A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
אסיי המנגינה
English
Share
Overview
אחד מסימני ההיכר של אפופטוזיס הוא פיצול הדנ”א הגרעיני על ידי גרעינים. אנזימים אלה מופעלים על ידי כספיות, משפחת החלבונים המבצעים את תוכנית המוות של התא. TUNEL assay היא שיטה המנצלת תכונה זו כדי לזהות תאים אפופוטוטיים. בבחינה זו, אנזים הנקרא מסוף deoxynucleotidyl transferase מזרז את התוספת של נוקלאוטידים dUTP לקצוות חינם 3 ‘של DNA מקוטע. באמצעות dUTPs המסומנים בתגים כימיים שיכולים לייצר פלואורסצנטיות או צבע, ניתן לזהות תאים אפופטוטיים באופן ספציפי.
הסרטון של JoVE על מבזק TUNEL מתחיל בדיון כיצד ניתן להשתמש בטכניקה זו כדי לזהות תאים אפופטוטיים. לאחר מכן אנו עוברים פרוטוקול כללי לביצוע בדיקות TUNEL על מקטעי רקמות והדמיה של התוצאות באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית. לבסוף, מספר יישומים של ההסתה למחקר הנוכחי יכוסו.
Procedure
בדיקת TUNEL משמשת בדרך כלל כדי לזהות תאים העוברים אפופטוזיס, שהוא סוג של מוות תאים מתוכנת. אפופטוזיס הוא תהליך ביולוגי חשוב במהלך הפיתוח, ולשמירה על הומאוסטזיס של רקמות. כתמי TUNEL מאפשרים הדמיה וכימות של תאים אפופוטוטיים. זה עוזר למדענים לבדוק את היעילות של טיפולים חדשים להפרעות שבהן אפופטוזיס…
Disclosures
No conflicts of interest declared.
Transcript
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. The TUNEL Assay. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
