Journal
/
Biology
/
Prøveforberedelse ved 3D-korrelativfokuseret ionstrålefræsning til kryo-elektrontomografi med høj opløsning
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Sample Preparation by 3D-Correlative Focused Ion Beam Milling for High-Resolution Cryo-Electron Tomography

Prøveforberedelse ved 3D-korrelativfokuseret ionstrålefræsning til kryo-elektrontomografi med høj opløsning

DOI:
10.3791/62886-v

•

08:20 min

•

October 25, 2021

•

, , , ,
1Max Planck Institute of Biochemistry, 2Max Planck Institute for Biophysics, 3Fondazione Human Technopole

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:36Cryo-Fluorescence Light Microscopy (Cryo-FLM) of Plunge‐Frozen Grids with Cells
  • 01:51Focused Ion Beam (FIB) Milling
  • 05:47Correlative Transmission Electron Microscopy (TEM)
  • 07:02Results: Visualizing the Endocytic Protein Deposit in the Cell with Cryo‐ET
  • 07:38Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Her præsenterer vi en pipeline til 3D-korrelativfokuseret ionstrålefræsning til styring af forberedelsen af cellulære prøver til kryo-elektrontomografi. 3D-positionen af fluorescerende mærkede proteiner af interesse bestemmes først ved kryofluorescensmikroskopi og målrettes derefter til fræsning. Protokollen er velegnet til pattedyr, gær og bakterieceller.

Tags

3D-correlative FIB MillingCryo-electron TomographyCryo-fluorescence MicroscopyCryo-FIB-SEMSEM Grid OverviewFLM-SEM CorrelationIon Beam ImagingCellular Ultrastructure

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

MALDI Sample Preparation: the Ultra Thin Layer Method

Brug High Resolution Computed Tomography at visualisere de tredimensionelle struktur og funktion af dyrs vaskulatur

Cryo-Electron Microscopy Prøvepræparation ved hjælp af en målrettet Ion Beam

SKAL og MÅ af Cryo-elektronmikroskopi: En primer på Prøveforberedelse og data af høj kvalitet Indsamling til Macromolecular 3D Genopbygning

Prøvefremstilling til Mass cytometrianalyse

Forberedelse og Observation af Thick Biologiske prøver ved scanning Transmission Electron Tomography

Forberedelse af prøver og billeddannelse af Exosomes af transmissions Elektron Mikroskopi

Visualisering af DNA jordpakning i cyanobakterier af høj spænding Cryo-elektron tomografi

Miniaturiserede prøveforberedelse til transmissions Elektron Mikroskopi

Målrettede undersøgelser ved hjælp af seriel blok ansigt og fokuseret ion Beam Scan elektronmikroskopi

Read Article