Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- コーンミール培地を含むバイアルに男性と女性のショウジョウバエメラノガスターフルーツハエのセット数をコハウジングすることによって開始します。
メスのハエが卵を産むことを許す。その後、成虫のハエを取り除く。卵は幼虫、子犬、そして最後に10日のスパンで成虫になる。コホートより早く出現する新しいハエは9日前に取り除くべきだ。
数日後、性別でハエをグループに分け、同数のハエを対応する実験条件に入れ、生きているハエを新しいバイアルに移し、死んだハエの数を記録してください。
少なくとも3回の反復実験の後、生存するハエの平均割合を日別にプロットして各条件の平均生存曲線を生成します。この例では、内分泌破壊化学物質で処理されたコホートの生存曲線を生成する方法を見てみましょう。
- 寿命プロトコルでは、最初に8人の女性と4人の男性で20バイアルを設置し、それぞれ10ミリリットルのコーンミール食品で満たされ、摂氏25度で収容します。
16〜24時間後、両性の250匹の1日齢の成虫ハエを軽い二酸化炭素麻酔下で4つのグループに分け、成人中性食品を含む250ミリリットルのボトルに移し、 3つは異なるEDC濃度で補われ、1つはEE2溶媒だけで補い、ハエを2〜3日間摂氏25度に維持して交尾できるように。その後、性別によってハエの各コホートを2つのグループに分類します。 死んだハエの数が、前の転送から生き残ったハエの数から差し引かれるため、各転送で生存者の数が自動的に取得されます。
3日後、麻酔なしでハエを対応する食べ物を含む新しいバイアルに移し、死亡を確認してください。ハエの年齢と死んだハエの数を記録してください。