Bioengineering
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नैनो में Endotoxin का पता लगाने-योगों Limulus Amoebocyte Lysate (लाल) परख का उपयोग
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इंजीनियर मैटीरियल्स में endotoxins का पता लगाने nanomedicine के क्षेत्र में भव्य चुनौतियों में से एक का प्रतिनिधित्व करता है । यहाँ, हम एक मामले का अध्ययन है कि नैनोकणों में संभावित endotoxin संदूषण का अनुमान करने के लिए तीन अलग लाल स्वरूपों से बना ढांचे का वर्णन प्रस्तुत करते हैं ।
Transcript
इस विधि नैनो दवाओं की सुरक्षा के बारे में चिकित्सा क्षेत्र में जवाब देने में मदद कर सकते हैं। इस तकनीक के फायदे यह है कि यह मानक है, और उत्पादों के मूल्यांकन के लिए दुनिया भर में प्रयोग किया जाता है, नैनो दवाओं के लिए । प्रक्रिया का प्रदर्शन, नैनो प्रौद्योगिकी लक्षण वर्णन प्रयोगशाला में बैरी Neun होगा ।
अंशांकन मानक तैयारी के लिए, लिमुलस अमेबोसाइट लाइसेट, या लाल ग्रेड पानी के 900 माइक्रोलीटर का उपयोग करें। और नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन के 100 माइक्रोलीटर, आवश्यकतानुसार कई मध्यवर्ती कमजोर पड़ने तैयार करने के लिए, प्रति मिलीलीटर एक एंडोटॉक्सिन इकाई की एकाग्रता के साथ अंशांकन मानक की तैयारी को सक्षम करने के लिए। फिर लाल ग्रेड पानी के 900 माइक्रोलीटर का उपयोग करना, और मिलीलीटर अंशांकन मानक प्रति एक एंडोटॉक्सिन इकाई के 100 माइक्रोलीटर, प्रति मिलीलीटर 0.1 एंडोटॉक्सिन इकाई की एकाग्रता पर एक दूसरा कैलिब्रेशन मानक तैयार करें।
फिर दो निचले अंशांकन मानकों को तैयार करने के लिए धारावाहिक दस गुना कमजोर पड़ने दोहराएं। कुल चार अंशांकन मानकों को प्राप्त करना, 0001 से लेकर एक एंडोटॉक्सिन इकाई प्रति मिलीलीटर तक। मिलीलीटर गुणवत्ता नियंत्रण प्रति 05 एंडोटॉक्सिन इकाई तैयार करने के लिए, लाल ग्रेड पानी के 950 माइक्रोलीटर के साथ नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन समाधान के मिलीलीटर प्रति एंडोटॉक्सिन इकाई के 50 माइक्रोलीटर को जोड़ती है।
सॉफ्टवेयर में अगला इंस्ट्रूमेंट सेटिंग्स का चयन करें, और टेम्पलेट बनाएं। डेटा एकत्र करने का चयन करें, और सामान्य टैब में परीक्षण आईडी और डेटा समूह दर्ज करें। हार्डवेयर टैब के तहत, इंस्ट्रूमेंट टाइप और लाल विधि का चयन करें, और सत्यापित करें कि एक सीरियल नंबर, सिस्टम आईडी और सीरियल पोर्ट की जानकारी स्क्रीन पर दिखाई देती है।
उपकरण चयन की पुष्टि करने के लिए ठीक दो बार क्लिक करें, और साधन के साथ संचार, और नमूना आईडी उसी क्रम में दर्ज करें कि नमूनों का परीक्षण किया जाएगा। फिर नकारात्मक नियंत्रण मानक वक्र दर्ज करने के लिए डिफ़ॉल्ट बटन का उपयोग करें, और नमूनों का परीक्षण करें। नकारात्मक नियंत्रण अंशांकन मानकों की उचित मात्रा जोड़ें, और डुप्लिकेट पूर्व लेबल ग्लास ट्यूबों में गुणवत्ता नियंत्रण।
और पहले परीक्षण नीच करने के लिए लाल की उचित मात्रा जोड़ें। भंवर नीच संक्षेप में, और साधन हिंडोला में उपयुक्त परीक्षण स्लॉट में शीशी जगह है। नमूनों को लोड करने से पहले, प्रदर्शन के रूप में अधिकतम वैध कमजोर पड़ने के भीतर परीक्षण नैनो सामग्री के कई कमजोर पड़ने प्रदर्शन करते हैं।
अवरोध वृद्धि नियंत्रण के मिलीलीटर प्रति 05 एंडोटॉक्सिन इकाई तैयार करने के लिए, नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन समाधान के मिलीलीटर प्रति एक एंडोटॉक्सिन इकाई के 25 माइक्रोलीटर को मिलाएं, जिसमें परीक्षण नैनो सामग्री के 475 माइक्रोलीटर दिए गए कमजोर पड़ने पर। भंवर के बाद, उपयुक्त नवाचार वृद्धि नियंत्रण लोड करें, और उपकरण में अस्पिक अध्ययन नमूने। फिर पूर्व लेबल ट्यूबों में एक विशिष्ट कमजोर पड़ने पर अस्पिटिक और नुकीला नैनो सामग्री को अलीकोटित करें।
भंवर से पहले, और साधन हिंडोला में लोड हो रहा है। जेल-क्लॉट लाल प्रदर्शन करने के लिए, चार लैम्ब्डा की अंतिम एकाग्रता के लिए नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन तैयार करें, और मानक के 100 माइक्रोलीटर को जोड़ें, 100 माइक्रोलीटर पानी के साथ, या नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन दो लैम्ब्डा की अंतिम एकाग्रता प्राप्त करने के लिए परीक्षण नमूना। प्रत्येक लैम्ब्डा कमजोर पड़ने के लिए Lysine के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें।
भंवर ट्यूबों संक्षेप में, और एक घंटे के लिए एक ३७ डिग्री सेल्सियस पानी स्नान में ट्यूबों के रैक जगह है । इनक्यूबेशन के अंत में, ट्यूबों को चिकनी गति के साथ उलटा करें, और मैन्युअल रूप से एक फर्म के थक्के के लिए प्लस का उपयोग करके परिणामों को रिकॉर्ड करें, और कोई थक्का, या ढीला थक्का के लिए शून्य से। इस प्रतिनिधि विश्लेषण में, पेग्यालेटेड लिपोसोमल डॉक्सोरुबिसिन ने पांच को कमजोर पड़ने पर क्रोमोजेनिक लाल के साथ हस्तक्षेप किया, हालांकि इस हस्तक्षेप को उच्च कमजोर पड़ने पर दूर किया गया था।
स्पाइक रिकवरी 50 से 200% के बीच थी जब टर्बिडिटी और क्रोमोजेनिक लाल में 50 और 500 के साथ-साथ टर्बिडिटी लाल में कमजोर पड़ने के साथ-साथ कमजोर पड़ने पर निर्माण का परीक्षण किया गया था। जब कमजोर पड़ने कारक द्वारा समायोजित, परिणाम दोनों निबंध में भ्रम के बीच संगत थे । इसके अलावा, परिणाम तीन निबंध प्रारूपों के बीच संगत थे ।
याद रखें कि प्रत्येक नमूने में कमजोर करने की अपनी सीमा होती है, प्रत्येक लाल प्रारूप डॉक्सिन और lysate में अपने नियंत्रण मानक का उपयोग करता है, और यह कि ट्यूब कमजोर करने को तैयार करने के लिए उपयोग किए जाते हैं, और प्रत्येक लाल निबंध के लिए अलग-अलग प्रतिक्रिया करते हैं। इस प्रक्रिया के लिए अन्य तरीकों जैसे कि इसके विकास के बाद सामग्री के बारे में अतिरिक्त सवालों के जवाब देने के लिए किया जा सकता है, इस तकनीक ने मनुष्यों में तैयार नैनो प्रौद्योगिकी के चिकित्सा अनुप्रयोगों का पता लगाने के लिए, और नैदानिक मॉडल सहित गैर मानव वानरों, खरगोशों, कुत्तों और चूहों तक सीमित नहीं है। यह न भूलें कि डॉक्सिन के साथ काम करना बेहद खतरनाक हो सकता है और इस प्रक्रिया को निष्पादित करते समय व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण पहनने जैसी सावधानियां हमेशा ली जानी चाहिए।
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इंजीनियरिंग अंक १४३ Endotoxin नैनोकणों लाल परख हस्तक्षेप स्पाइक रिकवरी pyrogenicity संदूषणRelated Videos
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