A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 02:02Preparation of Brain Homogenate and Detergent Soluble and Insoluble Fractions
- 03:21Velocity Sedimentation in Sucrose Step Gradients
- 04:30Size Exclusion Chromatography
- 06:16Capture of PrP with g5P and Western Blotting
- 08:20Representative PrP Isolation Results
- 10:45Conclusion
En ny art av cellulärt prionprotein (PrP<sup> C</sup>) Har nyligen identifierats i oinfekterade humana hjärnor med användning av de metoder som beskrivs här. Dessa metoder kan användas för att isolera olika PrP arter, medan vissa av dem är också användbara för att isolera andra felveckade proteinaggregat från mänskliga hjärnor.
Tags
Soluble PrP OligomersInsoluble PrP OligomersNormal Human BrainPrPCPrPScDetergent-solubleProteinase K (PK)-digestionDetergent-insoluble AggregatesConformational Transitionα-helical Structuresβ-sheet StructuresEndogenous PrPScIntermediate PrPSilent PrionBiophysical ApproachesBiochemical ApproachesUltracentrifugationSucrose Step Gradient SedimentationSize Exclusion ChromatographyIPrP EnrichmentGene 5 Protein (g5p)PK-treatment
