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Visualization of Endogenous Mitophagy Complexes In Situ in Human Pancreatic Beta Cells Utilizing Proximity Ligation Assay
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Visualisierung von endogenen Mitophagie-Komplexen in Situ in menschlichen Pankreas-Betazellen unter Verwendung von Proximity Ligation Assay

DOI:
10.3791/59398-v

•

08:40 min

•

May 02, 2019

•

,
1Department of Internal Medicine, Division of Metabolism, Endocrinology and Diabetes,University of Michigan, Ann Arbor, 2VA Ann Arbor Healthcare System

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:32Human Islet Sample Single Cell Dissociation
  • 02:14Single Cell Adherence and Fixation and Immunohistochemistry
  • 03:24Proximity Ligation Assay (PLA)
  • 04:38Imaging
  • 06:00PLA Interaction Quantification
  • 07:18Results: Representative Beta Cell Mitophagy Analysis
  • 08:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Dieses Protokoll skizziert eine Methode zur quantitativen Analyse der Mitophagie-Protein-Komplexbildung speziell in Beta-Zellen aus primären menschlichen Ischenproben. Diese Technik ermöglicht somit die Analyse der Mitophagie aus begrenztem biologischem Material, die in wertvollen menschlichen Betazellproben der Bauchspeicheldrüse entscheidend sind.

Tags

MitophagyProximity Ligation AssayHuman Pancreatic Beta CellsEndogenous Mitophagy ComplexesImmunohistochemistryUbiquitin-specific Peptidase 8Neuregulin Receptor Degradation Protein-1Beta Cell Marker

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