מכתים חלבונים ג'ל

Biology
 

Summary

בעקבות ההפרדה על ידי שיטות electrophoretic, חלבונים בג'ל ניתן להבחין באמצעות שיטות צביעה שונות. הכתמה של חלבונים עם Coomassie כחול, מכתים כסף, SYPRO אורנג', SYPRO רובי הם הפגינו וידאו.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Gallagher, S., Chakavarti, D. Staining Proteins in Gels. J. Vis. Exp. (17), e760, doi:10.3791/760 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

בעקבות ההפרדה על ידי שיטות electrophoretic, חלבונים בג'ל ניתן להבחין באמצעות שיטות צביעה שונות. יחידה זו מתארת ​​פרוטוקולים לאיתור חלבונים על ידי ארבע שיטות פופולרי. מכתים Coomassie הכחול הוא שיטה קלה ומהירה. כסף מכתים, בעוד זמן רב יותר, באופן משמעותי יותר רגיש ולכן יכול לשמש כדי לזהות כמויות קטנות יותר של חלבון. מכתים פלורסנט היא אלטרנטיבה פופולרית נהלים מכתים מסורתי, בעיקר משום שהוא רגיש יותר מכתים Coomassie, ולעתים קרובות הוא רגיש כמו מכתים כסף. הכתמה של חלבונים עם SYPRO כתום SYPRO רובי הם הפגינו גם כאן.

Protocol

פרוטוקול טקסט מלא לגישה זו ניסיוני זמין הפרוטוקולים נוכחי בביולוגיה מולקולרית .

Comments

8 Comments

  1. WHICH REACTION EQUATION OF CONVERT Cu+² TO Cu+1 in the protein test

    Reply
    Posted by: Anonymous
    August 3, 2008 - 7:45 AM
  2. thank you!very good!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 6, 2008 - 8:51 PM
  3. It is very good, thanks

    Reply
    Posted by: Anonymous
    November 12, 2008 - 6:43 AM
  4. A good and cheap alternative to SYPRO Rubi is RuBPS staining. Here are some protocols. More information can be found on www.ruthenium.ag.vu   RuBPS staining protocol I (quality) 1. Fix the gel in 30% EtOH, 10% acetic acid overnight ². Rinse the gel in ²0% EtOH for 30 min and repeat 3 times 3. Incubate the gel in 1 mM RuBPS solution for 6 h 4. Equilibrate the gel in water for 10 min and repeat once 5. Destain the gel with 40% EtOH/10% acetic acid for 15 h 6. Equilibrate the gel in water for 10 min repeat once and scan   all% are in V/V   Procedure as published in Proteomics ²004, 4, 599–608.     RuBPS staining protocol II (fast)   1. Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid containing    1 mM RuBPS for 1 h. ². Destain the gel for ²0 min in 40% Ethanol/10% acetic acid 3. Wash the gel for 10 min in water and scan   all% are in V/V   Procedure as published in PLoSONE. ²007 Feb ²8;²(²)e²63.       RuBPS staining protocol III (co-electrophoretical)   1. Add 1 ml of ²0 mM stock solution to one pocket of your SDS gel. Run     the gel according to your standard procedure. ². Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for ²0 min 3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan       RuBPS staining protocol IV (loading buffer)   1. Add 1 ml of ²0 mM stock solution to your loading buffer (omit all other     dyes like bromophenol blue). Run the gel according to your standard     procedure. ². Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for ²0 min 3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 16, 2009 - 1:20 PM
  5. Itz realy ² gud!

    Reply
    Posted by: sathya r.
    May 18, 2009 - 11:01 AM
  6. Thank yoy

    Reply
    Posted by: JASSIM A.
    May 20, 2009 - 9:39 AM
  7. thank you

    Reply
    Posted by: ibrahim b.
    August 27, 2010 - 12:31 AM
  8. thanks! This is very useful for my job!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    August 31, 2010 - 4:33 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics