טכניקות לעריכה גנומית

סרטון זה מסביר את הרעיון של עורכי בסיס ציטוזין בתיווך קריספר לגרימת החלפת נוקלאוטידים ממוקדת.

בסרטון זה, אנו מדגימים עריכת גנום מבוססת CRISPR-Cas9 All-in-One בתאים בתרבית, כאשר Cas9 ו-sgRNA מסופקים כמבנה פלסמיד יחיד לתאים. מערכת CRISPR-Cas9 והגן הרצוי להחדרה הוכנסו לתאים באמצעות טכניקת אלקטרופורציה כדי להקל על עריכת גנים מוצלחת.

סרטון זה מדגים טכניקה של עריכת גנום מבוסס נוקלאז באצבעות אבץ בתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים (hPSCs). מכיוון שניתן להתמיין לתאי גזעי עוברי אורח לסוגי תאים שונים, טכנולוגיה זו מועילה למחקרים פתולוגיים ופרמקולוגיים במבחנה באופן ספציפי למטופל.

סרטון זה מתאר טכניקת עריכת גנום מדויקת בתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם, או hiPSCs, תוך שימוש ב- TALENs כדי ליצור שברים דו-גדיליים בלוקוס ממוקד, ולגרום לתיקון מכוון הומולוגיה לשילוב גנים של חלבון פלואורסצנטי.

בסרטון זה, אנו מדגימים שילוב טרנסגנים ספציפיים לאתר בתיווך phiC31 בעובר אנופלס באמצעות מיקרו-הזרקה. שיטה זו מסייעת להחדיר גנים רצויים למערכת מארחת למחקר וליישומים תעשייתיים.

בסרטון זה אנו מדגימים יצירה של צמחי ארבידופסיס טרנסגניים המבטאים טרנסגן יציב באמצעות טרנספורמציה גנטית בינארית בינארית מבוססת כרומוזומים מלאכותיים בתיווך אגרובקטריום.

בסרטון זה, אנו מדגימים הליך ליצירת קו טרנסגני יציב של דג זברה המבטא באופן מכונן חלבון מחוון מתח פלואורסצנטי בעקבות הזרקה משותפת של מערכת טרנספוזון Tol2 הכוללת את mRNA טרנספוזאז ומבנה טרנספוזון Tol2 המקודד את מחוון המתח הפלואורסצנטי.

סרטון זה מדגים את ההליך ליצירת נוירונים מוטוריים על ידי טרנספקציה של תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים אנושיים עם מערכת טרנספוזון PiggyBac על ידי ביטוי חוץ רחמי של גורמי שעתוק ספציפיים לשושלת.

סרטון זה מדגים השתקת גנים מבוססת הפרעות CRISPR בלפטוספירה פתוגנית. דיכוי ממוקד של ביטוי גנים באמצעות מערכת CRISPR/Cas החוסמת היווצרות mRNA מסייע בזיהוי גנים מועמדים למחקרים פתולוגיים ופרמקולוגיים.

סרטון זה מתאר הליך של נוקאאוט גן מטרה באמצעות מערכת Cre-recombinase המושרה בטמוקסיפן בעקבות הזרקה תוך צפקית של טמוקסיפן במודל עכבר.

סרטון זה מתאר טכניקת נוקאאוט גנטי המשתמשת בשרשור קריספר כדי להעלים בו זמנית גנים מרובים בתאי אורגנואיד של עכבר בתרבית. שיטה זו משמשת כדי לדפוק גן חולה ולהבהיר את תפקודו של גן ואת הפרלוגים שלו.

בסרטון זה, אנו מדגימים שיטה לביצוע התמרה של וקטורים לנטי-ויראליים של shRNA כדי להשיג קווי תאים יציבים בתאי גזע ותאי אב המטופויטיים אימורטליים (iHSPCs).

סרטון זה מדגים את מערכת ביטוי הגנים טטרציקלין, או Tet-On, במודל עכבר. בנוכחות דוקסיציקלין, נגזרת טטרציקלין, מערכת טט-און המורכבת מחלבון טרנסאקטיבטור מבוקר טטרציקלין הפוך מופעלת ומביעה את הגן המעניין.

בסרטון זה אנו מתארים הליך לביצוע טרנספקציה הפוכה של siRNA לאדיפוציטים כדי לווסת את הביטוי של חלבון מטרה.

סרטון זה מתאר את השיטה של ויסות ביטוי גנים בתאים בתרבית על ידי טרנספקציה עם פלסמיד המכיל גן מעניין ופלסמיד רגולטורי. הביטוי של פלסמיד זה יכול להיות נשלט על ידי טטרציקלין או אנלוגים סינתטיים שלה, מה שהופך את המערכת הזאת מודל שימושי ללמוד ביטוי גנים מוסדר.

סרטון זה מתאר טכניקת הפלת גנים באמצעות חסימת מורפולינוס תרגומית המוזרקת במיקרו בשלב התא האחד של דג המערות. מורפולינוסים הם אוליגונוקלאוטידים של DNA הנקשרים לרצף המשלים של mRNA המטרה וחוסמים את תרגומו לחלבון. כתוצאה מכך, מורפולינוסים משמשים ככלים מולקולריים כדי לעצור או להפחית את ביטוי הגן באופן זמני.