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Une Production efficace et généré par l’Identification de CRISPR/Cas9 les débouchures de gène dans le modèle système Danio rerio

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Efficient Production and Identification of CRISPR/Cas9-generated Gene Knockouts in the Model System Danio rerio

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Une Production efficace et généré par l’Identification de CRISPR/Cas9 les débouchures de gène dans le modèle système Danio rerio

DOI:

10.3791/56969-v

•

11:27 min

•

August 28, 2018

•

Erin L. Sorlien, Mary A. Witucki, Joseph Ogas

¹Department of Biochemistry,Purdue University

Chapters

00:05Title
01:09Preparation of CRISPR-reagents for Embryo Microinjection
04:03Microinjection of CRISPR-components into Zebrafish Embryos
06:12Analysis of Efficiency of Indel Formation Using an HMA
08:45Identification and Propagation of Knock-out Lines
09:45Results: Zebrafish Embryos Exhibit a Pigment Defect when Injected with an sgRNA Targeting Tyrosinase at the One Cell Stage
10:32Conclusion

Summary

Automatic Translation

Édition de génome ciblé dans le système de modèle Danio rerio (poisson-zèbre) a été grandement facilitée par l’émergence des approches axées sur les CRISPR. Ici, nous décrivons un protocole simplifié et robuste pour la génération et l’identification d’allèles de dérivés CRISPR non-sens qui intègre l’analyse de mobilité hétéroduplex et l’identification des mutations à l’aide de séquençage de prochaine génération.

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