En effektiv utvalg forberedelse metode for å forbedre karbohydrater Ion signaler i Matrix-assistert Laser desorpsjon/ionisering massespektrometri

Chemistry

Your institution must subscribe to JoVE's Chemistry section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

En protokoll for å forbedre karbohydrater ion signaler i MALDI massespektrometri av reformere krystallinsk strukturer i prøven forberedelse prosesser er demonstrert.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Ou, Y. M., Kuo, S. Y., Lee, H., Chang, H. T., Wang, Y. S. An Efficient Sample Preparation Method to Enhance Carbohydrate Ion Signals in Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry. J. Vis. Exp. (137), e57660, doi:10.3791/57660 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Eksempel forberedelse er en kritisk prosess i massespektrometri (MS) analyse av karbohydrater. Selv om matrix-assistert laser desorpsjon/ionisering (MALDI) MS metoden for valg i karbohydrater analyse, dårlig ion signal og data reproduserbarhet av karbohydrater prøver fortsatt være alvorlige problemer. For kvantitativ analyse av karbohydrater er en effektiv analytisk protokoll gir overlegen kvalitet nødvendig. Denne videoen viser eksempel forberedelse protokoller for å forbedre signal intensitet og minimere datavariasjon karbohydrater i MALDI-MS. Etter tørking og krystallisering av prøven dråper, er crystal morfologi reformert av metanol før masse spectrometric analyse. Forbedringen i karbohydrater-signalet er undersøkt med MALDI tenkelig massespektrometri (IMS). Eksperimentelle resultater viser at crystal reformasjonen justerer krystallinske strukturer og redistribuerer karbohydrat analytter. Med metoden tørket slippverktøy forberedelse i konvensjonelle MALDI-MULTIPLE Sclerosis, reformere karbohydrater crystal morphologies med metanol viser betydelig bedre signal intensitet, ion bilde distribusjon og data stabilitet. Siden protokoller vist her ikke involverer endringer i utvalg komposisjon, er de generelt gjelder for ulike karbohydrater og matriser.

Introduction

Karbohydrater analyse er en viktig og utfordrende. Karbohydrater og deres derivater spille viktige roller i levende organismer1,2,3. Disse molekylene har komplisert strukturer og er utsatt for brytes. Mange av dem kan ikke være tydelig preget på grunn av problemer i separasjon og gjenkjenning. Selv om matrix-assistert laser desorpsjon/ionisering (MALDI) massespektrometri (MS) har blitt brukt til analyse av en rekke biomolecules, på grunn av sin følsomhet og forståelig resultater4, fortsetter analysere karbohydrater bruker MALDI-MS å være en stor utfordring på grunn av lav ionisering effektiviteten av slike molekyler5. Kjemiske derivatization er en vanlig måte å forbedre ionisering effektiviteten av karbohydrater6,7, men slike prosedyrer er tid og prøve forbruker. Dessuten er ionisering effektiviteten i derivatized karbohydrater fortsatt lavere enn proteiner. Dermed er utviklingen av metoder for å forbedre karbohydrater signal i MALDI-MS uten kompliserte prosedyrer nødvendig.

Bruk av MALDI-MS til kvantitativ analyse er en annen utfordrende emne. Et stort problem på MALDI-MS er at dens følsomhet og data reproduserbarhet avhengig kritisk eksempel forberedelse protokoller og eksperimentelle parametere. I mange tilfeller er kvantitativ analyse av MALDI-MULTIPLE Sclerosis upålitelig heterogene utvalg morphologies og analytt distribusjon. Et kjent eksempel er prøver forberedt med en 2,5-dihydroxybenzoic acid (DHB) MALDI matrise. Når DHB er krystallisert sakte under ambient miljøet, er omfanget av analytt inkorporering matrix krystaller uforutsigbar, fordi resulterende eksempler viser uregelmessig morphologies. Slike eksempler består normalt av store nålen-formet og fine krystaller. Når DHB er forberedt bruker et flyktig løsemiddel og/eller en oppvarmet eksempel plate, resulterer en rask tørking prosessen i mer homogen fine krystaller og bedre kvantitative resultater8,9,10. Denne teknikken kalles "recrystallization" av MALDI prøver. Forbedring tilskrives bedre innlemmelse av analytter i fine matrix krystaller under rask krystallisering prosessen. Vi har også vist at justere eksempel forberedelse miljøet redusert heterogenitet av karbohydrater signal og forbedret kvantitative resultater11,12. Funnene i disse verkene foreslår at prøven morfologi er en kritisk faktor i å bestemme karbohydrater signalkvaliteten. For å utvikle en generelle strategi for daglig analyse, kreves det en effektiv utvalg reformasjonen metode gir forbedret karbohydrater følsomhet.

Vi har systematisk undersøkt sammenhengen mellom eksempel morfologi og karbohydrat følsomhet i MALDI-MULTIPLE Sclerosis i en nylig rapport13. Resultatene får flere viktige karbohydrater og matriser viser at de beste signal forsterkningen er oppfylt ved recrystallizing tørket MALDI prøver. Morfologi av prøver forberedt med metoden konvensjonelle tørket slippverktøy (DD) blir reformert ved rask recrystallization med metanol (MeOH). Detaljert eksempel forberedelse protokollene er vist her. Protokollen består av tre hovedtrinn, inkludert eksempel plate preconditioning, eksempel deponering og recrystallization og massespektrometri analyse. Benyttet karbohydrater inkluderer sialyl-lewis en (SLeA) og maltoheptaose (MH). DHB er brukt som en modell matrise. Resultatene viser at karbohydrater signal intensitet og romlige fordelingen økt markant etter recrystallization. Slik metode kan brukes til prøver med andre populære våpen, inkludert 2,4,6-trihydroxyacetophenone (THAP) og α- cyano-4-hydroxycinnamic acid. Denne metoden fungerer som en generell tilnærming som lett kan integreres i laboratoriet rutinen for karbohydrat analyse.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. sample Plate Preconditioning

  1. Rengjøring av prøven plate
    1. Bruk nitrilhansker for å unngå forurensning av prøven plate under rengjøringen.
    2. Håndvask eksempel platen med 100,0 mL rengjøringsmiddel (1.0 mg/mL).
    3. Håndvask eksempel platen med destillert-ikke-ionisert vann (DDW).
    4. Skyll eksempel tallerken overflaten med 30.0 mL av MeOH.
    5. La prøven platen 600 mL kanne og fyll med DDW til eksempel platen er fullstendig nedsenket i vann.
    6. Sette begeret i en ultralyd bad (se tabell over materialer) og sonicate utvalg platen i 15 min (200 W, 40 kHz).
    7. Ta prøven platen og blåse av vanndråper med trykksatt nitrogen.
    8. Innskudd 0,2 µL av MeOH på prøven plate å sjekke om MeOH sprer seg til andre steder.
      Merk: Hvis MeOH fusjonerer med andre stedene, gjentar du trinn 1.1.3-1.1.5; Hvis ikke, gå videre til neste trinn.
  2. Regulering av tørking kammertemperatur
    1. Bruk en tørking kammer under jevn forhold tørke dråper, som beskrevet tidligere11,12,13. Spesielt bruke den detaljerte fremgangsmåten i trinn 2.1-2.5 på Ou, Y.-M. et al. 201612. Kort:
      1. Tømme tørking kammeret ved romtemperatur nitrogen frekvensen konstant strøm til å opprettholde en lav relativ fuktighet omgivelsene.
      2. Holde eksempel plate temperatur konstant på vanlig - (25 ° C) eller hurtigtørkende betingelser (50 ° C), regulert av en temperaturkontrollert kobber blokk i tørking kammeret.
  3. Utarbeidelse av matrix og analytt løsninger
    1. Utarbeidelse av matrix løsninger
      1. Oppløse DHB i 50% acetonitrile (ACN): 50% DDW å forberede en 0.1 M løsning.
    2. Utarbeidelse av karbohydrater analytter
      1. Oppløse SLeA i DDW å forberede en 10-4 M løsning.
      2. Oppløse MH i DDW å forberede en 10-4 M løsning.

2. prøve avsettelse og Recrystallization

Merk: Optimalisert prosedyrer for å analysere små og regelmessige mengder prøver er beskrevet her. Kontroller at prøven plate temperaturen er stabilisert på ønsket temperatur før innskudds løsninger. Hvis prøven sprer seg over et stort område å dekke andre eksempel flekker under recrystallization, klargjør en ny prøve eller gjenta trinn 1.1.

  1. Analyse av en liten mengde (0,1 µL) eksempel
    Merk:
    følgende har blitt utviklet for å minimere eksempel og tidsforbruket. Det er egnet for kvantitativ analyse av ekte prøver med begrenset eller rask IMS for kvantifisering analyse.
    1. Premix 0,25 µL av DHB løsning og 0,25 µL av SLeA eller MH løsning i et microcentrifuge rør.
    2. Vortex blandet løsningen med en vortex blandebatteri for 3 s.
    3. Nedspinning blandet løsningen i en mini sentrifuge for 2 s (2000 x g).
    4. Bruk en pipette for å trekke ut 0,1 µL av ferdigblandet løsningen og umiddelbart sette den på prøve tallerkenen.
      Merk: Når innskudds litt prøve, Ikke holde ferdigblandet løsningen i spissen av pipette for over 10 s.
    5. Vent til prøven tørke. Typisk tørking ganger er oppført i tabell 1.
    6. Bruke en pipette innskudd 0,2 µL av MeOH rett på stedet tørket prøve. Prøven får våt og tørke ut umiddelbart.
      Merk: Sikre at deponering prosedyren er ferdig i 3 s å unngå betydelig fordamping tap av MeOH.
    7. Undersøke prøven ved hjelp av et mikroskop. Hvis crystal morphologies ikke som forventet (se figur 1 for eksempel av ønskede resultater), Gjenta trinn 2.1.1-2.1.6 å forberede en ny prøve.
    8. Bruk nitrilhansker og forsiktig ta ut eksempel platen fra tørking kammeret.
  2. For analyse av regelmessige mengder (1 µL) av prøve
    Merk: Følgende er utviklet for å maksimere homogenitet av karbohydrater prøver med vanligvis benyttet MALDI eksempel beløp. Prosessen er velegnet for rutine og kvantitative analyser. Recrystallization prosessen redistribuerer prøver og matriser jevnt på større områder.
    1. Premix 2,5 µL av DHB løsning og 2,5 µL SLeA eller MH løsning i et microcentrifuge rør.
    2. Vortex ferdigblandet løsningen med en vortex mikser for 5 s.
    3. Nedspinning blandet løsningen i en mini sentrifuge for 2 s (2000 x g).
    4. Bruk en pipette for å trekke ut 1.0 µL av ferdigblandet løsningen og umiddelbart sette den på prøve tallerkenen.
      Merk: ikke bruk de resterende Forhåndsblandet løsning igjen etter innskudds prøvene.
    5. Vent til prøven tørke. Typisk tørking ganger er oppført i tabell 1.
    6. Bruke en pipette innskudd 1,5 µL av MeOH rett på stedet tørket prøve. Prøven får våt og tørke ut umiddelbart.
      Merk: I tilfeller med høy eksempel plate temperatur (50 ° C) recrystallization delaktiviteten skal utføres innen 5 s å minimere fordampning av MeOH i pipette tips.
    7. Undersøke prøven ved hjelp av et mikroskop. Hvis crystal morphologies ikke som forventet (se figur 1 for eksempel av ønskede resultater), Gjenta trinn 2.2.1-2.2.6 å forberede en ny prøve.
    8. Bruk nitrilhansker og forsiktig ta ut eksempel platen fra tørking kammeret.

3. masse massespektrometri Data oppkjøp og analyse

Merk: Analysen utføres med en kommersiell tid-av-flight masse spectrometer (Tabell for materiale) utstyrt med en MALDI ion kilde. Apparatet drives av bestemt programvare (Tabell for materiale) med pre optimalisert utvinning forsinkelse og laser energi. Spectra registreres i lineær modus med en masse rekke m/z = 0-1500. Eksempel platen potensielle er ±25 keV og hver spectrum gjennomsnitt 10 laser skudd. Brukere bør gjennomføre instrument optimalisering og prøve analyse ved hjelp av kompatibel programvare og følg instrument produsentens instruksjoner.

  1. Åpne instrument kontroll programvare (se Tabell for materiale).
  2. Eksempel platen inn masse spectrometer.
  3. Velg anskaffelsesmetoden pre optimalisert data i programvaren.
  4. Registrere hele eksempelområdet IMS ved hjelp av tenkelig programvare (se Tabell for materiale).
    Merk: Hopp over dette trinnet ikke gjør IMS.
  5. Start datainnsamling i batch-modus av kontroll programvare.
  6. Tegne ion bildene ved hjelp av tenkelig programvare etter datainnsamling er fullført.
  7. Analysere masse spectra bruker analyseprogramvare (se Tabell for materiale) Hvis dataene er registrert uten et ion-bilde.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Representant SEM bilder av SLeA blandet med DHB tilberedt med DD og recrystallization metoder er vist i figur 1. En typisk DHB morfologi er som utarbeidet av metoden DD store nålen-formet krystaller på felgen og fine krystallinske strukturer i midten av prøven flekker. Typisk lengder av slike p-formet krystaller er ~ 100 µm. Etter recrystallization av MeOH har prøven et større område dekket jevnt med fine fnugg som krystaller. Lengden på «flake» krystallene er omtrent 20-50 µm. Recrystallized prøver gir større effektiv flater enn de som produseres av konvensjonelle DD prøver.

IMS resultatene indikerer at flake-like krystaller vanligvis resultere i høyere karbohydrater signal intensitet og en mer homogen romlige fordelingen. Konvensjonelle DD prøver distribueres karbohydrater ion signaler det meste i utkanten av prøven flekker. Figur 2 viser IMS resultatene av SLeA og MH med og uten MeOH recrystallization. Etter recrystallization, distribusjon av SLeA og MH signaler kamp med lyse-feltet bildet av prøve flekker. Også viser alle recrystallized karbohydrater prøver betydelige forbedringer i signal intensitet over disse resultatene fra DD prøver. På grunn av høyere signal intensitet og homogenitet forbedrer recrystallization markert datakvaliteten i kvantitativ analyse.

Forbedre karbohydrater signal intensiteten ved recrystallization er effektivt for både positive og negative ion moduser. Figur 3 sammenligner signal intensiteten av sodiated (positivt ion modus) og deprotonated (negative ion modus) karbohydrater av recrystallized prøver forhold som DD prøvene. Gjennomsnittlig øker recrystallization SLeA og MH prøver sodiated signaler av faktorer av 3.9 og en 3,3, henholdsvis. For deprotonated SLeA, er ion signal vanligvis forbedret med en faktor på omtrent 4,7 etter recrystallization.

Figure 1
Figur 1. SEM bilder av SLeA forberedt med DHB matrise. Prøvene tilberedes med tørket dråpestørrelse og recrystallization metoder. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2. Representant resultatene av bildet massespektrometri av SLeen og MH tilberedt med tørket dråpestørrelse og recrystallization metoder. Ion bildene representerer distribusjoner av sodiated eller deprotonated analytter. Alle lyse-feltet og ion bilder vises i samme skala. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3. Karbohydrater signal intensiteter oppnådd med forskjellige utvalg forberedelse metoder. Svarte stolper: sodiated SLeA (m/z: 843); røde stolper: deprotonated SLeA (m/z: 819); blå stolper: sodiated MH (m/z: 1175). Feilfelt representerer standardavvik. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Eksempel Eksempel plate
temperatur (° C)
Eksempel beløp
(ΜL)
Eksempel tørking
tid (s)
MeOH tørking
tid (s)
Riktig område
utvidelse etter
recrystallization (%)
SLeA 25 0,1 100-150 < 5 0-200
1 300-350 < 10
MH 0,1 100-150 < 5
1 200-350 < 10
SLeA 50 0,1 < 5 < 5
1 < 10 < 10
MH 0,1 < 5 < 5
1 < 10 < 10

Tabell 1. Eksperimentell parametere og tørking forhold under forskjellige utvalg plate temperatures.x

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Eksempel heterogenitet er et avgjørende problem MALDI-MS. DD er mest brukte eksempel forberedelse metoden, men de resulterende krystallene er svært heterogen. Slike eksempler viser dårlig skudd-til-shot og prøve å sample signal reproduserbarhet. Derfor er "sweet spots" i eksemplet områder under datainnsamling en vanlig prosedyre i MALDI eksperimenter. Slike heterogene prøvene er uegnet for kvantifisering i praksis analyser.

I denne studien, er MALDI eksempel morfologi optimalisert ved recrystallization. Forbedring i karbohydrater signal intensitet og data stabilitet ved recrystallization tilskrives forbedret innlemmelse mellom karbohydrater og matriser. På grunn av hydrofile egenskapene til de fleste karbohydrater og matriser, kan MeOH effektivt nedbryte MALDI krystaller og karbohydrater. Observasjon viser at avsettelse og rask fordampning av MeOH reformer store nålen-formet DHB krystaller i små flak-lignende krystallinsk strukturer. Denne prosessen også reduserer eksempel segregering og øker arealet. Ifølge IMS data gir reformert krystaller en bedre microenvironment for karbohydrat ionisering. Spesielt, er utnyttelse av tørking kammeret å gi en referanse tilstand presist kontrollert eksperimentelle parametere. For rutinemessig analyse, kan generelle MS brukere følge protokollene under et ambient miljøet å oppnå lignende ekstrautstyr resultater.

Signal forsterkning ved recrystallization kan også skyldes en økning i effektiv areal, siden MALDI er dominert av overflaten kjemiske reaksjoner14,15. Sammenhengen mellom signal intensitet og effektiv areal av MALDI krystaller har studert ved å forberede prøvene under forskjellige utvalg plate temperaturer11,12. I forhold til en stor endring i krystall størrelse med metoden recrystallization, kan finjustering av krystall størrelse oppnås ved å regulere eksempel plate temperatur under slippverktøyet tørking prosessen. Når du bruker THAP som en matrise, reduserer den gjennomsnittlige størrelsen på p-formet krystaller av THAP 10-fold når prøven plate temperaturen reduseres ved 40 ° C. Observasjoner viser at karbohydrater signal intensitet øker som krystall størrelse reduseres13. Imidlertid er redusere utvalget plate temperatur uegnet for rutinemessig analyse fordi det ikke endre morfologi av DHB effektivt, og det krever lang Klargjøringstiden.

For å sikre best mulig recrystallization resultat, bør forberedelse prosesser utføres med forsiktighet. For det første gir frisk eksempel blandinger den beste signal forsterkningen med metoden recrystallization. Når ferdigblandet løsninger er utsatt for ambient miljøet, oppstår før krystallisering i løsningen som endrer siste krystall størrelse og morfologi. Slik morfologi endring er antagelig en endring i matrise/analytt forholdet. Observasjoner viser at recrystallization av slike eksempler kan ikke gi den beste signal forsterkningen. Derfor betjenes pipettering prosedyren med høy effektivitet å beskytte eksempel slippverktøyet fra før krystallisering innen pipette spissen. Dernest bør en passende mengde MeOH brukes helt reform prøver. Under recrystallization prosessen, bør MeOH settes til eksempel overflaten så raskt som mulig for å unngå betydelig fordamping tap. MALDI prøven krystaller ikke løses helt Hvis volumet av avsatt MeOH ikke er nok. Derimot vil store mengder MeOH spredt og redusere prøvene tetthet. Det anbefales å observere prøve morphologies under et mikroskop for å sikre at crystal morphologies er endret ordentlig før MS analyse. Hvis crystal morphologies ikke fullt endres (se figur 1 og tabell 1 for referanse), er det nødvendig å forberede en ny eksempel med de samme fremgangsmåtene.

Den beste kvantitativ analyse tilnærmingen i MALDI-MS analyserer reformerte prøver med IMS. Selv om reformasjonen reduserer betydelig eksempel heterogenitet, variere fortsatt signal intensiteten av analytter i ulike områder (figur 2). Med manuell undersøkelse av valgte prøveposisjoner gjennomsnitt analyse av hele prøven områder med IMS ut usikkerhet og datavariasjon. Observasjoner viser at recrystallization av prøver med fast beløp (1.0 µL eksempel løsning) gir overlegen karbohydrater eksempel homogenitet i kvantitativ analyse (trinn 2.2). Imidlertid forbruker IMS analyse av slike eksempler mer analyse tid enn manuell eksamen metoden. For å oppnå rask IMS analyse, kan forbereder prøver ved 0,1 µL utvalg løsninger (trinn 2.1) produsere lite utvalg områder og redusere analyse.

Recrystallization av MALDI prøver gir overlegen eksempel morfologi for sensitive og kvantitative analyser i MALDI-MS. Det grunnleggende prinsippet bak denne metoden er tydelig demonstrert. De eksperimentelle prosessene utviklet i dette arbeidet er praktisk og effektiv for de generelle eksperimentelle forhold. Disse eksperimentelle prosessene kan lett brukes på rutinemessig analyser uten ekstra kostnad.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne ikke avsløre.

Acknowledgments

Forfatterne har ingen takk.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Reagent
Detergent powder Alconox 242985
Methanol Merck 106009
Acetonitrile Merck 100003
2,5-dihydroxybenzoic acid (DHB) Alfa Aesar A11459
sialyl-lewis A (SLeA) Sigma-Aldrich S1782
Maltoheptaose Sigma-Aldrich M7753
Pipette tips Mettler Toledo 17005091
Microcentrifuge tube Axygen MCT-150-C
Equipment
Milli-Q water purification system Millipore ZMQS6VFT1
Powder-free nitrile gloves Microflex SU-690
600 mL beaker Duran 2110648
Ultrasonic cleaner Delta DC300H
Hygrometer Wisewind 5330
Nitrogen gas flowmeter Dwyer RMA-6-SSV
K-type thermocouples Digitron 311-1670
Vortex mixer Scientific Industries  SI-0236
Mini centrifuge Select BioProducts Force Mini 
Pipette Rainin pipet-lite XLS
Stereomicroscope Olympus SZX16
Temperature controllable drying chamber This lab
Ultraflex II TOF/TOF mass spectrometer Bruker Daltonics
MTP 384 target plate polished steel BC Bruker Daltonics 8280781
Flexcontrol Version 3.4 Bruker Daltonics Control software
Fleximaging Version 2.1 Bruker Daltonics Imaging software
Flexanalysis Version 3.4 Bruker Daltonics Analysis software

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Holme, D. J., Peck, H. Analytical Biochemistry. 3rd edn, Addison Wesley Longman Limited. (1998).
  2. Costello, C. E. Time, life ... and mass spectrometry - New techniques to address biological questions. Biophysical Chemistry. 68, (1-3), 173-188 (1997).
  3. Caroff, M., Karibian, D. Structure of bacterial lipopolysaccharides. Carbohydrate Research. 338, (23), 2431-2447 (2003).
  4. Marvin, L. F., Roberts, M. A., Fay, L. B. Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry in clinical chemistry. Clinica Chimica Acta. 337, (1), 11-21 (2003).
  5. Harvey, D. J. Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry of carbohydrates. Mass Spectrometry Reviews. 18, (6), 349-450 (1999).
  6. Ciucanu, I., Kerek, F. A simple and rapid method for the permethylation of carbohydrates. Carbohydrate Research. 131, (2), 209-217 (1984).
  7. Lamari, F. N., Kuhn, R., Karamanos, N. K. Derivatization of carbohydrates for chromatographic, electrophoretic and mass spectrometric structure analysis. Journal of Chromatography B. 793, (1), 15-36 (2003).
  8. Nishikaze, T., Amano, J. Reverse thin layer method for enhanced ion yield of oligosaccharides in matrix-assisted laser desorption/ionization. Rapid Communications in Mass Spectrometry. 23, (23), 3787-3794 (2009).
  9. Williams, T. I., Saggese, D. A., Wilcox, R. J., Martin, J. D., Muddiman, D. C. Effect of matrix crystal structure on ion abundance of carbohydrates by matrix-assisted laser desorption/ionization Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry. Rapid Communications in Mass Spectrometry. 21, (5), 807-811 (2007).
  10. Nicola, A. J., Gusev, A. I., Proctor, A., Jackson, E. K., Hercules, D. M. Application of the fast-evaporation sample preparation method for improving quantification of angiotensin II by matrix-assisted laser desorption/ionization. Rapid Communications in Mass Spectrometry. 9, (12), 1164-1171 (1995).
  11. Lai, Y. H., et al. Reducing Spatial Heterogeneity of MALDI Samples with Marangoni Flows During Sample Preparation. Journal of the American Society for Mass Spectrometry. 27, (8), 1314-1321 (2016).
  12. Ou, Y. -M., et al. Preparation of Homogeneous MALDI Samples for Quantitative Applications. Journal of Visualized Experiments. (116), e54409 (2016).
  13. Lee, H., et al. Enhancing carbohydrate ion yield by controlling crystalline structures in matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry. Analytica Chimica Acta. 49-55 (2017).
  14. Allwood, D. A., Perera, I. K., Perkins, J., Dyer, P. E., Oldershaw, G. A. Preparation of 'near' homogeneous samples for the analysis of matrix-assisted laser desorption/ionisation processes. Applied Surface Science. 103, (3), 231-244 (1996).
  15. Sadeghi, M., Vertes, A. Crystallite size dependence of volatilization in matrix-assisted laser desorption ionization. Applied Surface Science. 127, (Supplement C), 226-234 (1998).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics