Det här protokollet beskriver den isolering, kultur och förkalkning av råtta-derived ventil interstitiella celler, en mycket fysiologiska in vitro- modell av förkalkade aortaklaffen sjukdom (CAVD). Utnyttjande av denna råtta modell underlättar CAVD forskning att utforska cellen och molekylära mekanismer som ligger bakom denna komplexa patologisk process.