de macrophages mononucléés28. L’activité de l’ALP et la synthèse du collagène peuvent être inhibées par le TNF-α, ce qui entraîne une perte osseuse et une destruction du cartilage29. Au cours des dernières années, des études ont montré que l’IL-17 joue un rôle important dans la pathogenèse de la SA, ce qui a été pleinement démontré dans une revue30. L’IL-17 peut agir directement sur les ostéoblastes, favoriser l’expression du ligand activateur du récepteur du facteur de transcription nucléaire κB (NF-κB) (RANKL) et favoriser la génération robuste d’ostéoclastes. Dans le même temps, l’IL-17 affecte également les cellules souches mésenchymateuses (CSM), induisant leur prolifération et favorisant leur différenciation en ostéoblastes31. Kenna32 et al. ont constaté que le taux d’IL-17 dans le sang périphérique des patients atteints de SA augmentait de près de deux fois par rapport aux témoins sains. L’étude suggère que les antagonistes de l’IL-17 pourraient être une nouvelle option pour les patients atteints de SA qui ne répondent pas bien aux antagonistes du TNF-α33. Une étude clinique a montré qu’un schéma posologique d’antagonistes de l’IL-17 était supérieur à un placebo pour améliorer les signes et symptômes radiographiques de la spondylarthrite axiale chez les patients34. Les résultats de cette étude ont montré que les taux plasmatiques de TNF-α et d’IL-17 dans le groupe modèle étaient significativement plus élevés que ceux du groupe témoin, et que les taux plasmatiques de TNF-α et d’IL-17 étaient significativement diminués après un traitement par Du-moxibustion.
La thérapie de dupoxibustion utilise habilement les techniques compatibles de la MTC pour intégrer les méridiens, les points d’acupuncture, la phytothérapie chinoise et la moxibustion. Les matières premières de la thérapie Du-moxibustion comprenaient principalement du velours de moxa, du gingembre et de la poudre de MTC. Du point de vue de la MTC, le velours de moxa, un produit transformé de l’armoise, a pour fonction d’activer les collatérales, de dissiper le froid et de soulager la douleur. Le gingembre joue un rôle dans le soulagement des symptômes externes et la dissipation du rhume. La recherche moderne montre également que le gingembre a des propriétés anti-inflammatoires et analgésiques35. Essuyer la peau avec du jus de gingembre avant le traitement permet d’ouvrir les pores et de favoriser la perméation transdermique36, en plus d’aider la poudre de MTC à adhérer à la peau. La colonne de gingembre trapézoïdale est fermement fixée à l’arrière pour fournir une base solide au cône de moxa. Après la combustion du cône de moxa, les effets de la puissance de feu, du gingembre et de la poudre de MTC agissent ensemble sur le méridien du Du. Compte tenu de la pathogenèse de la carence en Yang dans cette maladie, la Du-moxibustion agit directement sur le site de la maladie, en réchauffant les méridiens, en dispersant le froid, en complétant le Yang Qi et l’essence, en favorisant la circulation sanguine et en équilibrant le Yin et le Yang pour traiter la racine de la maladie.
Lors de la réalisation de la Du-moxibustion, plusieurs détails doivent être pris en compte. Tout d’abord, le site opératoire de la Du-moxibustion est fixe, du point Dazhui (GV14) au point Yaoshu (GV2) (anatomiquement de la 7ème apophyse épineuse de la colonne cervicale à la vertèbre caudale, y compris toute la colonne vertébrale), ce qui est cohérent avec le site d’incidence de la SA (Figure 4). Deuxièmement, l’humidité et l’épaisseur du gingembre sont importantes. L’excès de jus de gingembre doit être pressé après que le gingembre soit transformé en boue de gingembre afin que la boue de gingembre n’ait pas de sensation granuleuse et que son épaisseur soit appropriée pour être transformée en colonne de gingembre trapézoïdale. Une humidité élevée et de l’humidité dans la boue de gingembre peuvent facilement entraver la pénétration du feu de moxibustion et réduire la quantité de stimulation de la moxibustion. Si la matière première de gingembre est trop sèche et que les particules sont trop grosses, il est difficile de fabriquer la colonne de gingembre trapézoïdale, ce qui entraîne une pénétration rapide de la chaleur et une brûlure de la peau. Troisièmement, la taille et la fermeté du cône de moxa doivent être prises en compte. Les cônes de moxa utilisés pour la moxibustion chez la souris mesurent ~4 cm de long et 0,5 cm de diamètre et doivent être serrés au moment de la préparation. Un test d’étanchéité est lorsque le cône ne s’effiloche pas même après avoir été laissé tomber sur une surface. Si le cône de moxa n’est pas assez compact, cela entraînera une réduction de la quantité de velours de moxa, une durée de combustion plus courte et une réduction de la puissance de feu. Quatrièmement, lors de l’allumage du cône de moxa, la tête, le milieu et la queue du cône de moxa doivent être éclairés avec de l’encens fin pour que le cône de moxa brûle lentement pour obtenir l’effet nourrissant du flux et du reflux. Cinquièmement, le musc est un ingrédient important dans la poudre médicinale de la moxibustion. Le deuxième jour après la moxibustion, il devrait y avoir des cloques cristallines comme de petites perles sur le méridien du Du.
Un grand nombre d’études cliniques ont confirmé l’efficacité certaine de la Du-moxibustion dans le traitement de l’AS 4,5,6. Cependant, la recherche sur son mécanisme d’action dans l’expérimentation animale progresse lentement. Grâce à la recherche et à l’innovation, des années d’expérience dans le fonctionnement de la Du-moxibustion nous ont amenés à étudier son utilisation dans des expériences sur des souris. Cet article décrit en détail les procédures opératoires et les précautions de la Du-moxibustion dans le traitement de la SA chez les souris expérimentales. De plus, l’effet de la moxibustion sur la coordination motrice et les taux plasmatiques de TNF-α et d’IL-17 chez les souris AS ont été observés. Cette étude a fourni la base expérimentale la plus fondamentale pour l’étude du mécanisme de la Du-moxibustion dans le traitement de la SA. Il y a encore quelques limites à cette étude. Par exemple, dans les études futures, nous prêterons attention à l’évaluation de différents paramètres tels que la moxibustion placebo, la dose, la plage et la durée du traitement afin d’obtenir les schémas de combinaison les plus efficaces. Dans les études ultérieures, les méthodes d’imagerie peuvent être utilisées pour évaluer les résultats du traitement de manière plus intuitive.
Les perspectives d’application de la thérapie par la Du-moxibustion sont prometteuses. Le méridien Du, connu sous le nom de vaisseau gouverneur, joue un rôle crucial dans la régulation du flux de Qi et de sang dans tout le corps. La moxibustion, une thérapie traditionnelle chinoise, consiste à brûler de l’armoise sur des points d’acupuncture spécifiques pour stimuler les méridiens et favoriser le mécanisme d’auto-guérison du corps. Par rapport à l’acupuncture, la Du-moxibustion est une combinaison de diverses techniques qui agissent sur la surface du corps, qui présente les caractéristiques du confort et d’un amplitude d’action forte et large. De plus, la thérapie Du-moxibustion se concentre sur le dos et la région de la colonne vertébrale, en ciblant la voie du méridien Du. Il peut renforcer le système immunitaire du corps, améliorer la circulation sanguine et soulager diverses conditions physiques et mentales. La thérapie a démontré son efficacité dans le traitement de maladies telles que les troubles musculo-squelettiques, les affections neurologiques, les troubles gynécologiques et les problèmes de santé mentale. Avec les progrès de la recherche et de la technologie, l’application de la thérapie de la Du-moxibustion devrait encore se développer. De futures études pourraient explorer son potentiel dans des domaines tels que la gestion de la douleur, la réduction du stress, les troubles digestifs et les affections respiratoires. La combinaison des connaissances traditionnelles et de la compréhension scientifique moderne pourrait conduire à une meilleure intégration de la thérapie Du-moxibustion dans les pratiques de soins de santé traditionnelles. En conclusion, la thérapie de la dumibustion est très prometteuse dans son application et son intégration dans divers domaines de la santé. Des recherches plus poussées, des essais cliniques et une collaboration entre les praticiens de la médecine traditionnelle chinoise et les professionnels de la santé modernes sont essentiels pour libérer tout son potentiel.
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Disclosures
Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à déclarer.
Acknowledgments
Ce travail a été soutenu par le Programme général de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (n° 82174491) et le projet d’héritage de l’école académique de l’école de médecine traditionnelle chinoise de Qilu (n° 82174491). Lu Weihan [2020]132). Merci au Centre des animaux de laboratoire de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Shandong pour nous avoir fourni des conditions expérimentales.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
References
- Sieper, J., Poddubnyy, D.
- Lee, W., Reveille, J. D., Weisman, M. H. Women with ankylosing spondylitis: a review. Arthritis Rheum. 59 (3), 449-454 (2008).
- Sari, İ, Öztürk, M. A., Akkoç, N.
- Zhang, L., et al. Governor vessel moxibustion: Ancient Chinese medical technology with new vitality. Chin J Integr Med. 23 (5), 396-400 (2017).
- Hu, J., et al. Moxibustion for the treatment of ankylosing spondylitis: a systematic review and meta-analysis. Ann Palliat Med. 9 (3), 709-720 (2020).
- Liu, Y., Wang, P., Sun, Y. Y., Qu, J., Li, M. Efficacy of thunder-fire moxibustion in treating ankylosing spondylitis of kidney deficiency and governor meridian cold and its influence on TNF-α and RANKL: study protocol for a prospective, nonblinded, single-center, randomized controlled trial. Trials. 23 (1), 344 (2022).
- Chong, G. Q., Ma, Y., Sun, H. S., Zhang, T., Peng, W. Study on clinical and analgesic mechanism of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. J Clin Acupunct Moxib. (06), 48-49 (1999).
- Liu, W. Q., Lu, X. H. Clinical observation of Melilotus extract tablets combined with Dujiu for treating ankylosing spondylitis. Pharm Res. 35 (03), 182-184 (2016).
- Zhang, Y. L., Lin, J. H., Zhou, Y. Y., Zhao, G. Q., He, Y. T. Clinical observation of Bushen Qiangdu Zhilou decoction combined Du-moxibustion in treating ankylosing spondylitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 21 (10), 190-194 (2015).
- Guo, L. J., et al. Clinical effect of moxibustion at governor vessel combined with Bushen Quhan Huashi prescription for ankylosing spondylitis and its effect on levels of CTX-I and DKK1 in serum. New Chin Med. 53 (10), 117-121 (2021).
- Deng, Y. X. Governor moxibustion treatment of ankylosing spondylitis the adjustment of the T-cell subsets observed. J Practical Tradi Chin Inter Med. 26 (18), 77-78 (2012).
- Wang, Y. Q. Mechanism of exercise combined with moxibustion in the treatment of osteoporosis in castrated rats. Chin J Gerontol. 37 (04), 839-840 (2017).
- Ren, J. Y., Li, F., Yan, J., Wan, C., Cai, L. Clinical study of Du-moxibustion combined with needling Huatuo Jiaji acupoint in the treatment of AS of kidney-Yang deficiency. J Clin Acupunct Moxib. 35 (06), 41-44 (2019).
- Xu, X., et al. Metabolomic analysis of biochemical changes in the tissue and urine of proteoglycan-induced spondylitis in mice after treatment with moxibustion. Integr Med Res. 10 (1), 100428 (2021).
- Xu, X., et al. Moxibustion attenuates inflammation and alleviates axial spondyloarthritis in mice: Possible role of APOE in the inhibition of the Wnt pathway. J Tradit Complement Med. 12 (5), 518-528 (2022).
- Li, X., et al. Inflammation intensity-dependent expression of osteoinductive wnt proteins is critical for ectopic new bone formation in ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 70, 1056-1070 (2018).
- Cui, H., et al. CXCL12/CXCR4-Rac1-mediated migration of osteogenic precursor cells contributes to pathological new bone formation in ankylosing spondylitis. Sci Adv. 8 (14), eabl8054 (2022).
- Braem, K., Lories, R. J. Insights into the pathophysiology of ankylosing spondylitis: contributions from animal models. Joint Bone Spine. 79 (3), 243-248 (2012).
- Mikecz, K., Glant, T. T., Poole, A. R. Immunity to cartilage proteoglycans in BALB/c mice with progressive polyarthritis and ankylosing spondylitis induced by injection of human cartilage proteoglycan. Arthritis Rheum. 30, 306-318 (1987).
- Li, Z., et al. Tenascin-C-mediated suppression of extracellular matrix adhesion force promotes entheseal new bone formation through activation of Hippo signalling in ankylosing spondylitis. Ann Rheum Dis. 80 (7), 891-902 (2021).
- Glant, T. T., Cs-Szabo´, G., Nagase, H., Jacobs, J. J., Mikecz, K. Progressive polyarthritis induced in BALB/c mice by aggrecan from human osteoarthritis cartilage. Arthritis Rheum. 41, 1007-1018 (1998).
- Hu, B., Li, Y., Tan, J. Research progress of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. Rheum & Arthritis. 11 (05), 77-80 (2022).
- Yang, Y., Dong, Q., Li, R. Matrine induces the apoptosis of fibroblast-like synoviocytes derived from rats with collagen-induced arthritis by suppressing the activation of the JAK/STAT signaling pathway. Int J Mol Med. 39 (2), 307-316 (2017).
- Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J Neurosci Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
- Liu, P., et al. A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis. J Orthop Surg Res. 16 (1), 541 (2021).
- Taurog, J. D., Chhabra, A., Colbert, R. A. Ankylosing spondylitis and axial spondyloarthritis. N. Engl. J. Med. 374, 2563-2574 (2016).
- Schett, G., et al. Enthesitis: From pathophysiology to treatment. Nat. Rev. Rheumatol. 13, 731-741 (2017).
- Duan, W. X., et al. Effect of different concentrations of Moxa-smoke on lung function and TNF-α and IL-1 β levels in serum and lung tissues in normal rats. Zhen Ci Yan Jiu [Acupuncture Research]. 43 (2), 98-103 (2018).
- Callhoff, J., Sieper, J., Weiß, A., Zink, A., Listing, J. Efficacy of TNFα blockers in patients with ankylosing spondylitis and non-radiographic axial spondyloarthritis: a meta-analysis. Ann Rheum Dis. 74 (6), 1241-1248 (2015).
- Schinocca, C., et al. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview. Front Immunol. 12, 637829 (2021).
- Gravallese, E. M., Schett, G. Effects of the IL-23-IL-17 pathway on bone in spondyloarthritis. Nat Rev Rheumatol. 14 (11), 631-640 (2018).
- Kenna, T. J., et al. Enrichment of circulating interleukin-17-secreting interleukin-23 receptor-positive γ/δ T cells in patients with active ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 64 (5), 1420-1429 (2012).
- Poddubnyy, D., Sieper, J. Treatment of axial spondyloarthritis: what does the future hold. Curr Rheumatol Rep. 22 (9), 47 (2020).
- van der, H. D., et al. COAST-V study group. Ixekizumab, an interleukin-17A antagonist in the treatment of ankylosing spondylitis or radiographic axial spondyloarthritis in patients previously untreated with biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (COAST-V): 16 week results of a phase 3 randomised, double-blind, active-controlled and placebo-controlled. Lancet. 392 (10163), 2441-2451 (2018).
- Fu, Y. S., et al. Pharmacological properties and underlying mechanisms of curcumin and prospects in medicinal potential. Biomed Pharmacother. 141, 111888 (2021).
- Hassan, A. S., Hofni, A., Abourehab, M. A. S., Abdel-Rahman, I. A. M. Ginger extract-loaded transethosomes for effective transdermal permeation and anti-inflammation in rat model. Int J Nanomedicine. 18, 1259-1280 (2023).
