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Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA
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Isolement du ribosome Bound polypeptides naissants<em> In vitro</em> Pour identifier les sites de pause de translation le long d'ARNm

DOI:
10.3791/4026-v

•

10:15 min

•

July 06, 2012

•

,
1Center for Gene Regulation in Health and Disease, Department of Biological, Geological and Environmental Sciences,Cleveland State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 03:55DNA Template Preparation, In vitro Transcription, and In vitro Translation
  • 05:30Isolation and Resolution of Nascent Polypeptides
  • 06:54Representative Translational Pause Results
  • 08:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Une technique pour identifier les sites de pause translationnelle sur l'ARNm est décrite. Cette procédure est basée sur l'isolement des polypeptides naissants qui s'accumulent sur les ribosomes lors de la traduction in vitro d'un ARNm cible, suivie par l'analyse de la taille des chaînes naissantes en utilisant une électrophorèse sur gel dénaturant.

Tags

RibosomePolypeptidesTranslational Pause SitesMRNACodon UsageSynonymous CodonsNon-uniform ElongationMRNA Secondary StructureRibosome MovementTranslational Elongation RatesCodon BiasTRNAsRare CodonsPause SitesProtein ExpressionMRNA StabilityProtein Folding

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