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Cell Biology
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JoVE Science Education Cell Biology
Annexin V and Propidium Iodide Labeling
  • 00:00Overview
  • 01:07Principles Behind Annexin V/PI Staining
  • 03:48Generalized Protocol for Annexin V/PI Staining
  • 05:58Applications
  • 08:23Summary

Marcação com Anexina V e Iodeto de Propídio

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Overview

A coloração com iodeto de anexo V e propidium (PI) fornece aos pesquisadores uma maneira de identificar diferentes tipos de morte celular — seja necrose ou apoptose. Esta técnica conta com dois componentes. A primeira, anexa V, é uma proteína que liga certos fosfolipídios chamados fosfatidylserines, que normalmente ocorrem apenas no folheto interno, voltado para citoplasma da membrana de uma célula, mas tornam-se “virados” para o folheto externo durante os estágios iniciais da apoptose. O segundo componente é a molécula de corante de ligação de DNA PI, que só pode entrar nas células quando suas membranas são rompidas — uma característica tanto da necrose quanto da apoptose tardia.

Este artigo de vídeo começa com uma revisão dos conceitos por trás da coloração de V e PI anexa, e enfatiza como padrões diferenciais de coloração podem ser usados para distinguir entre células progredindo por diferentes caminhos de morte. Em seguida, revisamos um protocolo generalizado para essa técnica, seguido de uma descrição de como os pesquisadores estão usando atualmente a coloração de anexos V e PI para entender melhor a morte celular.

Procedure

A rotulagem de células de iodeto de tônias (PI) é uma técnica usada para identificar a morte celular e distinguir entre seus diferentes caminhos: apoptose, ou morte celular programada, e necrose. As células sofrem alterações morfológicas distintas dependendo da via. Ao identificar as condições específicas que levam uma célula a se submeter a apoptose ou necrose, os cientistas ganham uma visão da fisiologia celular e da fisiopatologia da doença. A rotulagem anexa V e PI, seguida pela citometria de fluxo, foi e…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Annexin V and Propidium Iodide Labeling. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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