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Cell Biology
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JoVE Science Education Cell Biology
Annexin V and Propidium Iodide Labeling
  • 00:00Overview
  • 01:07Principles Behind Annexin V/PI Staining
  • 03:48Generalized Protocol for Annexin V/PI Staining
  • 05:58Applications
  • 08:23Summary

Annesso V ed etichettatura dello ioduro di propidio

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Overview

La colorazione con annessina V e ioduro di propidio (PI) fornisce ai ricercatori un modo per identificare diversi tipi di morte cellulare, sia necrosi che apoptosi. Questa tecnica si basa su due componenti. La prima, l’annessina V, è una proteina che lega alcuni fosfolipidi chiamati fosfatidilserine, che normalmente si verificano solo nel foglietto interno rivolto verso il citoplasma della membrana di una cellula, ma diventano “capovolti” al foglietto esterno durante le prime fasi dell’apoptosi. Il secondo componente è la molecola colorante PI che lega il DNA, che può entrare nelle cellule solo quando le loro membrane sono rotti, una caratteristica sia della necrosi che dell’apoptosi tardiva.

Questo articolo video inizia con una revisione dei concetti alla base della colorazione dell’annessina V e della PI e sottolinea come i modelli differenziali di colorazione possano essere utilizzati per distinguere tra le cellule che progrediscono lungo diversi percorsi di morte. Esaminiamo quindi un protocollo generalizzato per questa tecnica, seguito da una descrizione di come i ricercatori stanno attualmente utilizzando la colorazione dell’annessina V e PI per comprendere meglio la morte cellulare.

Procedure

L’etichettatura delle cellule dell’annessina V e dello ioduro di propidio (PI) è una tecnica utilizzata per identificare la morte cellulare e distinguere tra le sue diverse vie: apoptosi, o morte cellulare programmata, e necrosi. Le cellule subiscono cambiamenti morfologici distinti a seconda del percorso. Identificando le condizioni specifiche che portano una cellula a subire apoptosi o necrosi, gli scienziati acquisiscono informazioni sulla fisiologia cellulare e sulla fisiopatologia della malattia. L’etichettatura dell…

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No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Annexin V and Propidium Iodide Labeling. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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