लाइट ठीक चिकित्सकीय चिपकने वाला राल के बढ़ते जीर्ण प्रयोगों में इलेक्ट्रोड या microdialysis जांच के लिए आवेदन

Biology

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Summary

इस रिपोर्ट में, हम इलेक्ट्रोड या पुराने प्रयोगों में microdialysis जांच के बढ़ते आधार के लिए प्रकाश इलाज दंत रेजिन के एक नए आवेदन का प्रस्ताव. इस सामग्री cranium करने के लिए सीधे संबंध की अनुमति देता है.

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Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments. J. Vis. Exp. (6), e249, doi:10.3791/249 (2007).

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Abstract

पुरानी रिकॉर्डिंग प्रयोगों में, आत्म - इलाज दंत ऐक्रेलिक रेजिन इलेक्ट्रोड या microdialysis - जांच के बढ़ते आधार के रूप में में इस्तेमाल किया गया है. चूंकि इन acrylics हड्डी को बंधन नहीं है, शिकंजा एंकर के रूप में इस्तेमाल किया गया है. हालांकि, फिन्चेस या माउस की तरह छोटे प्रयोगात्मक पशुओं में, उनके craniums बहुत नाजुक हैं और एंकर को नहीं पकड़ कर सकते हैं सफलतापूर्वक. इस रिपोर्ट में, हम इलेक्ट्रोड या पुराने प्रयोगों में microdialysis जांच के बढ़ते आधार के लिए प्रकाश इलाज दंत रेजिन के एक नए आवेदन का प्रस्ताव. इस सामग्री cranium करने के लिए सीधे संबंध की अनुमति देता है. इसलिए, लंगर शिकंजा की आवश्यकता नहीं है और शल्य चिकित्सा के क्षेत्र में काफी कम किया जा सकता है. अतीत के अनुभवों से पता चलता है कि संबंध प्रभाव अधिक से अधिक 2 महीने रखता. समय जब सामग्री लचीला और व्यावहारिक हैं की परम्परागत राल खिड़की एक कुछ मिनट है. हालांकि, इन दंत चिपकने के लिए काम कर समय की खिड़की काफी व्यापक और समायोज्य है.

Protocol

चरण 1. जांच आरोपण की तैयारी

  1. संज्ञाहरण (वीडियो में दिखाया गया)

    Ketamine के एक interperitoneal इंजेक्शन (12.5 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन) और xylazine (25 मिग्रा / किग्रा) के लिए शल्य चिकित्सा संज्ञाहरण के एक स्थिर स्तर का उत्पादन मिश्रण के साथ प्रत्येक पक्षी anesthetize.

  2. एक stereotaxic फ्रेम करने के लिए एक सिर फिक्स

    Xylocaine जेली (टीएम) का प्रयोग कान 'सलाखों के दबाव के स्थानीय दर्द को कम. पक्षी के सिर एक stereotaxic कान सलाखों और चोंच धारक है कि एक 45 ° कोण पर सिर रखती से मिलकर तंत्र में तय हो गई है . आरोपण के लिए stereotaxic सर्जरी के दौरान, थर्मल नियंत्रण के साथ सर्जिकल पैड से पक्षी के शरीर को गर्म (तापमान 34 = ~ 36 डिग्री सेल्सियस) .

  3. शल्य चिकित्सा क्षेत्र कीटाणुरहित

    Isodine (टीएम) सर्जरी से पहले के साथ शल्य चिकित्सा क्षेत्र कीटाणुरहित .

चरण 2. Stereotaxic स्थिति

  1. संदर्भ बिंदु संरेखण

    Lambda (Y बिंदु) और डाई से भरे विंदुक के साथ वाई बिंदु चिह्नित करने के लिए डमी जांच (कांच micropipette) संरेखित करें. शेष पिछले ट्रेसर अध्ययन के Dextran TMR वीडियो में इस्तेमाल किया गया था.

  2. त्वचा की चीरा

    त्वचा निकालें और cranium की सतह बेनकाब. फिर, कपास swabs के साथ cranium की सतह को साफ करें.

  3. डमी प्रवेशनी के पोजिशनिंग (क्षैतिज दिशा में)

    लक्ष्य साइट (एपी अक्ष और पार्श्व समन्वय) डमी प्रवेशनी ले जाएँ

  4. लघु craniotomy और dura मेटर का चीरा.

    Craniotomy के लिए एक ठीक संदंश और dura मेटर के चीरों के लिए एक ठीक इंजेक्शन सुई (30 जी) का उपयोग करें. फिर, cranium की सतह को साफ करें .

  5. डमी प्रवेशनी का अंतिम पोजीशनिंग (आरोपण)

    Microdialysis जांच इरादा लक्ष्य क्षेत्र से ऊपर 0.30 मिमी गाइड प्रवेशनी के टिप का पता लगाएँ. अंत में, cranium की सतह फिर से साफ है, क्योंकि एक साफ और सूखी सतह मुश्किल संबंधों के लिए आवश्यक है.

चरण 3. कपाल सतह के Pretreatment

(दंत उत्पाद के प्रत्यक्ष भरने बहाली "के लिए इसी तरह की प्रक्रिया नियोजित करेगा. )

  1. प्राइमर उपचार
    1. मिक्स एक डिश पर primar बी के साथ एक तरल.
    2. एक छोटा सा ब्रश के साथ cranium की सतह पर मिश्रण को लागू करें.
    3. 30 सेकंड के लिए छोड़ दें .
    4. हल्के हवा धारा के साथ सूखी. (धो मत करो.)

  2. संबंध एजेंट के आवेदन
    1. सतह पर एक छोटा सा ब्रश के साथ cranium के संबंध एजेंट लागू करें .
    2. एक सज्जन हवा धारा लागू है . (धो मत करो.)
    3. 20 सेकंड के लिए लाइट इलाज.

चरण 4. समग्र राल बढ़ते

  1. सादे plugger के साथ माउंट राल

    यदि एक सादा plugger उपलब्ध नहीं है, एक सूक्ष्म रंग के बजाय प्रयोग किया जा सकता है.

  2. हल्की इलाज
  3. इंक्रीमेंटल बढ़ते

    इंक्रीमेंटल बढ़ते राल की पूरी प्रतिक्रिया सुनिश्चित करने के लिए सिफारिश की है.

    वृद्धिशील बढ़ते के लिए, हर बढ़ते संबंध एजेंट से पहले लागू होते हैं
    .

  4. समग्र अंतिम सख्त के लिए और प्रकाश इलाज राल मोल्ड.
  5. सर्जरी की समाप्ति

साफ शल्य चिकित्सा क्षेत्र, एंटीबायोटिक लागू (Gentamicin मरहम), और stereotaxic लौ से पशु हटायें. फिर, एक थर्मामीटरों नियंत्रित चैम्बर (= तापमान 33-35 डिग्री सेल्सियस) के बाद संवेदनाहारी वसूली के लिए में पशु रहते हैं.

वीडियो में दिखाया गया है, कोई असामान्य व्यवहार जानवरों की किसी में सर्जरी के बाद अगले दिन पर मनाया गया.

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Discussion

पारंपरिक स्वयं इलाज ऐक्रेलिक रेजिन के आवेदन की तुलना में, शुरू की तकनीक कई महत्वपूर्ण लाभ है:

1. प्रत्यक्ष संबंध:
स्व इलाज एक्रिलिक हड्डी को थोड़ी देर के लिए संलग्न किया जा सकता है लेकिन यह हड्डी का पालन नहीं करता है. इसलिए, लंगर शिकंजा के लिए एक बढ़ते आधार तय (चित्रा 2A देखें) करने के लिए आवश्यक हैं. इसके विपरीत, प्रकाश इलाज हड्डी सीधे इतना शिकंजा आवश्यक नहीं कर रहे हैं (चित्रा 2B) के लिए राल बांड कर सकते हैं. इसलिए, बढ़ते आधार के आकार में काफी कम किया जा सकता है. इसके अलावा, प्रकाश इलाज रेजिन भी कुछ धातुओं पालन करता है, अगर आप इसके साथ "धातु प्राइमर" का इस्तेमाल किया. चर सामग्री के लिए संबंधों की यह सुविधा हमें की अनुमति देता है आवेदन की एक विस्तृत श्रृंखला है.

चित्रा 2 से पता चलता है एक पारंपरिक स्वयं इलाज acrylics (2A) और एक प्रकाश इलाज चिपकने वाला रेजिन (2B में) का उपयोग कर आरोपण का उपयोग आरोपण. 2A, लंगर पेंच बढ़ते आधार को ठीक करने के लिए प्रयोग किया जाता है. 2B में बढ़ते आधार के आकार तथ्य यह है कि प्रकाश इलाज राल cranium और ऐसे शिकंजा पालन के कारण काफी कम कर सकते हैं की आवश्यकता नहीं कर रहे हैं.
चित्रा 2

2. संभाल करने के लिए आसान:
परम्परागत राल प्रसंस्करण समय खिड़की अपेक्षाकृत कम है, कुछ ही मिनटों के भीतर है. यह एक उच्च तरलता है और यह पहली बार में संभाल करने के लिए आसान नहीं है. हालांकि, एक बार रासायनिक प्रतिक्रिया शुरू कर दिया, प्रतिक्रिया एक्ज़ोथिर्मिक गर्मी से त्वरित रेजिन और कम समय में कठिन हो जाते हैं. प्रकाश इलाज राल के लिए प्रसंस्करण समय खिड़कियों काफी व्यापक और समायोज्य रहे हैं. असल में, रेजिन शुरुआत से पल के लिए लगातार लोच रखना जब यह ठीक हो जाता है प्रकाश.

3. रिएक्शन गर्मी नहीं उत्पन्न करता है:
आत्म - इलाज राल की प्रतिक्रिया इलाज एक्ज़ोथिर्मिक है. जब बढ़ते आधार मोटी है, इस गर्मी जम जाता है और ऊतकों को नुकसान हो सकता है. प्रकाश इलाज राल का रिएक्शन गर्मी उत्पन्न नहीं करता है और सामग्री biocompatible है.

4. हाथ बनाया एलईडी प्रकाश:
और प्रकाश इकाई की तरह सामग्री और विशेष उपकरणों की लागत एक समस्या हो सकती है. चित्रा 3 में, हम एक हाथ में एलईडी प्रकाश इकाई जो ज्यादा लागत नहीं परिचय. यह हाथ से बना प्रकाश इलाज यूनिट महंगी वाणिज्यिक इकाई के लिए विकल्प के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है.

चित्रा 3A प्रकाश इकाई के एक सर्किट आरेख दिखाता है. चित्रा 3B एक दूसरे के समानांतर सरेस से जोड़ा हुआ है, और एक सफेद बोर्ड मार्कर के धारक में सम्मिलित तीन एल ई डी से पता चलता है.


चित्रा 3 - सर्किट आरेख और एक हाथ से बनाया प्रकाश इकाई की तस्वीर (बी में) (में)

इस तकनीक इलेक्ट्रोड या मछली, माउस, खरगोश, बिल्ली और बंदर जैसे अन्य प्रायोगिक पशुओं में microdialysis जांच की पुरानी implantations के लिए लागू होता है.

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Disclosures

प्रयोगों मस्तिष्क के पशु विज्ञान संस्थान, आरआईकेईएन (आरआईकेईएन बीएसआई) और प्रयोग संस्थान के पशु नैतिकता समिति उन्हें अनुमोदित के लिए दिशा निर्देशों के साथ अनुसार में किए गए थे.

Acknowledgements

हम आरआईकेईएन - बीएसआई में उनके कृपया इस काम के दौरान समर्थन करता है और उपयोगी सलाह के लिए हमारे सहयोगियों को धन्यवाद. मुझे मेरे प्रोफेसर Shigemi मोरी, प्रोफेसर जी सीमा Juh SZ, डीआरएस के लिए ईमानदारी से प्रशंसा व्यक्त करना चाहूंगा. Kiyoji मात्सूयामा, Katalin एके kesi और आर.पी. घ Dobolyi जो मुझे एडवांस्ड स्टडीज के लिए स्नातक विश्वविद्यालय, जापान में स्नातक पाठ्यक्रम के दौरान microdialysis विधि का अध्ययन करने की सलाह दी. अंत में, हम श्री क्रिस Sarnecky और डॉ. Akitsugu Takasu वीडियो रिकॉर्डिंग में उनके समर्थन के लिए धन्यवाद.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
Bengalese finches Animal Two adult male , Body weight: 14.2 g and 14.8 g
Microdialysis probe Tool EICOM total weight of probe, guide cannula, cap nut and dental adhesive resin: 0.65 to 0.78 g.
Light-cured dental adhesive resin system Kuraray Medical Inc +Light cured composite resin (CLEARFIL AP-X). +Dual-cure dental adhesive system with the self-etching primer and bonding agent (CLEARFIL Liner Bond IIΣ).
Surgical instruments Stereotaxic frame, surgical microscope, thermal controlled surgical pad and thermal controlled recovery chamber. Plain plugger for handling composite resin. Microspatula or sharp curette to ablate periosteum and muscles.Injection syringe and needle (30G) for inducing anesthesia.Small scissors. Fine forceps for making small craniotomy.
Light-unit Rolence Enterprise Inc Ultra-Lite 500E
Microscope Konan Medical KOM300 with C-mount adaptor
3- CCD camera Tool Hitachi HV-D30

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References

  1. Adell, A., Artigas, F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  2. Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).
  3. Oakley, B., Schafer, R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).
  4. Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
  5. Boulton, A., Baker, G. The relation of brain electrical activity to behavior. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Robinson, T., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  6. Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, 101-104 (2007).

Comments

1 Comment

  1. Very useful and detailed!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 13, 2009 - 3:13 PM

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