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Marquage métabolique de l'ARN récemment transcrits pour une grande résolution profil d'expression génique de l'ARN de synthèse, le traitement et Decay en culture cellulaire
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Biology
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JoVE Journal Biology
Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA for High Resolution Gene Expression Profiling of RNA Synthesis, Processing and Decay in Cell Culture
DOI:

11:00 min

August 08, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:44Metabolic Labeling with 4-thiouridine
  • 03:05Thiol-specific Biotinylation of Newly Transcribed RNA
  • 05:09Separation of Labeled and Unlabeled RNA Using Streptavidin-coated Magnetic Beads
  • 07:00Recovery of Newly Transcribed RNA
  • 08:17Results: Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA
  • 10:25Conclusion

Summary

Automatic Translation

L'ARN cellulaire total donne un mauvais modèle pour l'étude des changements à court terme dans la synthèse d'ARN et de la décomposition ainsi que les cinétiques de maturation de l'ARN. Ici, nous décrivons marquage métabolique des ARN transcrits récemment avec 4 thiouridine suivie par biotinylation et purification thiol-spécifique des ARN transcrits nouvellement permettant de surmonter ces limitations.

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