A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 02:06Inclusion Body Preparation and Nickel Matrix Binding
- 03:55On-column Oxidative Crosslinking
- 04:50TFA Elution and Quantitation
- 05:52CNBr Digestion
- 07:54Reversed-phase HPLC Purification of Disulfide-crosslinked Peptide Complexes
- 09:06TrpLE fusions: Transmembrane Peptide Complexes Expressed in Bacteria
- 11:19Conclusion
Biofysische en biochemische studies van interacties tussen membraan-ingebed eiwitdomeinen geconfronteerd met vele technische uitdagingen, waarvan de eerste is het verkrijgen van passende studiemateriaal. Dit artikel beschrijft een protocol voor het produceren en zuiveren van disulfide-gestabiliseerde transmembraan peptide complexen die geschikt zijn voor structurele analyse door oplossing kernspinresonantie (NMR) en andere analytische toepassingen.
