A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:12Seeding the Cells
- 02:08Transfection
- 03:02Heat Shock
- 03:47Cell Lysis and Luciferase Assay
- 06:17Protein Refolding Dynamics
- 06:52Conclusion
In dit protocol een methode om intracellulair eiwit hervouwing te meten na de heat shock wordt beschreven. Deze methode kan gebruikt worden om foldases zoals moleculaire chaperonnes en hun co-factoren of verbindingen in staat om hun activiteiten van invloed te bestuderen. Vuurvlieg luciferase activiteit wordt gebruikt als reporter voor chaperonne hervouwing activiteit te meten.
Tags
Intracellular Refolding AssayEnzymatic ActivityMolecular ChaperonesCompoundsInhibitory ActivityStimulating ActivityCell-based SystemCell SurvivalStress InsultsHeat ShockNutrient StarvationChemicalsPoisonsTumor DevelopmentChemioresistance Of Cancer CellsNeurodegenerationSmall MoleculesCancer TherapyNeurodegenerative DisordersRefolding ActivityGene TransfectionFirefly Luciferase GeneRenilla Luciferase GeneProtein Synthesis Inhibition
