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Encyclopedia of Experiments: Biology

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Protocolo de vida útil para Drosophila melanogaster

 
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Protocolo de vida útil para Drosophila melanogaster: Generación de curvas de supervivencia para identificar diferencias en la longevidad de moscas

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- Comience por cohousing un número conjunto de moscas de la fruta Drosophila melanogaster macho y hembra en un vial que contiene medio cornmeal.

Permitir que las moscas hembra ponen huevos. Luego retire las moscas adultas. Los huevos se convertirán en larvas, pupas, y finalmente moscas adultas en un lapso de 10 días. Nuevas moscas que emergen antes de su cohorte deben ser removidas antes del día 9. Dividir las moscas ahora sincronizadas en grupos para el control y condiciones experimentales.

Después de varios días, separa las moscas por sexo en grupos. Coloca un número igual de moscas en la condición experimental correspondiente. Cada tres días, transfiere las moscas vivientes a un nuevo vial y registra el número de moscas muertas.

Después de al menos tres experimentos de réplica, traza el porcentaje medio de moscas sobrevivientes de día para generar curvas medias de supervivencia para cada condición.

- En el protocolo de vida útil, se instalaron por primera vez 20 viales con ocho hembras y cuatro machos, cada uno lleno de 10 mililitros de harina de maíz, y los alberga a 25 grados centígrados. Después de cuatro días, deseche las moscas y coloque los viales de nuevo en la incubadora.

Después de 16 a 24 horas, divida a 250 moscas adultas de un día de ambos sexos en cuatro grupos bajo anestesia ligera de dióxido de carbono y transfiéralas a botellas de 250 mililitros que contengan alimentos medianos adultos, tres complementadas con diferentes concentraciones de EDC, y una sola con el disolvente EE2. Mantener las moscas a 25 grados centígrados durante dos o tres días para permitirles aparearse. Luego ordenar cada cohorte de moscas por sexo en dos grupos. Dentro de cada condición de tratamiento para ambos sexos, subdivide aleatoriamente cada grupo en cinco viales paralelos a una densidad de 20 individuos por vial. en el que el número de moscas muertas se resta del número de moscas sobrevivientes de la transferencia anterior para que el número de sobrevivientes en cada transferencia se obtenga automáticamente.

Después de tres días, transfiera las moscas sin anestesia a nuevos viales que contengan la comida correspondiente al mismo tiempo y compruebe la muerte.

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