Name: גישה במבחנה טיפול פוטודינמי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 53 s
Description: למדו פרוטוקול טיפול פוטודינמי במבחנה לחקר תאי סרטן העור באמצעות 5-ALA ואור כחול. השיטה מאפשרת ניתוח אפופטוזה בזרימה ציטומטרית ופיתוח פרוטוקולים טיפוליים חדשים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

המחברים לא תודות לך

1. הכנת תאים
<ol><li>צלחת 20,000 תאים ב- 2 מ של תרבות בינוני לתוך כל טוב של צלחת 6-ובכן שימוש סטרילי טכניקה אבטחה בארון.</li>
	<li>מקום 6-ובכן צלחות חממה humidified (37 מעלות צלזיוס, 5% CO2) במשך 24 שעות ביממה לאפשר את התאים לדבוק צלחות.</li>
</ol>2. הכנה של פוטוסנסיטייזר לטיפול של תאים
<ol><li>להכין 0.5, 1 ו- 2 מ מ 5-ALA פתרונות במדיום תרבות. אם העובר שור סרום (FBS) הוא מרכיב של תרבות בינוני, להכין, יטפל בתאים עם 5-ALA בפתרון תרבות בינוני עם 0.1% FBS עבור incubations. 11 , 12 . במקרה זה, SCC-13 תאים אינם דורשים FBS, כך 5-ALA נוספו ישירות תקין ללא סרום בינוני בתוספת תמצית יותרת המוח שור, גורם הגדילה באפידרמיס.</li>
	<li>האחות המדיום תרבות ולשטוף את התאים לפחות 2 מ ל תמיסת פוספט buffered (PBS).</li>
	<li>האחות PBS ולהוסיף 2 מ"ל של פתרונות, עלא 5 0, 0.5, 1 או 2 מ מ לתוך צלחות נפרדות או בארות.</li>
	<li>דגירה התאים עם 0, 0.5, 1, או 2 מ מ 5-ALA-36-37 מעלות צלזיוס חימום בלוק עבור 30 דקות להגן על התאים מפני חשיפה קלה במהלך הדגירה באמצעות נייר אלומיניום.</li>
	<li>וארוקן את הפתרונות, עלא 5 0, 0.5, 1 ו- 2 מ מ, לשטוף את התאים עם 2 מ"ל ל- PBS.</li>
	<li>האחות PBS ולהוסיף 2 מ של תרבות בינונית עבור הקרנה אור כחול.</li>
</ol>3. פוטותרפיה אור כחול
<ol><li>לפני בין התאים, הפעל את ההתקן אור כחול (למשל, דיודה פולטת אור, פלורסנט או אור הלוגן) ולהפעיל עבור מחזור אחד (1,000 s) כדי לחמם את המכשיר. המכשיר אור כחול צריך אורך גל של פלט של 417 ± 5 ננומטר. המאפשר את המכשיר להפעיל עבור מחזור אחד לפני טיפולים מבטיח אורך גל האור הכחול ואת irradiance יהיו עקביים לאורך כל השלב photoactivation.</li>
	<li>להשתמש photometer כדי למדוד irradiance על פני התא. אחידות irradiance אור כחול על פני התא צריך להיות mW/cm 102. המרחק בין האור בתאים ייתכן שתצטרך להיות מותאם כדי להשיג של irradiance של 10 mW/cm2 בהתאם האינטנסיביות של מקור האור.</li>
	<li>במקום 0, 0.5, 1 ו- 2 מ מ קבוצות הטיפול ALA על משטח שחור תחת מקור האור הכחול. להאיר את התאים עם אור כחול 1,000 s (16 דקות ו-40 s) עבור הכשרון הכולל של J/cm 102. בעקבות photoactivation אור כחול, התאים הם מוכן לניתוח.</li>
</ol>4. איסוף של צביעת
<ol><li>להכין מאגר זרימה לפי הנחיות יצרן (ראה טבלה של חומרים).</li>
	<li>האחות תרבות בינוני והתאים לשטוף עם 2 מ"ל ל- PBS.</li>
	<li>להוסיף 1 מ"ל של 0.25% טריפסין-EDTA ולאפשר לתאים לנתק למשך כ 3 עד 5 דקות. התאים עשויים לבדוק תחת מיקרוסקופ כדי לאשר ניתוק התא.</li>
	<li>להוסיף 1 מ"ל של תרבות בינוני (או PBS) עם 10% עוברית סרום שור לבטל את הפעלתה של טריפסין.</li>
	<li>לאסוף את ההשעיה תא לתוך צינורות זרימה שכותרתו מ.</li>
	<li>ספין מ ל צינור זרימה ומפרידה ב 201 x g עבור 5 דק וביופסיה פתרון מבלי להסיר תא גלולה.</li>
	<li>להוסיף 200 µL מאגר זרימה עם annexin V מצומדת נוגדנים (1 µL של annexin v לכל µL 39 מאגר זרימה) כל דגימה.</li>
	<li>Resuspend התאים ולמקם בחממה (37 מעלות צלזיוס, 5% CO2) במשך 20 דקות לאפשר annexin V מחייב.</li>
	<li>3 µL של 7-מ להוסיף כל דגימה. תקופת דגירה של 5 דקות בטמפרטורת החדר.</li>
</ol>5. ניתוח Cytometric תזרים
<ol><li>בצע זרימת cytometer הנחיות יצרן הקמה (ראה טבלה של חומרים).</li>
	<li>לאסוף ולנתח דגימות עם cytometry זרימה. 13
</li>
	<li>לבצע השוואה סטטיסטית של טיפול וקבוצות שליטה באמצעות ניתוח השונות (ANOVA)14. להשוות את האמצעים של קבוצות טיפול כדי הממוצע של הפקד עם המבחן של Dunnett לצורך ניתוח פוסט הוק .</li>
</ol>

<ol><li>Morton, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((European+Dermatology+Forum+guidelines+on+topical+photodynamic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">European Dermatology Forum guidelines on topical photodynamic therapy.</a> European Journal of Dermatology. 25 (4), 296-311 (2015).</li>
<li>Ozog, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy%3A+A+clinical+consensus+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Dermatologic+Surgery%3A+Official+Publication+for+American+Society+for+Dermatologic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy: A clinical consensus guide.</a> Dermatologic Surgery: Official Publication for American Society for Dermatologic Surgery. 42 (7), 804-827 (2016).</li>
<li>Abrahamse, H., Hamblin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+photosensitizers+for+photodynamic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Journal%22%5BJournal%5D)">New photosensitizers for photodynamic therapy.</a> Biochemical Journal. 473 (4), 347-364 (2016).</li>
<li>Josefsen, L. B., Boyle, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+and+the+development+of+metal-based+photosensitisers%5BTitle%5D)+AND+%22Metal-Based+Drugs%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy and the development of metal-based photosensitisers.</a> Metal-Based Drugs. 2008, 276109(2008).</li>
<li>Ohgari, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+involved+in+%CE%B4-aminolevulinic+acid+%28ALA%29-induced+photosensitivity+of+tumor+cells%3A+Relation+of+ferrochelatase+and+uptake+of+ALA+to+the+accumulation+of+protoporphyrin%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+pharmacology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms involved in δ-aminolevulinic acid (ALA)-induced photosensitivity of tumor cells: Relation of ferrochelatase and uptake of ALA to the accumulation of protoporphyrin.</a> Biochemical pharmacology. 71 (1-2), 42-49 (2005).</li>
<li>Kessel, D., Luo, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+photodamage+and+PDT-induced+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Photochemistry+and+Photobiology+B%3A+Biology%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial photodamage and PDT-induced apoptosis.</a> Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 42 (2), 89-95 (1998).</li>
<li>Goldberg, D. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18940541">Photodynamic therapy in skin rejuvenation.</a> Clinics in Dermatology. 26 (6), 608-613 (2008).</li>
<li>Sakamoto, F. H., Lopes, J. D., Anderson, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+for+acne+vulgaris%3A+A+critical+review+from+basics+to+clinical+practice%3A+Part+I.+Acne+vulgaris%3A+When+and+why+consider+photodynamic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Academy+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy for acne vulgaris: A critical review from basics to clinical practice: Part I. Acne vulgaris: When and why consider photodynamic therapy.</a> Journal of the American Academy of Dermatology. 63 (2), 183-193 (2010).</li>
<li>Boen, M., Brownell, J., Patel, P., Tsoukas, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+photodynamic+therapy+in+acne%3A+An+evidence-based+review%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+Dermatology%22%5BJournal%5D)">The role of photodynamic therapy in acne: An evidence-based review.</a> American Journal of Clinical Dermatology. 18 (3), 311-321 (2017).</li>
<li>Allison, R. R., Moghissi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncologic+photodynamic+therapy%3A+Clinical+strategies+that+modulate+mechanisms+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Photodiagnosis+and+Photodynamic+Therapy%22%5BJournal%5D)">Oncologic photodynamic therapy: Clinical strategies that modulate mechanisms of action.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 10 (4), 331-341 (2013).</li>
<li>Koo, E., Austin, E., Mamalis, A., Jagdeo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermal+ultra+short+photodynamic+therapy%3A+heating+fibroblasts+during+sub-30-minute+incubation+of+5-aminolevulinic+acid+increases+photodynamic+therapy-induced+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Dermatologic+Surgery%3A+Official+Publication+for+American+Society+for+Dermatologic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Thermal ultra short photodynamic therapy: heating fibroblasts during sub-30-minute incubation of 5-aminolevulinic acid increases photodynamic therapy-induced cell death.</a> Dermatologic Surgery: Official Publication for American Society for Dermatologic Surgery. , (2017).</li>
<li>Koo, E., Austin, E., Mamalis, A., Jagdeo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+ultra+short+sub-30+minute+incubation+of+5-aminolevulinic+acid+photodynamic+therapy+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+in+Surgery+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Efficacy of ultra short sub-30 minute incubation of 5-aminolevulinic acid photodynamic therapy in vitro.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 49 (6), 592-598 (2017).</li>
<li>JoVE Science Education Database. <a target="_blank" href="https://www.jove.com/science-education/5650/annexin-v-and-propidium-iodide-labeling">Cell Biology. Annexin V and Propidium Iodide Labeling.</a> JoVE. , Cambridge, MA. (2018).</li>
<li>Mamalis, A., Koo, E., Sckisel, G., Siegel, D., Jagdeo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-dependent+impact+of+thermal+aminolaevulinic+acid+photodynamic+therapy+on+apoptosis+and+reactive+oxygen+species+generation+in+human+dermal+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Temperature-dependent impact of thermal aminolaevulinic acid photodynamic therapy on apoptosis and reactive oxygen species generation in human dermal fibroblasts.</a> British Journal of Dermatology. 175 (3), 512-519 (2016).</li>
<li>Gilaberte, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+intrinsic+factors+involved+in+the+resistance+of+squamous+cell+carcinoma+to+photodynamic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Cellular intrinsic factors involved in the resistance of squamous cell carcinoma to photodynamic therapy.</a> Journal of Investigative Dermatology. 134 (9), 2428-2437 (2014).</li>
<li>Yoon, H. K., et al. <a target="_blank" href="https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/cm403505s">Nanophotosensitizers engineered to generate a tunable mix of reactive oxygen species, for optimizing photodynamic therapy, using a microfluidic device.</a> Chemistry of Materials. 26 (4), 1592-1600 (2014).</li>
<li>Chen, Y. -C., Lou, X., Zhang, Z., Ingram, P., Yoon, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+cancer+cell+sphere+formation+for+characterizing+the+efficacy+of+photo+dynamic+therapy+in+3D+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">High-throughput cancer cell sphere formation for characterizing the efficacy of photo dynamic therapy in 3D cell cultures.</a> Scientific Reports. 5, 12175(2015).</li>
<li>Campos, C., Inada, N., Kurachi, C. <a target="_blank" href="https://www.spiedigitallibrary.org/conference-proceedings-of-spie/10476/104760S/Low-dose-PDT-on-breast-cancer-spheroids/10.1117/12.2290915.short?SSO=1">Low-dose PDT on breast cancer spheroids.</a> Optical Methods for Tumor Treatment and Detection: Mechanisms and Techniques in Photodynamic Therapy XXVII. , (2018).</li>
<li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+temperature+on+5-aminolevulinic+acid-based+photodynamic+reaction+in+keratinocytes+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Photodermatology%2C+Photoimmunology+%26+Photomedicine%22%5BJournal%5D)">The influence of temperature on 5-aminolevulinic acid-based photodynamic reaction in keratinocytes in vitro.</a> Photodermatology, Photoimmunology & Photomedicine. 26 (2), 83-88 (2010).</li>
<li>Juzeniene, A., Juzenas, P., Kaalhus, O., Iani, V., Moan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+effect+on+Accumulation+of+protoporphyrin+IX+after+topical+application+of+5-aminolevulinic+acid+and+its+methylester+and+hexylester+derivatives+in+normal+mouse+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Photochemistry+and+Photobiology%22%5BJournal%5D)">Temperature effect on Accumulation of protoporphyrin IX after topical application of 5-aminolevulinic acid and its methylester and hexylester derivatives in normal mouse skin.</a> Photochemistry and Photobiology. 76 (4), 452-456 (2002).</li>
<li>Novak, B., Heesen, L., Schary, N., Lubbert, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+different+illumination+parameters+on+protoporphyrin+IX+induced+cell+death+in+squamous+cell+carcinoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Photodiagnosis+and+Photodynamic+Therapy%22%5BJournal%5D)">The influence of different illumination parameters on protoporphyrin IX induced cell death in squamous cell carcinoma cells.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 21, 385-392 (2018).</li>
</ol>

התרופות DUSA/שמש מסופקים 5-ALA וההתקן אור BLU-U. כתב יד זה נתמך על ידי ממסר של ד ר Jagdeo מימון. התכנים אינם מייצגים את נופי המחלקה לענייני חיילים משוחררים ארה ב או ממשלת ארצות הברית.

היה גידול משמעותי אפופטוזיס SCC-13 בעקבות 30 דקות incubations של 0.5, 1 ו- 2 מ מ 5 עלא ואחריהם 1,000 s של אור כחול. תוצאות אלה הן בקנה אחד עם המחקר שלנו שפורסמו בעבר הוכחת כי 5-ALA incubations של 30 דקות ואחריו הפעלה אור כחול מוביל לעלייה למינון באחוזים של תאי פיברובלסט שעברו אפופטוזה12, 14.
זו גישה נסיונית כדי PDT לומד יש יתרונות ומגבלות. השיטות שתואר לציית הקלינית כפי PS זמינים מסחרית ושימשו מקור האור. חוקרים רשאים להתאים אישית את השיטות עם סוגי תאים שונים, PSs, מקורות אור ופרמטרים הקרנה. עם זאת, קיימות מגבלות גישה זו כמו פרוטוקול זה תוכנן עבור תאים חסיד תרבותי ב טפט. באימון קליניים, הבדלים רקמות פתולוגיה אדריכלות או מחלה (קרי, hyperkeratosis או פיברוזיס) עשויה להקטין PS הקליטה או אור חדירה15. כתוצאה מכך, הטיפול במינונים של ממצאי הניסוי לא ישירות יתאימו ל הקלינית. ספרואיד הגידול מודלים, microfluidic שבב נחקרו כפעולות להשתכפל יותר מקרוב את הגידול microenvironments16,17,18. Spheroids יש נישות הסלולר הפנימיים והחיצוניים עשויים לשלב את photosensitizers באופן שונה, מייצגים גידול הטרוגנית אדריכלות. חוקרים אחרים השתמשו microfluidic צ'יפס על המסך טיפול תנאי ומסירת כלי הדם photosensitizers. עם זאת, צ'יפס microfluidic עשוי להיות יקר לפתח או קשה ליישום עבור חוקרים לא מוכר עם הטכניקה. יתר על כן, spheroids וצ'יפס microfluidic אינן משקפות בהכרח הטיפול הקליני של סרטן העור שבו photosensitizers מוחלים ישירות אל פני השטח הגידול ללא כלי דם הפצתו. חוקרים, ייתכן שיהיה עליך להעריך את היתרונות והחסרונות של טפט תרבות, ספרואיד הגידול מודלים microfluidic צ'יפס עבור לימוד PDT במערכות מחלות שונות. כפי אין תאים חיסוניים או מטריצה חוץ-תאית, אין אפשרות לקבוע כיצד PDT משפיע על תאים תאים מורכבים אינטראקציות. חוקרים, ייתכן שיהיה עליך לאשר במבחנה תוצאות ניסויי באמצעות מודלים של ניסויים קליניים. כדי להשיג תוקף הבין-המבחן גבוהה, חשוב לשמור על דגירה עקבי ופרמטרים אור בעת ביצוע ניסויים במבחנה PDT.
הטמפרטורה ידועה לשנות את היעילות של PDT19. מחקר אחד הוכיח כי מוות של תאים, ספיגת 5-ALA, היווצרות PP-IX, ושחרור ציטוקינים עשוי להיות מוגברת על ידי המקננת תאים עם 5-ALA בטמפרטורות עד 44 ° C19. הדגירה טמפרטורות מעל 44 ° C עלולה להוביל מוות תאי המושרה תרמי, דגירה בטמפרטורה שמתחת 20 ° C עלולה להוביל לא משמעותי ספיגת 5-ALA והצטברות19. אנו ממליצים כי החוקרים לבצע PS incubations על בלוק חימום הטמפרטורה-מתכווננת בטמפרטורה קבועה לפקד עבור פוטנציאל משתנה מתערב מהשפעות תרמיות. בנוסף, חשוב תקופת דגירה של פוטוסנסיטייזר של כמות מספקת של זמן כדי לאפשר ההמרה של 5-ALA לתוך PP-IX. ב פרוטוקול זה, SCC-13 תאים היו מודגרות עם 5-ALA למשך 30 דקות, אשר בהצלחה המושרה תא אפופטוזיס. בעבר הראו כי דגירה 10 דקות של 5-ALA לא להגביר באופן משמעותי אפופטוזיס פיברובלסט לעומת שליטה שאינו מטופל fibroblasts11,14. PP-IX מתחיל לצבור בעור העכבר לאחר 5-ALA היא המקננת במשך שש דקות ב 37 º C. לכן, אחרי עשר דקות של דגירה 5-ALA, ייתכן שאין מספיק הצטברות PP-IX לזירוז תא אפופטוזיס20. אנו ממליצים על תקופת הדגירה מינימום 20-30 דקות במשך 5-ALA בהתבסס על שלנו11,הקודם מחקרים14. חוקרים, ייתכן שיהיה צורך לייעל את תקופת דגירה בהתבסס על המעבדה הגדרת, פוטוסנסיטייזר של ריבית, סוג התא אינדיקציה קלינית. ניתן לבצע ניסויים טיטור ואופטימיזציה נוגדן לקבלת התוצאות הטובות ביותר באמצעות הנחיות היצרנים. ניתן לבצע מבחני אחרים עניין בעקבות photoactivation אור כחול, כולל dihydroethidium זרימה cytometric כימות של ROS. 14
וריאציה אור נמסר לכל יחידת שטח (קרי, irradiance), הכולל הקרנה במינון (קרי, הכשרון) במהלך השלב photoactivation עלול להשפיע על היווצרות ROS ו תא אפופטוזיס21. היחסים בין הכשרון, irradiance ושעה יכולה להיות מתוארת באמצעות המשוואה הבאה:
הכשרון (J/cm2) = Irradiance (W/cm2) x זמן (s)
כמו הכשרון הוא תלוי זמן, הארכה או קיצור שלבי photoactivation עשויים להשתנות יעילות הטיפול. אחידות irradiance הוא יחסי מרחק בריבוע בין מקור האור את רקמת המטרה. כתוצאה מכך, אם האור הוא רחוק מדי, ייתכן שאין מספיק אנרגיית האור נמסר רקמות ייעודיים כדי לעורר PS.. לחלופין, אחידות irradiance עלולה להיות מוגברת על ידי אור המשקף הנחה המשטחים שמסביב. לכן, אנו ממליצים ביצוע irradiations אור עם הצלחות תרבות תא מניחים על משטח שחור כדי למנוע השתקפות אור. חוקרים עשויה לרכוש מסחרית זמינים או שאושרו על-ידי ה-FDA כחול דיודות פולטות אור והתקנים פלורסנט להשתמש בניסויים PDT, אך התקנים אלה ייתכן פלטים כוח שונים, שדה אור אחידות. Photometer גל ספציפי אמור לשמש כדי למדוד את irradiance תא השטח, אחידות של השדה אור לפני בכל ניסוי עבור תוצאות עקביות. ניתן להשתמש מפזר זמינים מסחרית כדי לשפר את שדה אחידות, במידת הצורך.
לסיכום, תארנו במבחנה גישה חוקרת PDT לפי המפרט את התיאוריה, שיטות נסיוניות, מגבלות, מוקשים פוטנציאליים והמלצות עבור אופטימיזציה. PDT הוא שמחקר בהליך ו במבחנה קליני שימושי עשוי לאפשר פיתוח PSs הרומן, אופטימיזציה של פרוטוקולים, סימנים חדשים עבור PDT.

טיפול פוטודינמי (PDT) היא הליך רפואי המערבת דגירה על פוטוסנסיטייזר exogenously יישומית (PS) ואחריו photoactivation אור גלוי לזירוז תא אפופטוזיס. הניהול סמים הפדרלי (FDA) אישר PDT לטיפול קרנת אקטינית (אי קאי), הנחיות קליניות ממליצים PDT לטיפול אקנה וולגריס1,2של עור שאינו מלנומה סרטן מסוימים. שימושים שאינם דרמטולוגיים המתעוררים PDT כוללים טיפול במערכת העיכול, הערמונית, הגינקולוגית סרטן3. PDT הוא מודאליות טיפולית יתרון זה בעלות נמוכה, לא פולשנית, הקשורים עם תופעות לוואי מינימליות הצטלקות2.
בשלב הראשון של PDT, PS חלה, מותר לצבור intracellularly2. בארצות הברית, עכשוי 5-aminolevulinic חומצה (5-ALA) משמש בדרך כלל לטיפול AKs. במהלך שלב, 5-ALA מומר protoporphyrin התשיעי (PP-IX) דרך השביל ביוסינטזה heme תאים incorporated3. תאי סרטן וסרטן קדם פחתו ferrochelatase פעילות, אשר ממירה protoporphyrin התשיעי (PP-IX), המוצר הסופי, heme. כתוצאה מכך, תאי סרטן לצבור PP-IX לעומת תאים נורמליים4,5. זו הצטברות של PP-IX בסרטן, תאים סרטניים מראש ביחס הרקמה שמסביב מאפשר PDT להיות בגישה יישוב עם תופעות לוואי מינימליות. הקרנה אור מוביל החמצן מגיב מינים (ROS) דור כאשר חמצן מקבל אלקטרונים מ PP-IX. PP-IX יש קליטה שיא בספקטרום סגול עם פסגות קטנות יותר ברחבי גלוי הספקטרום אור, כולל אור כחול ואדום2. היווצרות ROS עשוי להוביל בסופו של דבר תא אפופטוזיס, הפרעה ממברנה, נזק מיטוכונדריאלי, אפנון המערכת החיסונית, התפשטות תקין ו קולגן מחזור6,7,8,9 , 10.
PDT פותחה בשנות השבעים והוא מודאליות טיפולית המתפתחת3. פרוטוקול שאושרו על-ידי ה-FDA לטיפול של מיכל ממליצה 5-ALA העור הדגירה במשך 14 – 18 h, אך incubations h 1 עד 2 משמשים הקלינית2. חוץ גופית ב , אנחנו הראו כי קצר יותר 15 דקות 5-ALA incubations עשוי להגדיל את אפופטוזיס תאי פיברובלסט בהשוואה fibroblasts לא מטופל11,12. בנוסף, הרומן chlorin, phthalocyanine ו- PSs מבוססי ננו-חלקיק להיות נלמדים כדי לשפר את היעילות PDT3. במסמך זה, אנו מציגים שיטה במבחנה כדי לימוד PDT חסיד קשקש קרצינומה של תאים תאים. ב פרוטוקול זה, SCC-13 תאים מודגרת עם 0, 0.5, 1.0 ו- 2 מ מ 5-ALA עבור 30 min ו- photoactivated עם 417 אור כחול nm 1,000 s. מדד התוצאה העיקרי הוא אפופטוזיס נמק, כפי שהיא נמדדת cytometry זרימה annexin V ו- 7-aminoactinomycin D (7-מ). פרוטוקול טיפול זה מיועד כדי לדמות PDT, עשוי להיות מותאם כדי ללמוד את השימוש PDT עם אחרים שורות תאים, photosensitizers, דגירה טמפרטורות או אורכי הגל photoactivation. הכנת קבוצות פקדים נוספים עשוי להיות נחוץ, כולל fluorophore וללא רבב, יחיד צבעונית, פקדי השליליים והחיוביים עבור cytometry זרימה. סקירה מקיפה של התיאוריה, פרוטוקולים, תכנון ניסויים gating עבור cytometry זרימה אפופטוזיס/נמק ניתן למצוא במקום13.

<table><tbody><tr><td>קרטינוציטים ללא סרום בינוני&nbsp;</td>מדיום תרבית <td>17005042 תרמופישר</td><td></td><td>לתאי SSC-13</td></tr><tr><td>DMEM גלוקוז נמוך גלוטמקס</td><td>תרמופישר</td><td>10567022</td><td>מדיום תרבית אפשרי לסוגי תאים אחרים</td></tr><tr><td>צלחות תרבית 6 בארות</td><td>תרמופישר</td><td>720083</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>תרמופישר</td><td>14190250</td><td></td></tr><tr><td>0.25% טריפסין-EDTA</td><td>תרמופישר</td><td>25200056</td><td></td></tr><tr><td>טריפן Blue Solution, 0.4%</td> <td>Thermofisher</td><td>15250061</td><td>לספירת תאים וציפוי&nbsp;</td></tr><tr><td>אור BLU-U&nbsp;</td><td>בקשת DUSA</td><td>מהיצרן</td><td>ניתן להשתמש בנורות LED כחולות אחרות, פלורסנט או הלוגן&nbsp;</td></tr><tr><td>5-ALA</td><td>DUSA</td><td>בקשה מהיצרן</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Atlanta Biologicals</td><td>C17032</td><td></td></tr><tr><td>FlowCellect Annexin Red Kit</td><td>Millipore Sigma&nbsp;</td><td>FCCH100108&nbsp;</td><td>פרופידיום יודיד עשוי להחליף 7-AAD. מגיע עם נספח-V, 7-AAD ומאגר זרימה</td></tr><tr><td>FACSCanto II</td><td>BD</td><td>בקשת היצרן</td><td>ניתן להשתמש בכל ציטומטר זרימה&nbsp;</td></tr><tr><td>תא ספירה</td><td>Hausser</td><td>3120</td><td>לספירת תאים וציפוי&nbsp;</td></tr><tr><td>בקשת FlowJo</td><td>FlowJo</td><td>מהיצרן</td><td>תוכנת ניתוח ציטומטריה Flow</td></tr></tbody></table>

גישה במבחנה טיפול פוטודינמי

An In Vitro Approach to Photodynamic Therapy

טיפול פוטודינמי (PDT) היא הליך רפואי המערבת דגירה על פוטוסנסיטייזר exogenously יישומית (PS) ואחריו photoactivation אור גלוי לזירוז תא אפופטוזיס. הממשל הפדרלי הסמים אישרה PDT לטיפול קרנת אקטינית, הנחיות קליניות ממליצים PDT לטיפול אקנה דלקתית של עור שאינו מלנומה סרטן מסוימים. PDT הוא מודאליות טיפולית יתרון הוא בעלות נמוכה, לא פולשנית, והוא מזוהה עם תופעות לוואי מינימליות ולא מפחיד. בשלב הראשון של PDT, PS חלה, מותר לצבור intracellularly. הקרנה אור עוקבות גורם היווצרות מינים חמצן תגובתי, דבר שעלול להוביל בסופו של דבר תא אפופטוזיס, ממברנה הפרעה, נזק מיטוכונדריאלי, אפנון המערכת החיסונית, התפשטות תקין ו מחזור קולגן. במסמך זה, אנו מציגים שיטה במבחנה ללימוד PDT בשורה התא חסיד. פרוטוקול טיפול זה מיועד כדי לדמות PDT, עשוי להיות מותאם כדי ללמוד את השימוש PDT עם שונים שורות תאים, photosensitizers, דגירה טמפרטורות או אורכי הגל photoactivation. קשקש קרצינומה של תאים היו מודגרות עם 0, 0.5, 1.0 ו- 2 מ מ 5-aminolevulinic חומצה (5-ALA) עבור 30 min ו- photoactivated עם 417 אור כחול nm 1,000 s. מדד התוצאה העיקרי היה אפופטוזיס נמק, כפי שהיא נמדדת cytometry זרימה D annexin V ו- 7-aminoactinomycin. הייתה עלייה למינון של אפופטוזיס תא בעקבות שלושים דקות דגירה של 5-ALA. כדי להשיג תוקף הבין-המבחן גבוהה, חשוב לשמור על דגירה עקבי ופרמטרים אור בעת ביצוע ניסויים במבחנה PDT. PDT הוא שמחקר בהליך ו במבחנה קליני שימושי עשוי לאפשר פיתוח PSs הרומן, אופטימיזציה של פרוטוקולים, סימנים חדשים עבור PDT.

לאחר SCC-13 היו תאי הדגירה למשך 30 דקות עם 0, 0.5, 1, 2 מ מ 5-ALA, מוקרן עם 1,000 s של כחול בהיר, הייתה עלייה למינון של אפופטוזיס תא. סה כ אפופטוזיס (זאת אומרת ± לשגיאה הסטנדרטית של ממוצע) היתה 3.94 ± 0.34, ± 7.90 0.52, 23.86 ± 0.52 ולאחר 38.33 ± 1.81 לאחר 30 דקות של דגירה עם 0, 0.5, 1, 2 מ מ 5-ALA, בהתאמה, ו- 1000 שניות של כחול בהיר (איור 1). אנחנו לעומת האחוז אכזרי של מוות תאים בין 0, 0.5, 1, וקבוצות 2 מ מ 5-ALA מתפשט באמצעות ANOVA. תאים שטופלו 1 ו- 2 מ מ 5-ALA הייתה עלייה משמעותית אפופטוזיס תא לעומת 0 מ מ 5-ALA תאים שטופלו. איור 2A מראה זרימה נציג cytometric gating של פיזור קדמי (FSC) לעומת הצד פיזור (האס) עבור תאים SCC-13 מודגרות עם 0, 0.5, 1, 2 מ מ 5-ALA. מעגל gating יקיף את האוכלוסייה תא SCC-13. את הניסוי הזה, אירועים 7500 שנאספו, השער אוכלוסיית תאים SCC-13 שנתפסו לפחות 90% מהאירועים. איור 2B מציג מגרש נציג של 7-מ על ה-x וציר annexin V בציר ה-y. האוכלוסיות תא הן פיקוח לתוך ארבעת הרבעים (Q1 עד ש4) להפלות בתאים אפופטוטיים להיפגע. Q1 (גבוהה annexin v, נמוכה 7-מ) מייצג תאים עוברים אפופטוזיס מוקדם. Q2 (גבוהה גבוהה, annexin v 7-מ) לייצוג תאים שעברו אפופטוזה מאוחר או נמק. Q3 (נמוך annexin v, גבוהה 7-מ) מייצג תאים שעברו נמק. Q4 (נמוך annexin v, נמוכה 7-מ) מייצג תאים לא עוברת אפופטוזיס או נמק. כדי לחשב את אחוז התאים עוברים אפופטוזיס, הוספנו את האחוז של תאים ב- Q1 ו- Q2. חוסר עקביות אורך תקופת הדגירה 5-ALA, בטמפרטורת דגירה או photoactivation הקרנה במינון עשוי לשנות PDT היעילות. איור 3 מדגים נציג annexin V ו- 7-מ זרימת cytometric מגרש כאשר הטמפרטורה הדגירה מגוונת (קרי, 27, 36 או 42 ° C). היה גידול תלוי טמפרטורה אפופטוזיס.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58190/58190fig1.jpg"> איור 1: למינון עלייה אפופטוזיס לאחר שלושים דקות דגירה של 5-ALA. 5-ALA מודגרות ב 36 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות ולאחריו 1,000 s של אור כחול בתאים SCC-13. העמודות מייצגות ממוצע אחוז annexin V חיובי תאים כל טיפול וכל קבוצת הביקורת. הניסויים בוצעו שהפקידים טכני. מובהקות סטטיסטית נקבע על ידי ANOVA, עם p &lt; 0.05 מסומן על ידי כוכבית (*). קווי שגיאה לייצג זאת אומרת ± שגיאת התקן של הממוצע. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58190/58190fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58190/58190fig2.jpg"> איור 2: מגרשים נציג Cytometry זרימה. (א) נציג פיזור קדימה לעומת הצד פיזור cytometry מגרשים ב יחידות שרירותי (AU) עבור x - ו y ציר עבור 0, 0.5, 1 ו- 2 מ מ 5-ALA מודגרות תאים. את הניסוי הזה, אירועים 7500 שנאספו, השער אוכלוסיית תאים SCC-13 שנתפסו 90% מהאירועים. (B) נציג annexin V לעומת 7-מ cytometry זרימה חלקות ב AU עבור x - ו y ציר עבור 0, 0.5, 1 ו- 2 מ מ 5-ALA מודגרות תאים. ש1: בתאים אפופטוטיים להיפגע מוקדם, Q2: בתאים אפופטוטיים להיפגע/נמק מאוחר, Q3: תאים עם נמק, ו- Q4: התאים קיימא. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58190/58190fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58190/58190fig3.jpg"> איור 3: המקננת 5-ALA בטמפרטורות שונות עשוי לשנות היעילות PDT. נציג annexin V לעומת cytometry זרימה 7-מ מגרשים ב AU עבור x - ו y ציר עבור תאים SCC-13 מודגרות עם 0.5 מ מ 5-ALA-27, 36 ו- 42 ° C. ש1: בתאים אפופטוטיים להיפגע מוקדם, Q2: בתאים אפופטוטיים להיפגע/נמק מאוחר, Q3: תאים עם נמק, ו- Q4: התאים קיימא. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58190/58190fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

טיפול פוטודינמי (PDT) היא הליך רפואי הכרוך דגירה של אפלייד exogenously פוטוסנסיטייזר (PS) ואחריו photoactivation אור גלוי כדי לגרום אפופטוזיס. אנו מציגים במבחנה PDT פרוטוקול שנועדו לדמות PDT בהם ניתן ללמוד הבדלים PS הדגירה ופרמטרים טיפול קל.

Photodynamic therapy (PDT) is a medical procedure that involves incubation of an exogenously applied photosensitizer (PS) followed by visible light ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח לגבי טיפול פוטודינמי, הידוע גם בשם PDT. השאלות שניתן לענות עליהן בשיטה זו כוללות את משך הדגירה של חומר רגיש לאור, או שימוש בפרמטרים שונים בניסוי כמו שינוי הטמפרטורה על ידי חימום או קירור התאים. טכניקה זו יכולה לסייע בפיתוח במבחנה של רגישים לאור, פרוטוקולים ואינדיקציות חדשים ל-PDT.התחל בציפוי פעמיים 10 עד התאים הרביעיים בשני מיליליטר של מדיום תרבית לכל באר של צלחת שש בארות בטכניקה סטרילית לדגירה של 24 שעות ב-37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו חמצני. למחרת יש לשטוף את התאים עם לפחות שני מיליליטר PBS ולטפל בתרבויות עם אפס, אפס נקודה חמש, אחד או שני דילולים של 5-ALA טרי שהוכן. לאחר מכן הניחו את הצלחת על גוש חימום של 36-37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות מוגן מפני אור.במהלך ההליך, אנו ממליצים במהלך שלב הדגירה שהחוקרים ישתמשו בבלוק חימום כדי להשיג טמפרטורה עקבית לאורך כל תקופת הדגירה. בנוסף, אנו ממליצים לכסות את התאים בתקופת הדגירה בנייר אלומיניום כדי למנוע הפעלת ארל של הרגישות לאור. בתום הדגירה יש לשטוף את התאים בכל באר עם שני מיליליטר PBS.ולרענן את התרבויות עם שני מיליליטר של מדיום תרבית טרי לקרינת אור כחול. לפני הקרנת התאים, יש לחמם את מכשיר האור הכחול באורך גל פלט של 417 ננומטר למשך מחזור אחד של 1,000 שניות ולהשתמש בפוטומטר כדי למדוד את הקרינה על פני התא, תוך התאמת מרחק האור להשגת הקרינה המתאימה בהתאם לעוצמת מקור האור. לאחר מכן הנח את התאים שטופלו ב-5-ALA על משטח שחור מתחת לאור הכחול למשך 1,000 שניות לשטף כולל של 10 ג'אול לסנטימטר מרובע.במהלך הפעלת הצילום, אנו ממליצים להניח את התאים על משטח שחור כדי למנוע השתקפות אור ומינון לא עקבי. בתום הטיפול בפוטותרפיה יש לשטוף את התאים בכל באר בשני מיליליטר PBS ולנתק את התאים במיליליטר אחד של 0.25% טריפסין-EDTA לבאר. לאחר שלוש עד חמש דקות, אשר את הניתוק והשבת את הטריפסין עם 10% FBS ו-PBS.העבירו את התאים מכל באר לצינורות זרימה בודדים של חמישה מיליליטר ואספו את התאים על ידי צנטריפוגה. הוסף 200 מיקרוליטר של מאגר זרימה עם נוגדן נספח-V מצומד לכל דגימה. השעו מחדש את התאים והניחו את הצינורות לתוך החממה למשך 20 דקות כדי לאפשר קשירת נספח-V.בתום הדגירה יש להוסיף שלושה מיקרוליטרים של 7-AAD לכל דגימה ולדגור שוב בטמפרטורת החדר למשך חמש דקות ולאחר מכן ניתוח דגימה שנעשה על פי פרוטוקולי ניתוח ציטומטרי זרימה סטנדרטיים. לאחר חמישה טיפולי ALA ופוטותרפיה באור כחול, נצפתה עלייה תלוית מינון באפופטוזיס של התאים. כדי לחשב את אחוז התאים שעוברים אפופטוזיס, מתווספים אחוז התאים ברבעים הגבוהים של נספח-V, 7-AAD נמוך ו-Annexin-V גבוה, 7-AAD גבוה.חוסר עקביות באורך תקופת הדגירה של חמש ALA, טמפרטורת הדגירה או מינון הקרנת הפעלת האור עלולים לשנות את יעילות הפוטותרפיה, וכתוצאה מכך עלייה תלוית טמפרטורה באפופטוזיס, למשל. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע טכניקות אחרות כולל RTQPCR וכתם מערבי כדי לקבוע כיצד PDT משנה את ביטוי הגנים ואת פעילות החלבון. שיטה זו מאפשרת לחוקרים המעוניינים בטיפול פוטודינמי לגלות את ההשפעות על תאי סרטן העור ומחלות עור אחרות במבחנה.

an-in-vitro-approach-to-photodynamic-therapy

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

טיפול פוטודינמי (PDT) הוא שיטה לא פולשנית ולא ניתוחית לטיפול בסרטן ריאות. פוטוסנסיטיזרים מצטברים באופן סלקטיבי ברקמת הגידול ומובילים למוות תאי הגידול בנוכחות חמצן ואורך גל תקין של אור. בסרטון פרוטוקול זה, שיטה מבוססת PDT משמשת להערכת הפוטנציאל הפוטוטוקסי של פוטוסנסיטיזר פוטנציאלי בתאי סרטן ריאות.

בדיקת פוטוטוקסיות חוץ גופית: שיטה מבוססת PDT להערכת הפוטנציאל הפוטוטוקסי של פוטוסנסיטיזר בתאי סרטן ריאות

טיפול פוטודינמי (PDT) הוא שיטה לא פולשנית ולא ניתוחית לטיפול בסרטן ריאות. פוטוסנסיטיזרים מצטברים באופן סלקטיבי ברקמת הגידול ומובילים למוות תאי הגידול בנוכחות חמצן ואורך גל תקין של אור. סרטון זה מתאר את ניתוח היעילות נגד גידולים in vivo באמצעות photoensitizer המכיל ננו-חלקיקים בעכבר נושא גידול, כדי לקבוע את הפוטנציאל הפוטוטוקסי של הפוטו-נסיטייזר.

In Vivo Antitumor Efficacy Analysis of PDT: טכניקה לקביעת הפוטנציאל הפוטוטוקסי של פוטוסנסיטיזר בעכברים נושאי גידול

סרטון זה מדגים טכניקה להסרה סלקטיבית של תאים ספציפיים מתרבית תאים תלת-ממדית מעורבת באמצעות פוטואימונותרפיה תת-אדומה קרובה. בשיטה זו, תאים ממוקדים מזוהים במדויק באמצעות נוגדן מצומד עם קולט אור NIR. הקרנה לאחר מכן עם אור אינפרא אדום גורמת למוות תאים, ולמעשה מבטלת את תאי המטרה מהתרבות התלת-ממדית.

פוטואימונותרפיה כמעט אינפרא אדומה לסילוק תאים ממוקד בתרביות תלת-ממד מעורבות

הפרוטוקול דיווח כאן מאפשר ההערכה של היעילות של טיפול פוטודינמי (PDT) בשורות תאים ואופטימיזציה של הגדרות PDT לפני יישום הטיפול במודלים של בעלי חיים.

ציטוטוקסיות יעילות של טיפול פוטודינמי בתאי אוסטאוסרקומה<em&gt; במבחנה</em

חיסול תאים ספציפיים מבלי לפגוע בתאים אחרים הוא קשה ביותר, במיוחד ברקמות מבוססות, אך יש צורך דחוף בשיטת אלימינציה של תאים בתחום הנדסת הרקמות. כאן, אנו מציגים שיטה לחיסול תאים ספציפיים מתרבית תאים תלת מימדית מעורבת באמצעות פוטו-אימונותרפיה אינפרא אדום (NIR-PIT).

ביעור Cell סלקטיבי מן תרבות 3D מעורבת באמצעות טכניקה האדומה קרוב Photoimmunotherapy

פוטוימונותרפיה כמעט אינפרא אדום (NIR-PIT) היא אסטרטגיה טיפולית מתפתחת לסרטן המשתמשת בנוגדן-פוטואבסורבר (IR700Dye) מצומד ואור NIR כדי להרוס תאים סרטניים. כאן, אנו מציגים שיטה להערכת ההשפעה האנטי-אטומית של NIR-PIT במודל עכבר של סרטן ריאות מופץ pleural ומזותליומה פלורלית ממאירה באמצעות הדמיית ביולומינציה.

ליד פוטוימונותרפיה אינפרא אדום עבור מודלים עכבר של הפצת Pleural

כאן אנו מתארים מכשיר חדשני, פשוט ובעלות נמוכה לביצוע מוצלח של מבחני טיפול פוטודינמי במבחנה (PDT) תוך שימוש בתרבית תאי HeLa דו-ממדית וורטפורפין כפוטוסנסיטייזר.

מכשיר טיפול פוטודינמי מבוסס דיודה פולטת אור הבנוי בתוך הבית להגברת ציטוטוקסיות של חוליות במודל תרבית תאים דו-ממדית

פרוטוקול זה מציג סדרה של ניסויים שאומצו להערכת פפטידים אנטי-סרטניים הניתנים להחלפה, שניתן להשתמש בהם בסינון פרה-קליני של תרכובות כאלה. זה כולל הערכת ציטוטוקסיות בתרביות תאים דו-ממדיות ותלת-ממדיות, הערכת יעילות פוטואיזומריזציה של רקמת מודל (ex vivo) ויעילות in vivo .

הערכה חוץ גופית ו-in vivo של תרכובות פעילות ביולוגיות מבוקרות - תרופות מועמדות פוטנציאליות לפוטופרמקולוגיה של סרטן

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה וחסכונית להערכת היעילות של רגישים לאור פוטו-רגישים פוטנציאליים באינאקטיבציה פוטודינמית אנטיבקטריאלית (aPDI), תוך שימוש בפורמט צלחת של 96 בארות בשילוב עם מקור אור פאנל LED. גישה זו מאפשרת בדיקה בו-זמנית של תנאי ניסוי מרובים, כולל ריכוזים שונים, תרכובות וזני חיידקים.

הקרנה במבחנה מבוססת LED להערכת מולקולות הניתנות להפעלה פוטודינמית בהפעלה פוטודינמית של חיידקים

כתב יד זה מציג מכשיר תאורה חדשני וחדשני בהדפסת תלת מימד לחקר טיפול פוטודינמי בתיווך רוז בנגל במבחנה.

פיתוח מכשיר תאורה חדשני מבוסס LED ליישום במבחנה של טיפול פוטודינמי עם רוז בנגל

למדו פרוטוקול טיפול פוטודינמי במבחנה לחקר תאי סרטן העור באמצעות 5-ALA ואור כחול. השיטה מאפשרת ניתוח אפופטוזה בזרימה ציטומטרית ופיתוח פרוטוקולים טיפוליים חדשים.

גישה במבחנה טיפול פוטודינמי

גלה סרטונים נוספים