تلطيخ البروتينات في الهلام

Published 7/08/2008
8 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology
 

Summary

بعد الانفصال من جانب وسائل الكهربي ، ويمكن الكشف عن البروتينات في هلام بطرق عدة تلطيخ. وأظهرت تلطيخ من البروتينات مع الأزرق Coomassie ، وتلطيخ فضة ، أورانج SYPRO ، روبي SYPRO في هذا الفيديو.

Cite this Article

Copy Citation

Gallagher, S., Chakavarti, D. Staining Proteins in Gels. J. Vis. Exp. (17), e760, doi:10.3791/760 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

بعد الانفصال من جانب وسائل الكهربي ، ويمكن الكشف عن البروتينات في هلام بطرق عدة تلطيخ. هذه الوحدة يصف بروتوكولات للكشف عن البروتينات التي كتبها أربعة أساليب الشعبية. Coomassie تلوين الزرقاء هو وسيلة سهلة وسريعة. تلطيخ الفضة ، في حين أن أكثر مضيعة للوقت ، وإلى حد كبير أكثر حساسية وبالتالي يمكن استخدامها للكشف عن كميات صغيرة من البروتين. فلوري تلطيخ هو بديل شعبية لتلطيخ الاجراءات التقليدية ، ويرجع ذلك أساسا هو أكثر حساسية من تلطيخ Coomassie ، وغالبا ما تكون حساسة مثل تلطيخ الفضة. وأظهرت أيضا تلطيخ من البروتينات مع أورانج SYPRO وروبي SYPRO هنا.

Protocol

بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في البروتوكولات الحالية في البيولوجيا الجزيئية .

Comments

8 Comments

  1. WHICH REACTION EQUATION OF CONVERT Cu+² TO Cu+1 in the protein test

    Reply
    Posted by: Anonymous
    August 3, 2008 - 7:45 AM
  2. thank you!very good!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 6, 2008 - 8:51 PM
  3. It is very good, thanks

    Reply
    Posted by: Anonymous
    November 12, 2008 - 6:43 AM
  4. A good and cheap alternative to SYPRO Rubi is RuBPS staining. Here are some protocols. More information can be found on www.ruthenium.ag.vu   RuBPS staining protocol I (quality) 1. Fix the gel in 30% EtOH, 10% acetic acid overnight ². Rinse the gel in ²0% EtOH for 30 min and repeat 3 times 3. Incubate the gel in 1 mM RuBPS solution for 6 h 4. Equilibrate the gel in water for 10 min and repeat once 5. Destain the gel with 40% EtOH/10% acetic acid for 15 h 6. Equilibrate the gel in water for 10 min repeat once and scan   all% are in V/V   Procedure as published in Proteomics ²004, 4, 599–608.     RuBPS staining protocol II (fast)   1. Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid containing    1 mM RuBPS for 1 h. ². Destain the gel for ²0 min in 40% Ethanol/10% acetic acid 3. Wash the gel for 10 min in water and scan   all% are in V/V   Procedure as published in PLoSONE. ²007 Feb ²8;²(²)e²63.       RuBPS staining protocol III (co-electrophoretical)   1. Add 1 ml of ²0 mM stock solution to one pocket of your SDS gel. Run     the gel according to your standard procedure. ². Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for ²0 min 3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan       RuBPS staining protocol IV (loading buffer)   1. Add 1 ml of ²0 mM stock solution to your loading buffer (omit all other     dyes like bromophenol blue). Run the gel according to your standard     procedure. ². Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for ²0 min 3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 16, 2009 - 1:20 PM
  5. Itz realy ² gud!

    Reply
    Posted by: sathya r.
    May 18, 2009 - 11:01 AM
  6. Thank yoy

    Reply
    Posted by: JASSIM A.
    May 20, 2009 - 9:39 AM
  7. thank you

    Reply
    Posted by: ibrahim b.
    August 27, 2010 - 12:31 AM
  8. thanks! This is very useful for my job!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    August 31, 2010 - 4:33 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Video Stats