Behavior
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
En Middle cerebral arterie okklusion teknik til inducerende post-slagtilfælde depression i rotter
Chapters
Summary May 22nd, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Her præsenterer vi en protokol til at fremkalde post-slagtilfælde depression i rotter ved at okkoere den midterste cerebral arterien via den indre carotis arterien. Vi bruger Porsolt tvungen svømme test og saccharosepræference testen for at bekræfte og evaluere inducerede depressive stemninger.
Transcript
Vores protokol foreslår en ny mediale cerebral arterie okklusion teknik hos rotter til at hjælpe med at studere mekanismen for post-slagtilfælde depression udvikling og for at finde en mere effektiv behandling. Den største fordel ved vores teknik er dens evne til at reducere variabiliteten i vægtændringer, hjerneødem og infarkt volumen, og for at minimere procedurerelaterede dødsfald. Efter at have bekræftet en manglende reaktion på hale knivspids i en mandlig 300 til 350-gram Sprague Dawley rotte, placere dyret på en 37 grader Celsius varmeplade og bruge en rektal sonde til overvågning af kernen kropstemperatur.
Påfør salve til dyrets øjne og barber håret fra halsen. Derefter desinficere den eksponerede hud med 70 procent alkohol chlorhexidin, og dække rotten med den sterile kirurgiske drapere, før du udfører okklusion i henhold til standard teknikker. For at opnå den neurologiske sværhedsgrad score, placere en okkluderet rotte på en flad overflade og lad dyret til at bevæge sig frit.
Efter et minut, forsigtigt trække rotten bagud ved halen og grade dyrets gangart svar. For at måle infarkt volumen, scanne de forberedte farvede hjerne skiver på en 1, 600 med 1, 600 prikker per tomme opløsning og beskære og standardisere skalaen for alle billederne. Indlæs derefter de standardiserede billeder i et passende billedanalysesoftwareprogram, og brug et sporingsværktøj til at måle området markeret bleghed i seks på hinanden følgende to millimeter skiver for at bestemme den infarkte størrelse som en procentdel af hele hjernesnittet.
30 til 33 dage efter operationen overføres dyrene til et lukket, roligt og lyskontrolleret rum i de enkelte bure, og en flaske med 100 milliliter 1 % saccharoseopløsning ind i hvert bur i 24 timer. Den næste dag, fjerne flaskerne samt mad og drikkevand i 12 timer. Ved afsavnsperiodens afslutning skal der i fire timer ind på en flaske med 100 milliliter 1 % saccharoseopløsning og en flaske, der indeholder 100 milliliter postevand, indgå i hvert bur.
Derefter registreres mængden af saccharoseopløsningen og det vand, der forbruges, for at gøre det muligt at beregne affiniteten for at saccharosepræference for hvert dyr. For Porsolt's tvunget-svømme test, 30 til 33 dage efter operationen, første sted hver rotte i en lodret plexiglas cylinder, der indeholder 80 centimeter af 25 grader Celsius vand i 15 minutter. Ved slutningen af tilvænningsperioden, lad rotten tørre i 15 minutter i det opvarmede kabinet ved 32 grader Celsius, før han returnerer dyret til sit hjem bur.
Den næste dag, returnere rotten til cylinderen i en sidste fem minutter, registrering af fem minutters test for at tillade beregning af den samlede varighed af immobilitet i denne periode. Histologisk analyse afslører en statistisk signifikant infarkt volumen som en procentdel af den samlede hjerne volumen post-MCAO sammenlignet med dyr i fingeret kontrolgruppe. Et statistisk signifikant hjerneødem observeres også hos forsøgsdyrene sammenlignet med den fingerede kontrolgruppe.
MCAO dyr demonstrere lavere neurologiske præstationer i forhold til sham-opererede dyr på 50 minutter, 24 timer, og syv dage efter operationen. MCAO rotter også forbruge en betydeligt lavere mængde saccharose og udviser en længere immobilitet under Porsalt's tvunget-svømme test i forhold til de sham-opererede dyr. Dette er en vigtig model for adfærdsmæssige slagtilfælde undersøgelser og kunne tjene som et redskab til at vurdere fremtidige behandlinger eller give kritiske prækliniske data om effekten af terapeutiske stoffer.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
