단백질의 전기 영동 분리

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

이 비디오에서는, 우리는 폴리 - acrylimide 겔 전기 영동 (PAGE)를 사용하여 단백질의 전기 영동 분리하는 방법을 보여줍니다.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

전기는 단백질의 복잡한 혼합물 (예, 전지,​​ subcellular 분수, 열 분수, 또는 immunoprecipitates에서) 분리 subunit의 성분을 조사하고, 단백질 샘플의 균질성를 확인하는 데 사용됩니다. 그것은 또한 더 이상 응용 프로그램에서 사용하기 위해 단백질을 정화 제공할 수 있습니다. polyacrylamide 젤 전기 영동에서 단백질은 polyacrylamide 젤 매트릭스의 모공을 통해 전기 분야에 대한 응답으로 마이 그 레이션, 기공 크기는 증가 아크릴 아미드의 농도로 감소하게된다. 기공 크기와 단백질 요금, 크기 및 모양의 결합은 단백질의 마이 그 레이션 속도를 결정합니다. 이 단원에서는 표준 Laemmli 방법은 나트륨 dodecyl 황산 (SDS)의 면전에서, denaturing 조건 하에서 불연속 겔 전기 영동을위한 IE를 설명합니다.

Protocol

이 실험 방법에 대한 전체 텍스트 프로토콜에서 사용할 수 있습니다 분자 생물학의 현재 프로토콜 .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Comments

10 Comments

  1. Hi nice demo but I did not understand why the presenters kept on showing an agarose gel electrophoresed DNA gel in between as a representation instead of a protein gel.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 15, 2008 - 1:11 PM
  2. SYPROorange and SYPROruby staining - two fluorescent-based protein detection methods - can appear like ethidium bromide stained DNA gels.  So those gels you are speaking of may actually be protein gels. 

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 16, 2008 - 9:34 AM
  3. Yeah possible,  but then why do we see only a single band.I guess SYPRO detection methods would detect the entire protein panel and not specific bands. unless otherwise they are detecting some specific enzyme activity using flourescent detection methods.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 16, 2008 - 9:52 AM
  4. We loaded BSA.

    Thanks.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 17, 2008 - 2:12 AM
  5. Please not that we showed polyacrylamide gel electrophoresis and not agarose gel electrophoresis.

    Thanks.

    Bulbul Chakravarti

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 17, 2008 - 2:08 AM
  6. why cannot i see the video...? pls help me..

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2008 - 3:35 AM
  7. i can see it now..thanks...

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2008 - 4:50 AM
  8. my network is poor, I can not enjoy the video

    Reply
    Posted by: Huang C.
    March 15, 2009 - 6:30 AM
  9. Hello, Please shoot me an email at nikitab@jove.com and we'll figure something out for you. Cheers, Nikita

    Reply
    Posted by: Anonymous
    March 22, 2009 - 10:26 PM
  10. Hi, thanks what can I download your video ? please help me

    Reply
    Posted by: violet s.
    January 14, 2012 - 10:35 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics