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क्वांटिफिकेशन और साइट स्थानीयकरण के लिए दो पोस्ट-ट्रांसलेशनल संशोधनों का एक साथ आत्मीय समृद्धि संवर्धन
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization
DOI:

12:11 min

February 27, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
  • 02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
  • 04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
  • 07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
  • 10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
  • 11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

यह कार्यप्रवाह मात्रात्मक वैश्विक प्रोटेओमिक विश्लेषण के लिए एक साथ कई प्रोटीन पोस्ट-ट्रांसलेशनल संशोधनों (पीटीएमएस) के समय और लागत कुशल संवर्धन के प्रदर्शन का वर्णन करता है। प्रोटोकॉल कई संयुग्मित एंटीबॉडी के साथ पेप्टाइड-स्तरीय पीटीएम संवर्धन का उपयोग करता है, जिसके बाद पीटीएम क्रॉसटॉक में जैविक अंतर्दृष्टि प्राप्त करने के लिए डेटा-स्वतंत्र अधिग्रहण द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण किया जाता है।

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