A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:28Preparation of Protein Extracts from Cultured Cells
- 03:05Preparation of Protein Extracts from Mouse Liver and Spleen
- 04:56Synthesis of Radiolabeled IRE-containing RNA Probe
- 05:55Purification of Radiolabeled IRE-containing RNA Probe
- 07:48Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA)
- 10:27Results: The Iron-dependence of IRE/IRP Interactions
- 12:17Conclusion
Här presenterar vi ett protokoll för att analysera RNA / proteininteraktioner. Den elektroforetiska rörligheten shift assay (EMSA) är baserad på den differentiella migreringen av RNA / proteinkomplex och fri RNA under nativ gelelektrofores. Genom att använda en radiomärkt RNA-prob, kan RNA / proteinkomplex visualiseras genom autoradiografi.
