特定地点的重组酶(SSR)技术的原则

Biology

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Summary

特定网站的重组(SSR)技术的Cre / lox系统的问世使在分子生物学的许多进步,并已证明本身作为一个有价值的工具,用于评估转基因动物的基因功能。这次采访,讨论了环化重组(CRE)以及如何使用这种酶,导致有条件的突变,已超过传统的敲了战略的显着优势的发展机制网站的特定重组。

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Bucholtz, F. Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology. J. Vis. Exp. (15), e718, doi:10.3791/718 (2008).

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Abstract

网站具体的重组(SSR)技术,使操纵基因的结构,探索基因功能和分子生物学已成为不可或缺的工具。网站,具体的重组酶的蛋白质结合,以不同的目标DNA序列。在1980年代在噬菌体的Cre / lox系统首次描述。 Cre重组是我型拓扑异构酶催化两个loxP位(X - OVER的P1位点)的网站站点特定的DNA重组。的Cre / lox系统不需要任何辅助因子。 LoxP位序列中包含不同的结合位点的Cre重组酶,环绕一个方向性的核心序列重组和重排的发生。当细胞中含有loxP位的网站,并表达Cre重组,重组事件发生。双链DNA Cre重组两个loxP位网站被切断,重新排列,并结扎(“剪刀和胶水”)。产品的重组事件的非对称序列的相对方向取决于。

SSR技术是经常使用的一种工具,以探讨基因的功能。这里感兴趣的基因表达Cre目标网站loxP位(“floxed”)两侧。动物,然后越过一个组织特异性启动子的控制下表达Cre重组酶的动物。组织中的表达Cre重组目标序列结合,并切除floxed基因。控制基因的缺失使基因在特定的组织和功能在不同的时间点的调查。采用SSR技术---有条件的突变的基因功能分析 - 已超过传统的敲奏通常是致命的基因缺失的显着优势。

Comments

3 Comments

  1. Hi. The presentation was good and substantial. It would much good if the delicate concepts of selection are also included. Thank you. Cheers, Lopez Gilsinia Gilroy

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    Posted by: Anonymous
    May 31, 2008 - 5:54 AM
  2. request for article

    Reply
    Posted by: Anonymous
    January 13, 2010 - 7:59 AM
  3. request for the articel

    Reply
    Posted by: Anonymous
    July 8, 2010 - 4:52 PM

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