Journal
/
Genetics
/
Tillämpning av CRISPR-interferens (CRISPRi) för gensilencing hos patogena arter av Leptospira
JoVE Journal
Genetics
Author Produced
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
Application of CRISPR Interference (CRISPRi) for Gene Silencing in Pathogenic Species of Leptospira
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Tillämpning av CRISPR-interferens (CRISPRi) för gensilencing hos patogena arter av Leptospira

DOI:
10.3791/62631-v

•

14:49 min

•

August 14, 2021

•

, , ,
1Infectious Bacterial Diseases Research Unit, National Animal Disease Center, Agricultural Research Service,United States Department of Agriculture, 2Laboratório de Desenvolvimento de Vacinas,Instituto Butantan

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 02:56Protospacer Definition and Plasmid Construction
  • 04:24Leptospira Transformation by Conjugation
  • 09:35Colony Selection and Transconjugant Growth and Validation
  • 13:01Representative Results
  • 13:51Conclusions

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Här beskrivs tillämpningen av CRISPR-interferens (CRISPRi) för specifik gensilencing i Leptospira arter. Leptospiraceller omvandlas genom konjugation med plasmider som uttrycker dCas9 (katalytiskt "döda" Cas9) och en enguide RNA (sgRNA), ansvarig för basparning till önskat genomiskt mål. Metoder för att validera gensilencing presenteras.

Tags

CRISPR InterferenceCRISPRiGene SilencingLeptospiraPathogenic SpeciesHornsby-Alt-Nally MediaLeptospirosisGenetic ToolsDCas9Single-guide RNAIn Vitro ResearchVaccine Development

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Urval-beroende och oberoende generering av CRISPR / Cas9-medierade genknockouts i däggdjursceller

En standardmetod att undersöka Hotellets mutagenicitet som en funktion av punktmutation reparation katalyseras av CRISPR/Cas9 och SsODN i mänskliga celler

Mikroskop av CRISPR/Cas9 Protein till kanal havskatt, Ictalurus punctatus, embryon för Gene Editing

Ett protokoll för produktionen av integras-brist Lentiviral vektorer för CRISPR/Cas9-medierad gen Knockout i delande celler

Produktion och rening av baculoviridae för genterapi ansökan

Högeffektiva gen störningar av murina och mänskliga hematopoetiska stamceller av CRISPR/Cas9

CRISPR-medierad omorganiseringen av kromatin Loop struktur

CRISPR/Cas9 gen redigering till göra villkorlig mutanter av humana malariaparasiten P. falciparum

Dissektion av Enhancer-funktion som använder Multiplex CRISPR-baserade Enhancer störningar i cellinjer

Överuttryck av långa icke-kodande RNAs med gen-aktiverande CRISPR

Read Article