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Una quantitativa Dot Blot Assay AAV titolazione e suo uso per la valutazione funzionale di Virus Adeno-associato Assembly-attivazione proteine
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Biology
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JoVE Journal Biology
A Quantitative Dot Blot Assay for AAV Titration and Its Use for Functional Assessment of the Adeno-associated Virus Assembly-activating Proteins
DOI:

14:49 min

June 12, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:46Production of AAV in HEK 293 Cells by Plasmid DNA Transfection
  • 02:50Recovery of Viral Particles, and Treatment with Serratia marcescens Endonuclease and Proteinase K
  • 04:20Phenol-choloroform Extraction, Ethanol Precipitation, and Preparation of Plasmid DNA Standards
  • 05:55Dot Blot Assay
  • 08:46Hybridization and Washing
  • 10:50Results: AAV Titration and Functional Assessment of AAP Proteins Using a Quantitative Dot Blot Assay
  • 12:58Conclusion

Summary

Automatic Translation

Questo manoscritto dettagli un saggio di macchia semplice puntino per quantificazione dei titoli del virus adeno-associato (AAV) e la sua applicazione per studiare il ruolo dell'Assemblea-attivazione proteine (AAP), una nuova classe di proteine virali non strutturali, trovate tutte le AAV sierotipi, nel promuovere l'assemblaggio di capsidi derivato da sierotipi AAV cognati ed eterologi.

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