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Ein FACS-basiertes Protokoll zur Isolierung von RNA aus den Sekundärzellen der Drosophila Male Accessory Dlands
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Glands
DOI:

06:54 min

September 05, 2019

, ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:03Accessory Gland Dissection
  • 02:50Tissue Digestion and Mechanical Cell Dissociation
  • 04:08Results: Representative Secondary Cell (SC) RNA Isolation and Analysis
  • 05:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Hier stellen wir ein Protokoll zur Trennung und Sortierung einer bestimmten Zellpopulation von den Drosophila männlichen Zubehördrüsen (Sekundärzellen) für RNA-Sequenzierung und RT-qPCR vor. Die Zellisolation erfolgt durch FACS-Reinigung von GFP-exezierenden Sekundärzellen nach einem mehrstufigen Dissoziationsprozess, der Dissektion, Proteasenverdauung und mechanische Dispersion erfordert.

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