Journal
/
Genetics
/
Stabil nedsättning av gener kodning extracellulära Matrix Proteiner i C2C12 Myoblast Cell Line med små hårnål (sh)RNA
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Stabil nedsättning av gener kodning extracellulära Matrix Proteiner i C2C12 Myoblast Cell Line med små hårnål (sh)RNA

DOI:
10.3791/60824-v

•

12:19 min

•

February 12, 2020

•

, ,
1Orthopaedic Research Laboratories, Leni & Peter W. May Department of Orthopaedics,Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:55C2C12 Transfection
  • 02:35Transfected C2C12 Selection
  • 03:15C2C12 Differentiation
  • 03:59Phenotypic Analysis
  • 06:10Western Blot Analysis Sample Preparation
  • 09:37Results: Representative C2C12 Selection, Differentiation, and Knockdown Validation
  • 11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Vi tillhandahåller ett protokoll för att stabilt slå ner gener som kodar extracellulära matrisproteiner (ECM) i C2C12-myoblaster med små hårnål (sh) RNA. Med inriktning på ADAMTSL2 som exempel beskriver vi metoderna för validering av knockdown-effektiviteten på mRNA-, protein- och cellnivå under C2C12-myoblast till myotubedifferentiering.

Tags

C2C12 MyoblastShRNAGene KnockdownExtracellular Matrix ProteinsStable Cell LineTransfectionPuromycin SelectionCell CultureMyotube Formation

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Framställning av rAAV9 att överuttrycker eller Knockdown gener i Mus Hearts

Konjugativ Parning Analyser för sekvensspecifik analys av Transfer proteiner involverade i konjugation

Peptid-härledda metod för att transportgener och proteiner över Cellular och organeller hinder i växter

Uppfödning och dubbelsträngade RNA-medierad Gene Knockdown i Hide Beetle,<em> Rävänger</em

Detektion av Copy Number Ändringar Använda Single Cell Sequencing

Målinriktad<em> In situ</em> mutagenes av Histon Gener i knoppande jäst

qKAT: kvantitativa Semi-automated typning av Killer-cell immunglobulin-like Receptor gener

Använda i Vitro och i cell form att undersöka småmolekylära inducerad Pre-mRNA strukturella förändringar

Att fastställa ägg befruktning Bemisia tabaci med en Cytogenetisk teknik

Designa automatiserade, hög genom strömning, kontinuerlig cell tillväxt experiment med eVOLVER

Read Article