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Détection de l’accumulation et de la réparation des lacunes post-réplicatives dans les cellules humaines à l’aide du test de fibre d’ADN
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Detection of Post-Replicative Gaps Accumulation and Repair in Human Cells Using the DNA Fiber Assay
DOI:

10:32 min

February 03, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:27S1 Fiber Experimental Setup
  • 03:51DNA Fiber Preparation by Spreading
  • 04:58Immunostaining of DNA Fibers
  • 06:45Image Acquisition and Analysis
  • 08:39Results: Post-Replicative ssDNA Gaps on Ongoing Forks by S1 Fiber Assay and Post-Replicative Repair by Gap Filling
  • 09:42Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nous décrivons ici deux modifications du test de la fibre d’ADN pour étudier les lacunes de l’ADN monocaténaire dans la réplication de l’ADN après l’induction de la lésion. Le test de fibre S1 permet la détection des lacunes post-réplicatives à l’aide de l’endonucléase S1 spécifique à l’ADNSS, tandis que le test de remplissage des lacunes permet la visualisation et la quantification de la réparation des lacunes.

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