Journal
/
Biology
/
सक्रिय उपकला सेल lysates से जीएसटी टैग उत्परिवर्ती रो प्रोटीन (जीएसटी RhoA (G17A)) का उपयोग रो - GEFs आत्मीयता वर्षा
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Affinity Precipitation of Active Rho-GEFs Using a GST-tagged Mutant Rho Protein (GST-RhoA(G17A)) from Epithelial Cell Lysates
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

सक्रिय उपकला सेल lysates से जीएसटी टैग उत्परिवर्ती रो प्रोटीन (जीएसटी RhoA (G17A)) का उपयोग रो - GEFs आत्मीयता वर्षा

DOI:
10.3791/3932-v

•

11:28 min

•

March 31, 2012

•

, , , ,
1Keenan Research Centre, Li Ka Shing Knowledge Institute,St. Michael’s Hospital , 2Department of Surgery,University of Toronto, 3Department of Cell and Developmental Biology,University of North Carolina at Chapel Hill

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:46Transformation of E. coli with the pGEX-RhoA(G17A) Construct
  • 02:55Preparation of GST-RhoA(G17A) Beads
  • 07:50GEF Pulldown Assay with Nucleotide-free RhoA(G17A) Beads
  • 10:11Representative Pull Down Results
  • 11:03Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

यहां प्रस्तुत पद्धति एक उत्परिवर्ती RhoA जीएसटी संलयन प्रोटीन है कि उच्च सक्रिय GEFs के लिए संबंध है का उपयोग करने द्वारा RhoA विशिष्ट सकल घरेलू उत्पाद (जीडीपी) / GTP संवर्धित कोशिकाओं में विनिमय कारक (GEFs) के सक्रियण का पालन करने के लिए एक परख का वर्णन करता है. GEFs सेल lysates, के पश्चिमी सोख्ता और densitometry द्वारा मात्रा से पता लगाया से उपजी है.

Tags

Affinity PrecipitationRho-GEFsGST-tagged Mutant Rho ProteinCytoskeleton RegulationCellular ProcessesGTPasesGuanine-nucleotide Exchange FactorPathway-specific RegulationRegulatory NetworksActive Pool Of GEFsAffinity Precipitation AssayBurridge Lab

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

अस्थिर मल्टी प्रोटीन परिसर के अलगाव द्वारा Vivo में नियंत्रित पार से जोड़ने और इम्यूनो - चुंबकीय आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी सेलुलर

Bimolecular प्याज जीन Helios गन का उपयोग कक्ष में प्रतिदीप्ति complementation (BiFC) प्रोटीन प्रोटीन सहभागिता के लिए परख

ब्लू multiprotein परिसर के सेलुलर lysates से विश्लेषण के लिए मूल polyacrylamide जेल वैद्युतकणसंचलन (बी एन पृष्ठ)

लिपिड आत्मीयता पुटिका की मध्यस्थता चुंबकीय सक्रिय सेल छंटनी (LIMACS) का उपयोग कर क्रोमैटोग्राफी: प्रोटीन लिपिड इंटरेक्शन विश्लेषण के लिए एक उपन्यास विधि

अति सक्रिय खमीर Ribosomes के chromatographic शोधन

विषयेतर प्रोटीन एक लघु bispecific आत्मीयता टैग द्वारा सुविधा शोधन

प्रोटीन बातचीत मिलकर आत्मीयता शोधन का उपयोग पार्टनर्स की पहचान

एक तरल चरण आत्मीयता कब्जा चुंबकीय मोती का उपयोग करने के लिए प्रोटीन से प्रोटीन सहभागिता अध्ययन परख: उदाहरण पोलियो वायरस Nanobody

पुनः संयोजक प्रोटीन फँसाना चाहे का उपयोग फेज प्रदर्शन और आत्मीयता चयन के लिए एक प्रोटोकॉल

ट्रांसजेनिक कृंतक परख बढ़ाता पुरुष रोगाणु सेल उत्परिवर्ती आवृत्ति के लिए

Read Article