स्पर्श परपीड़ा बैक्टीरियल Prostatitis की एक murine मॉडल में मापन

Published 1/16/2013
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Immunology and Infection

Your institution must subscribe to JoVE's Immunology and Infection section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

प्रोस्टेट के संक्रमण जीर्ण prostatitis में श्रोणि दर्द mediating में एक योगदान कारक हो सकता है. हम मानकीकृत बैक्टीरियल inoculum, चूहों में समय पर स्पर्श परपीड़ा को मापने के लिए पुरुष और चूहों पद्धति के मूत्रमार्ग में बैक्टीरिया की टपकाना की तैयारी के लिए प्रक्रिया का वर्णन करता है.

Cite this Article

Copy Citation

Quick, M. L., Done, J. D., Thumbikat, P. Measurement of Tactile Allodynia in a Murine Model of Bacterial Prostatitis. J. Vis. Exp. (71), e50158, doi:10.3791/50158 (2013).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Uropathogenic Escherichia कोलाई (UPEC) रोगज़नक़ों कि मूत्र पथ के संक्रमण और बैक्टीरियल prostatitis 1 में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं. हमने हाल ही में पता चला है कि UPEC जीर्ण पैल्विक 2 दर्द, जीर्ण prostatitis / जीर्ण पैल्विक दर्द सिंड्रोम (सी.पी. / सीपीपी) 3,4 की एक विशेषता की दीक्षा में एक महत्वपूर्ण भूमिका है. नैदानिक ​​प्रासंगिक UPEC द्वारा प्रोस्टेट के संक्रमण आरंभ और तंत्र है कि ऊतकों को नुकसान और 5 autoimmunity के तंत्र की दीक्षा शामिल हो सकता है के माध्यम से कर सकते हैं स्थापित पुराने दर्द के.

प्रोस्टेट में UPEC के रोगजनन को समझने के लिए एक चुनौती है प्रोस्टेट ग्रंथि के रिश्तेदार अप्राप्यता हेरफेर करने के लिए है. हम एक पहले से वर्णित intraurethral संक्रमण 6 विधि पुरुष जिससे प्रोस्टेट के एक आरोही संक्रमण की स्थापना चूहों में UPEC के एक नैदानिक ​​तनाव देने का उपयोग किया. यहाँ, हम बा मानकीकरण के लिए हमारे प्रोटोकॉल का वर्णन7 cterial रूप inoculum बैक्टीरिया की टपकाना के लिए anesthetized नर चूहों catheterizing के लिए प्रक्रिया के रूप में अच्छी तरह से.

/ सी.पी. सीपीपी मुख्य रूप से स्पर्श परपीड़ा 4 की उपस्थिति द्वारा विशेषता है. व्यवहार परीक्षण त्वचीय संदर्भित किया जाता आंत का दर्द 8-10 से उत्पन्न hyperalgesia की अवधारणा पर आधारित था. आंत ऊतकों में एक चिड़चिड़ा ध्यान cutaneous दर्द आम तौर पर गैर दर्दनाक उत्तेजनाओं (allodynia) के लिए एक अतिरंजित प्रतिक्रिया के लिए अनुमति थ्रेसहोल्ड कम कर देता है. सामान्य बल में त्वचा के परिणाम के लिए आवेदन असामान्य प्रतिक्रियाओं कि अंतर्निहित आंत का दर्द की तीव्रता के साथ वृद्धि करते हैं. हम इशारा / ShiLtJ चूहों है कि वॉन Frey फाइबर का उपयोग करने के लिए प्रतिक्रिया में UPEC बैक्टीरिया के साथ एक एकल संक्रमण के लिए समय के साथ स्पर्श परपीड़ा यों में पद्धति का वर्णन.

Protocol

1. माउस टीका के लिए जीवाणु तैयारी

निम्नलिखित सड़न रोकनेवाला शर्तों के तहत किया जाना चाहिए.

  1. टोपी के साथ एक 17 x 100 मिमी polypropylene ट्यूब ले लो और ताजा Luria शोरबा मीडिया (पौंड) के 3 मिलीलीटर जोड़ें. Autoclaved सुझावों का प्रयोग, CP1 2 तनाव के कुछ जमे हुए बैक्टीरिया ग्लिसरॉल जायजा लेने और लेग मीडिया युक्त ट्यूब में संस्कृति की एक छोटी मात्रा हस्तांतरण. ट्यूब टोपी की जगह अभी भी इतना है कि ऑक्सीजन ट्यूब में प्रवेश करने में सक्षम - संस्कृति एरोबिक शर्तों के तहत विकसित करने की जरूरत है. 37 में जगह ट्यूब ° रातोंरात 220 rpm में एक मिलाते हुए इनक्यूबेटर में सी.
  2. अगले दिन 3 मिलीलीटर लेग मीडिया के साथ एक ताजा ट्यूब रातोंरात संस्कृति के 5 μl और हस्तांतरण 37 डिग्री सेल्सियस पर स्थिर शर्तों के तहत एक मशीन रातोंरात विकसित
  3. दिन में आ 50 मिलीलीटर ट्यूब में 3 हस्तांतरण संस्कृति की 40 μl 40 मिलीलीटर लेग प्रत्येक मीडिया युक्त. एक 37 ° C स्थिर इनक्यूबेटर रातोंरात में रखें.
  4. पर मुड़ें और 4 डिग्री सेल्सियस अपकेंद्रित्र सेटएक बार अपकेंद्रित्र अंतिम तापमान तक पहुँच गया है, एक 40 मिलीलीटर Nalgene अपकेंद्रित्र ट्यूब में प्रत्येक 40 मिलीलीटर संस्कृति हस्तांतरण.
  5. ट्यूबों वजन अपकेंद्रित्र संतुलन - लेग मीडिया के साथ मात्रा समायोजित के रूप में की जरूरत है. 20 मिनट के लिए 6000 rpm पर ट्यूब स्पिन.
  6. ध्यान से सतह पर तैरनेवाला हटाने और धीरे 40 मिलीलीटर बाँझ पीबीएस में बैक्टीरिया गोली को निलंबित.
  7. पीबीएस के साथ 1.5 चरण दोहराएँ.
  8. बंद तैरनेवाला Aspirate और 500 μl बाँझ पीबीएस में बैक्टीरिया को निलंबित. एक 1.5 मिलीलीटर microfuge ट्यूब में समाधान स्थानांतरण. निलंबन के 10 μl लो और ठंडा पीबीएस के 990 μl में जलमिश्रित. आयुध डिपो 420 एनएम पढ़ने टीका के लिए आवश्यक मात्रा का निर्धारण करने के लिए एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग. की उचित मात्रा निर्धारित बर्फ ठंड PBS गोली में निलंबित करने के लिए: आयुध डिपो 420 एनएम संख्या (एमएल) ले लो और बैक्टीरियल गोली [पूर्व की अनुमानित मात्रा घटाना. आयुध डिपो 420 एनएम = 0.545, गोली लगभग 0.075 मिलीग्राम. 0.545-.075 0.470 =].
  9. बैक्टीरियल निलंबन के 10 μl और di निकालें990 μl ठंडा पीबीएस में वीणा. आयुध डिपो 420 एनएम पढ़ें. लक्ष्य 1.000 पतला निलंबन ± .010 के लिए एक आयुध डिपो 420 एनएम मूल्य प्राप्त है. अगर अपने कमजोर पड़ने की संख्या इस लक्ष्य से ऊपर है, निलंबन के लिए अधिक मात्रा जोड़ने और अन्य पढ़ ले. यदि संख्या नीचे है .990 तो नीचे और वांछित पढ़ने प्राप्त करने तक दोहराने आयुध डिपो 420 एनएम पढ़ने निलंबन स्पिन.

2. पशु संक्रमण

(5 से 7 सप्ताह पुरानी है, समूह प्रति दस) चूहे जैक्सन प्रयोगशाला (बार हार्बर, इ) से खरीदे गए थे.

  1. चूहे एक Plexiglas कक्ष में 1-4 isoflurane% की साँस लेना द्वारा anesthetized हैं और लेटा हुआ जब तक निगरानी.
  2. बैक्टीरिया की टपकाना के लिए एक बार में एक माउस कैथीटेराइजेशन द्वारा एक (PE10) polyethylene कैथेटर एक संशोधित 30 एक गिलास हैमिल्टन सिरिंज (1.5-2.0 सेमी की लंबाई) के जी सुई जुड़ी के साथ लिया जाता है. कैथेटर सुई के हब के लिए डाला जाता है. माउस plac हैएड संज्ञाहरण के तहत पृष्ठीय सतह पर एक नाक शंकु का उपयोग कर बनाए रखा.
  3. माउस के लिंग कोमल दबाव और कपास swabs पर चिकनाई के उदार मात्रा से extruded penile मूत्रमार्ग के प्रवेश द्वार के स्नेहन के लिए प्रयोग किया जाता है.
  4. के 10 μl फॉस्फेट-buffered खारा 1 x 10 8 बैक्टीरिया युक्त कैथीटेराइजेशन के बाद anesthetized चूहों के मूत्रमार्ग में शुरू की है.
  5. चूहे एक anesthetized राज्य में Plexiglas कक्ष में 15 मिनट के लिए बनाए रखा जाता है बैक्टीरियल शुरूआत के बाद बैक्टीरिया लगाव को अनुमति देने के लिए और तत्काल पेशाब को रोकने के.
  6. चूहे वापस अपने पिंजरों में रखा जाता है और अगले 24 घंटे के लिए निगरानी की.

3. व्यवहार परीक्षण

चूहे से पहले संक्रमण (आधारभूत) और 3 दिन, 7, 14, 21 और संक्रमण के बाद 28 पर परीक्षण किया गया. Hyperalgesia संदर्भित किया जाता है और स्पर्श परपीड़ा वॉन Frey 11,12 पेट और तल r लागू filaments का उपयोग कर परीक्षण किया गया थाहिंद पंजा 13 की egion. परीक्षण एक निश्चित समय के दिन में perfomed किया गया था, मानक पद्धति और सभी जानवरों की एक experimenter परीक्षण कार्यरत थे. समूहों की अंधी परीक्षण के लिए पशु मॉडल में व्यवहार आधारित दर्द परीक्षण की सीमाओं का मुकाबला करने के लिए उपयोग किया गया था. 0.04 के बलों, 0.16, 0.4, 1.0 और 4.0 g (Stoelting, यूएसए) के साथ पांच व्यक्ति वॉन Frey filaments पेट और वापसी प्रतिक्रियाओं की आवृत्ति को लागू किया गया गणना की गई.

  1. एक acclimatization की 30 मिनट की अवधि के बाद, चूहों व्यक्ति Plexiglas (6 x 10 x12 सेमी) स्टेनलेस स्टील के तार ग्रिड मंजिल के साथ घर में बने कक्षों में रखा जाता है.
  2. Hyperalgesia संदर्भित किया जाता है और स्पर्श परपीड़ा पाँच वॉन Frey filaments का उपयोग कर परीक्षण किया गया. प्रत्येक रेशा 1-2 सेकंड के लिए कुल 10 बार के लिए एक अंतर - प्रोत्साहन 5 सेकंड के अंतराल के साथ लागू किया गया था, और बाल बल के आरोही क्रम में परीक्षण किया गया.
  3. प्रत्येक रेशा प्रोस्टेट के सामान्य आसपास के क्षेत्र में कम पेट क्षेत्र के लिए लागू किया जाता है औरदेखभाल करने के लिए इस क्षेत्र के भीतर विभिन्न क्षेत्रों को प्रोत्साहित करने के लिए desensitization से बचने के लिए या प्रभाव "हवा" करने के लिए लिया गया था. फिलामेंट्स stimulations के बीच कम से कम 5 सेकंड के अंतराल के साथ 10 बार के एक कुल के लिए 1-2 सेकंड के लिए बल के बढते क्रम में लागू किया गया.
  4. व्यवहार के तीन प्रकार रेशा उत्तेजना के लिए एक सकारात्मक प्रतिक्रिया पर विचार कर रहे हैं: 1) पेट की तेज त्याग, 2) तत्काल चाट या रेशा उत्तेजना के क्षेत्र के scratching, कूद) 3.
  5. प्रतिक्रिया आवृत्ति सकारात्मक प्रतिक्रिया का प्रतिशत (10 से बाहर, जैसे 10 = 50% की 5 प्रतिक्रियाओं) के रूप में गणना की गई और डेटा प्रतिक्रिया आवृत्ति का मतलब प्रतिशत ± एसई के रूप में सूचित किया गया था
  6. 25 से अधिक सकारात्मक कुल आधारभूत प्रतिक्रियाओं के साथ पशु अध्ययन से बाहर रखा जाता है.
  7. स्पर्श परपीड़ा हिंद की 0.04 बलों, 0.16, 0.4, 1.0 और 4.0 जी के साथ वॉन Frey filaments का उपयोग पंजा के तल का क्षेत्र पर परीक्षण किया गया था. मंझला 50% वापसी (5) सीमा ऊपर नीचे का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया थाविधि जहां परीक्षण 0.04 छ रेशा के साथ शुरू किया गया था हिंद पंजा के तल का सतह लंबरूप लागू जब तक रेशा थोड़े मुड़े. फिलामेंट्स जब तक एक सकारात्मक प्रतिक्रिया मनाया गया आरोही क्रम में परीक्षण किया गया. फिलामेंट के लिए एक सकारात्मक प्रतिक्रिया के पंजा या परीक्षण पंजा के चाट के या तो एक तेज वापसी के रूप में परिभाषित किया गया था. जब एक सकारात्मक प्रतिक्रिया दर्ज की गई थी अगले कमजोर रेशा लागू किया गया था और अगर एक नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ मनाया गया, तो अगले मजबूत रेशा लागू किया गया था.
  8. प्रयोगों और कार्यप्रणाली वर्णित की समीक्षा की गई है और नॉर्थवेस्टर्न विश्वविद्यालय जानवरों की देखभाल द्वारा मंजूरी दे दी और समिति का उपयोग करें.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

हम जीवाणु संक्रमण पर पुराने दर्द की उपस्थिति के लिए इशारा / ShiLtj और C57BL/6J नर चूहों की जांच की. नर चूहों (5 से 7 सप्ताह पुराने) या मूत्रमार्ग (1 चित्रा) में खारा बैक्टीरिया के साथ डाले थे. वॉन खारा डाले C57BL/6J चूहों और UPEC संक्रमित C57BL/6J चूहों के फ्रे filaments के साथ श्रोणि क्षेत्र के यांत्रिक उत्तेजना के परिणामस्वरूप एक प्रतिक्रिया आवृत्ति है कि प्रयोग के दौरान 28 दिन (1 चित्रा) के दौरान बदल नहीं किया था. इसके विपरीत, UPEC संक्रमित इशारा चूहों श्रोणि उत्तेजना है कि काफी अधिक थे प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन किया और 28 दिन (पी <0.05, चित्रा 3) जब तक काफी ऊंचा रहा. बैक्टीरियल संक्रमण हिंद पंजा (नहीं दिखाया डेटा) के तल का क्षेत्र के स्पर्श संवेदनशीलता में कोई परिवर्तन के परिणामस्वरूप.

/ tp_upload/50158/50158fig1.jpg ">
चित्रा 1. प्रायोगिक प्रवाह चार्ट 1 बैक्टीरिया x 8 10 तीन दिन की एक संस्कृति के द्वारा तैयार पीबीएस में निलंबित कर दिया गया था और कैथीटेराइजेशन anesthetized चूहों के मूत्रमार्ग में डाले. जिसके परिणामस्वरूप स्पर्श परपीड़ा की .04 बलों, .16, 0.4, 1, और 4 जी के साथ वॉन Frey filaments का उपयोग मात्रा निर्धारित किया गया था.

चित्रा 2
चित्रा 2. स्पर्श परपीड़ा वॉन Frey फाइबर चूहों का उपयोग कर परीक्षण के लिए क्रियाविधि बैक्टीरियल संक्रमण के पहले और 7 (PIDs), 14, 21, और 28 दिनों के बाद संक्रमण पर परीक्षण किया गया. व्यवहार के तीन अलग अलग प्रकार रेशा उत्तेजना को सकारात्मक प्रतिक्रिया के रूप में माना गया: 1) पेट की तेज त्याग,) 2 तत्काल चाट या रेशा उत्तेजना के क्षेत्र के scratching, या 3) कूद. रिस्पांस अक्सर सकारात्मक प्रतिक्रिया का प्रतिशत (10 से बाहर) और घ के रूप में गणना की गईअता प्रतिक्रिया आवृत्ति का मतलब प्रतिशत ± एसई के रूप में सूचित किया गया.

चित्रा 3
चित्रा 3. स्पर्श UPEC जीवाणुओं द्वारा प्रेरित. परपीड़ा भेजा आंत hyperalgesia श्रोणि वॉन पांच calibrated बलों के फ्रे filaments का उपयोग क्षेत्र के यांत्रिक उत्तेजना को प्रतिक्रिया के रूप में मापा गया था. डाटा सकारात्मक प्रतिक्रिया का मतलब प्रतिशत ± जीवाणुओं की टपकाना (आधारभूत) पहले और PIDs 7, 14, 21, और 28 में एसई के रूप में रिपोर्ट कर रहे हैं. एनोवा PIDs 7 पर एक प्रतिक्रिया आवृत्ति में उल्लेखनीय वृद्धि में UPEC संक्रमित इशारा चूहों (पी <0.05) में परीक्षण filaments के लिए आधारभूत के साथ तुलना में 28 के लिए संकेत दिया. प्रतिशत प्रत्येक पीआईडी ​​पर प्रतिक्रिया सभी आधारभूत प्रतिक्रियाओं के लिए सापेक्ष फाइबर के लिए कुल प्रतिक्रियाओं के रूप में गणना की गई.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

UPEC साथ माउस प्रोस्टेट की घटनाओं है कि बैक्टीरियल prostatitis, वाणिज्यिक पत्र / सीपीपी के रोगजनन में या जीर्ण सूजन में एक predisposing घटना के रूप में शामिल किया जा सकता है के vivo मॉडलिंग में संक्रमण के लिए अनुमति देता है. तरीकों साहित्य का एक बड़ा शरीर पर बैक्टीरियल तैयारी और टपकाना आकर्षित के लिए महिला मूत्र पथ के संक्रमण 7,14 में UPEC मॉडल पर वर्णित है. मॉडल रोगजनन अध्ययन, संभावित वैक्सीन उम्मीदवारों और प्रतिरक्षा मॉडुलन के तंत्र का परीक्षण करने के लिए व्यापक प्रयोज्यता है. एक quantifiable तरीके में दर्द व्यवहार का पालन करने की क्षमता संक्रमण प्रेरित दर्द रोगजनन के अध्ययन के लिए और संभावित दर्द चिकित्सा विज्ञान के परीक्षण के लिए एक preclinical मॉडल के रूप में देता है.

वहाँ कई महत्वपूर्ण कदम है कि माउस संक्रमण मॉडल की सफलता का निर्धारण कर रहे हैं. मिलाते और स्थिर संस्कृतियों के साथ तीन दिवसीय संस्कृति विधि पिली का इष्टतम अभिव्यक्ति है कि को UPEC के लिए महत्वपूर्ण हो जाना जाता है के लिए किया जाता हैउपकला कोशिकाओं को लगाव. यह UPEC द्वारा सफल अंग उपनिवेश की स्थापना के लिए एक महत्वपूर्ण कदम का प्रतिनिधित्व करता है. बैक्टीरिया विकास के लिए तकनीक UPEC विकास के लिए किया गया है विशेष रूप से 420 आयुध डिपो के 10 μl प्राप्त करने के लिए अनुकूलित कदम के साथ खारा फॉस्फेट-buffered 1 x 10 8 7 बैक्टीरिया युक्त बनाया गया है. अन्य प्रजातियों या जीवाणुओं के स्ट्रेनों अलग दरों पर संभावित विकास और मानकीकरण महत्वपूर्ण होने के लिए उपयुक्त आयुध डिपो है कि 1 10 x 8 बैक्टीरिया देता प्राप्त होगा. बैक्टीरिया के विभिन्न प्रकारों के अनूठे तरीके कि तनाव 14 द्वारा व्यक्त डाह कारकों पर काफी हद तक निर्भर हैं में मूत्राशय और प्रोस्टेट में कोशिकाओं का पालन करें. Murine प्रोस्टेट के सफल संक्रमण इसलिए विषैलापन कारकों का उपयुक्त पूरक के साथ एक UPEC तनाव के उपयोग पर निर्भर होगा. तुरंत संक्रमण के बाद 15 मिनट की एक न्यूनतम लिए एक हल्के anesthetized राज्य में पशुओं को बनाए रखने के लिए महत्वपूर्ण है कि भारतीय नौसेना पोत सुनिश्चितtilled बैक्टीरिया को देते हैं और रोगजनन आरंभ से पहले पेशाब की सामान्य तंत्र डाले मात्रा मूत्रमार्ग से साफ करने का समय है.

चूहों में स्पर्श परपीड़ा अंतर्निहित आंत विकृति का परिणाम है और इस तरह के रूप में उत्तम मेजबान तनाव विशिष्टता द्वारा विशेषता है. हम पहले से वर्णित है कि UPEC के एक पुरुष इशारा / ShiLtJ चूहों में रोगजनक तनाव परपीड़ा लाती है कि 3 दिनों में चोटियों और लंबे समय से कायम है, जबकि एक ही तनाव में C57BL/67 2 चूहों परपीड़ा उत्प्रेरण के काबिल है. हमारे अध्ययन के अंतर्निहित कारण के रूप में इशारा / ShiLtJ चूहों में autoimmune प्रक्रियाओं के त्वरण UPEC प्रेरित सुझाव देते हैं. इस प्रकार मेजबान आनुवंशिक पृष्ठभूमि स्पर्श परपीड़ा के विकास में महत्वपूर्ण है. अन्य महत्वपूर्ण कदम है कि परपीड़ा की एक निष्पक्ष और सफल माप करने के लिए महत्वपूर्ण हैं यह सुनिश्चित कर रहे हैं कि परीक्षक हमेशा उपचार की पहचान करने के लिए अंधा है, एक ही परीक्षक सभी समय पी के माप के लिए जिम्मेदार हैप्रयोग, दिन के दौरान इसी तरह के परीक्षण के समय का उपयोग, चूहों के आवास की स्थिति और दोनों समय अंक के भीतर एक प्रयोग के रूप में के रूप में अच्छी तरह से प्रयोगों के बीच मानकीकृत शर्तों को सुनिश्चित करने में oints.

murine संक्रमण मॉडल सीमाओं कि ध्यान परिणाम व्याख्या के दौरान विचार किया जाना चाहिए की एक संख्या है. बैक्टीरिया डाले intraurethrally के रूप में के रूप में अच्छी तरह से प्रोस्टेट मूत्राशय के संक्रमण की क्षमता है. यह पेचीदा अंतर्निहित विकृति के रूप में किसी भी प्रणालीगत या सामान्य मानकों की व्याख्या कई अंगों में से एक हो सकता है. हालांकि, नैदानिक ​​और प्रोस्टेट व्युत्पन्न जीवाणु उपभेदों के उपयोग के रूप में के रूप में अच्छी तरह से मूत्राशय और प्रोस्टेट की समवर्ती परीक्षा उपयुक्त व्याख्याओं के लिए अनुमति देता है. इसके अलावा, संक्रमण की पद्धति संभावना मानव पुरुषों में आरोही संक्रमण साधन simulates.

संक्रमण मॉडल यहाँ वर्णित उन प्राथमिक पहले की रिपोर्ट से अलग हैmarily UPEC का उपयोग किया है, मेजबान माउस तनाव और कल्चर तकनीकों में मतभेद 6 और 15 मूत्रमार्ग में डाले बैक्टीरिया की मात्रा के दबाव में है. वर्तमान अध्ययन एक अच्छी तरह से विशेषता प्रोस्टेट व्युत्पन्न जीर्ण prostatitis UPEC तनाव का उपयोग करता है 2 रोग मध्यस्थता. पहले के अध्ययनों मूत्राशय में संक्रमण या तीव्र prostatitis है कि सूजन की जांच जुड़े घटनाओं के लिए मुख्य रूप से उपयोग किया गया था, लेकिन नहीं स्पर्श परपीड़ा 6,15 के मामले में विशेषता से व्युत्पन्न बैक्टीरिया का इस्तेमाल किया है. कई अन्य पशु मॉडल की सूचना दी गई है कि autoimmune तंत्र 5,16, हार्मोनल हेरफेर 17 और नवजात thymectomies 18 के लिए prostatitis प्रेरित का उपयोग. जबकि इन मॉडलों के प्रत्येक अंग विशेष रोग विकृति और पूर्व मौजूदा तकनीकों के उपयोग सहित कुछ सकारात्मक गुण है, इन तरीकों की प्रासंगिकता / सी.पी. सीपीपी की वास्तविक रोगजनन अज्ञात है. इसके विपरीत, कार्यप्रणाली इस आदमी में वर्णितuscript एक संभावित तंत्र है कि प्रोस्टेट में रोग रोगजनन के एक सर्जक होने के लिए किया गया है माने को दर्शाता है. इसके अलावा, सी.पी. / सीपीपी रोगजनन को समझने के लिए इसकी उपयोगिता से परे, तकनीक अच्छी तरह से स्थापित करने और जांच प्रोस्टेट के जीर्ण सूजन में उपयोग किया जा सकता है और यह BPH (सौम्य prostatic hyperplasia) और प्रोस्टेट कैंसर में भूमिका.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Acknowledgements

इस शोध द्वारा अनुदान 1K01DK079019A2 (पीटी) NIH / NIDDK से समर्थन किया था.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Culture tubes BD Falcon 352059
LB Broth Miller EMD EM1.10285.0500
Nalgene Centrifuge Tubes Thermo 3118-0050
Isoflurane Butler Schein NDC 11695-6776-1
Catheter needle 30G Hamilton 91030
PE10 tubing BD intramedic 427400
Von Frey Filaments Stoelting 58025-31

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Yamamoto, S. Molecular epidemiology of uropathogenic Escherichia coli. Journal of infection and chemotherapy official journal of the Japan Society of Chemotherapy. 13, 68-73 (2007).
  2. Rudick, C. N., et al. Uropathogenic Escherichia coli induces chronic pelvic pain. Infect. Immun. 79, 628-635 (2011).
  3. Pontari, M. A., Ruggieri, M. R. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. The Journal of urology. 172, 839-845 (2004).
  4. Schaeffer, A. J. Clinical practice. Chronic prostatitis and the chronic pelvic pain syndrome. The New England journal of medicine. 355, 1690-1698 (2006).
  5. Rudick, C. N., Schaeffer, A. J., Thumbikat, P. Experimental autoimmune prostatitis induces chronic pelvic pain. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology. 294, R1268-R1275 (2008).
  6. Elkahwaji, J. E., Ott, C. J., Janda, L. M., Hopkins, W. J. Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strains. Urology. 66, 883-887 (2005).
  7. Hultgren, S. J., Porter, T. N., Schaeffer, A. J., Duncan, J. L. Role of type 1 pili and effects of phase variation on lower urinary tract infections produced by Escherichia coli. Infect. Immun. 50, 370-377 (1985).
  8. Jarrell, J., Giamberardino, M. A., Robert, M., Nasr-Esfahani, M. Bedside testing for chronic pelvic pain: discriminating visceral from somatic pain. Pain research and treatment. 2011, 692102 (2011).
  9. Jarrell, J. Demonstration of Cutaneous Allodynia in Association with Chronic Pelvic Pain. J. Vis. Exp. (28), e1232 (2009).
  10. Giamberardino, M. A., et al. Viscero-visceral hyperalgesia: characterization in different clinical models. Pain. 151, 307-322 (2010).
  11. Laird, J. M., Martinez-Caro, L., Garcia-Nicas, E., Cervero, F. A new model of visceral pain and referred hyperalgesia in the mouse. Pain. 92, 335-342 (2001).
  12. Laird, J. M., Souslova, V., Wood, J. N., Cervero, F. Deficits in visceral pain and referred hyperalgesia in Nav1.8 (SNS/PN3)-null mice. J. Neurosci. 22, 8352-8356 (2002).
  13. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of neuroscience. 53, 55-63 (1994).
  14. Schaeffer, A. J., Schwan, W. R., Hultgren, S. J., Duncan, J. L. Relationship of type 1 pilus expression in Escherichia coli to ascending urinary tract infections in mice. Infect. Immun. 55, 373-380 (1987).
  15. Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. The Prostate. 72, 307-317 (2012).
  16. Rivero, V. E., Cailleau, C., Depiante-Depaoli, M., Riera, C. M., Carnaud, C. Non-obese diabetic (NOD) mice are genetically susceptible to experimental autoimmune prostatitis (EAP). Journal of autoimmunity. 11, 603-610 (1998).
  17. Pakarainen, T., Zhang, F. P., Makela, S., Poutanen, M., Huhtaniemi, I. Testosterone replacement therapy induces spermatogenesis and partially restores fertility in luteinizing hormone receptor knockout mice. Endocrinology. 146, 596-606 (2005).
  18. Taguchi, O., Kojima, A., Nishizuka, Y. Experimental autoimmune prostatitis after neonatal thymectomy in the mouse. Clinical and experimental immunology. 60, 123-129 (1985).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats