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Aplicação de longo prazo cultivadas Interferon-γ Enzyme-linked Immunospot Ensaio para a Avaliação e efetoras de memória T respostas de células em gado
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Application of Long-term cultured Interferon-γ Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle
DOI:

15:57 min

July 11, 2015

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Chapters

  • 00:00Title
  • 01:40Methods
  • 02:05Long-term Culture
  • 03:38Elispot Assay Day 1
  • 04:30Elispot Assay Day 2
  • 05:15Adherent Cell Isolation
  • 05:37Flow Cytometry Plate Preparation
  • 06:15Harvest the 13 Day Long-term Cells
  • 09:05Elispot Assay Day 3
  • 10:04Alkaline Phosphatase Preparation
  • 11:08Substrate Solution Preparation
  • 11:55Reading the Plate
  • 12:12Performing Flow Cytometry
  • 12:25Results
  • 14:37Conclusions

Summary

Automatic Translation

Ensaio enzyme-linked immunospot cultivadas interferão-γ longo termo é usado como uma medida das respostas de memória central e correlaciona-se com a resposta à vacina anti-micobacterianos de protecção. Com este ensaio, as células mononucleares de sangue periférico são estimuladas com antigénios micobacterianos e interleucina-2 durante 14 dias, permitindo a diferenciação e a expansão das células T de memória central.

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