Protocol
Alle dieren werden gehuisvest en verzorgd in overeenstemming met de nationale en institutionele richtlijnen voor de verzorging en het gebruik van proefdieren. Ethiek goedkeuring voor dit protocol werd door de Universiteit van Animal Care Committee British Columbia verleend. Mannelijke Sprague-Dawley ratten die tussen 300-450 g werden gebruikt voor dit protocol.
1. Donor Operation
- Bij benadering 100 ml cardioplegia (RT) in een bekerglas verbonden lange intraveneuze (IV) katheterbuis met een 3-weg kraan. Gebruik een stand aan de kolf verheffen tot ongeveer 80 cm boven het werkzame oppervlak, waardoor cardioplegia levering door zwaartekracht.
- Om structuren adequaat te visualiseren, gebruikt u een paar van chirurgische loepen of een dissectie microscoop.
LET OP: Wij gebruiken momenteel een verrekijker operationele microscoop met 3.4 - 21.3X vergroting. - Plaats de donor in een verdoving kamer en veroorzaken anesthesie met 4-5% isofluraan. Breng de rat om een operationele platform en anesthesie door neuskegel met 1 te behouden - 2% isofluraan. Breng vet zalf ogen van het dier tot droog voorkomen. Dien midazolam (2 mg / kg) intraperitoneaal met een 25 G naald.
- Met behulp van chirurgische clippers, scheren de donor van xiphisternum naar onderkaak. Scheren een klein gebied van de linker lies (voor volgende toegang IV). Breng een ontharen agent om de operatieve oppervlakken, wacht ongeveer 5 min, en verwijder haar met een stukje gaas.
- Prep de chirurgische sites met een povidonjood of chloorhexidine-gebaseerde oplossing (we alleen chloorhexidine gebruiken). Infiltreren de incisional sites met 0,1-0,5% lidocaïne subcutaan.
- Bevestig de voorpoten en liet achterbeen aan het bedrijfsresultaat platform met plakband, gratis voor monitoring van narcose diepte en de vitale functies verlaten van de rechter achterpoot.
- Na het zorgen voor een passende verdoving diepte door pedaal snuifje, maken een incisie in de linker lies plooi met behulpEen 22-scalpel blade. Door stompe dissectie, bloot de linker gemeenschappelijke dijbeenader en het verkrijgen van toegang IV als volgt:
- Voorzichtig trekken het weefsel bovenop de lies, en canule de ader met een 24 G IV. Sluit de IV een korte lengte van de zoutoplossing gevulde IV slangen, en zet de slang op zijn plaats met plakband.
OPMERKING: De procedure voor femorale veneuze canulatie bij ratten wordt elders beschreven door Jespersen en collega's 14. - Sluit een zoutoplossing gevulde 10 ml spuit om de IV buis en voorzichtig zuig bloed correcte positionering van de IV waarborgen.
- Injecteer 300-500 IU van ongefractioneerde heparine door de IV buis, en vervolgens spoel de buis met 3-5 ml zoutoplossing.
- Voorzichtig trekken het weefsel bovenop de lies, en canule de ader met een 24 G IV. Sluit de IV een korte lengte van de zoutoplossing gevulde IV slangen, en zet de slang op zijn plaats met plakband.
- Vervolgens tracheotomize de donor als volgt:
- Voeg een middellijn incisie in het zachte weefsel tussen de jugulaire notch en onderkaak met een 22-scalpel blade. Doordringen in de capsule van de schildklier in de middellijn behulp MetzenBaum schaar, en een aparte haar lobben met stompe dissectie.
- Met stompe dissectie, scheid de riem spieren van de nek in de middellijn aan het voorste oppervlak van de trachea bloot.
- Gebruik een gebogen tang om botweg ontleden een omtrek vliegtuig rond de luchtpijp. Omcirkel de luchtpijp met een 4-0 zijden stropdas.
- Met irisschaar, maak een dwarse incisie in de voorste trachea, ongeveer 5 mm lager dan de schildklier kraakbeen. Voorzichtig introduceren de tracheacanule (een 14 G IV) en zet hem op zijn plaats met behulp van de 4-0 zijden stropdas.
- Sluit de tracheale canule een mechanische ventilator. Redirect de toevoer van zuurstof en isofluraan via de ventilator circuit, en ventileren van de donor met een snelheid en getijdenenergie volume voorspeld door zijn gewicht 13.
- Een insnijding in de middellijn van de borstkas (met een 22-scalpel blade), verlenging van de snede in het jugularis inkeping tot onder de xipisternum.
- Logeren in de middellijn, Voer een mediane sternotomie met behulp van een bot mes. Trek de randen van het borstbeen met een zelf-behoud oprolmechanisme. Voer het hartzakje en pleura holtes.
- Voer een thymectomie. Het is het makkelijkst om eerst onomwonden verdelen de thymus in de middellijn, en dan scheiden van de omliggende structuren met behulp van een combinatie van stompe en scherpe dissectie.
OPMERKING: De oorsprong van de interne thoracale slagaders worden verwond wanneer het ontleden van de thymus van het superieure sternale randen. Om het bloeden te voorkomen, kan hemostatische clips worden toegepast voordat het verwijderen van de thymus op deze punten. - Met behulp van Metzenbaum schaar en / of een scherp Lauer, ontleden peri-cavale vet weg van de vena cava inferior (IVC). Zorg ervoor dat de IVC is relatief vrij van vet en bindweefsel van de Cavo-atriale knooppunt superieur, het membraan inferiorly.
- Met behulp van een scherpe Lauer, de omtrek gratis de vena cava superior (SVC) en omringen het met een 4-0 zijden stropdas.
- Vervolgens ontleden delinks vena cava vrij van de omliggende structuren en ligeren deze proximaal en distaal met 4-0 zijden dassen. Reseceren de tussenliggende gedeelte van cava naar links subclavia bloot te leggen.
- Omtrek gratis de aortaboog schepen met een scherp Lauer. Breng proximale en distale chirurgische clips naar de onbenoemde slagader, en verdeel het tussen de clips. Laat de linker gemeenschappelijke halsslagader en de linker subclavia-un afgekapt.
- Vervolgens canule de SVC met een 24 G IV katheter. Bevestig de katheter met de eerder geplaatste 4-0 zijden stropdas.
- Bereid je voor op een doelmatige, maar zachte graft oogst.
- Met behulp van een scherpe schaar, verdeel het IVC gewoon superieur aan het middenrif oppervlak. Verdeel de SVC superieur aan haar cannulatie site, ervoor te zorgen dat de omgeving van de luchtwegen structuren niet gewond.
- Schakel de ventilator en ontkoppel de tracheacanule. Doorsnijden de trachea proximaal.
- Pak de doorsneden luchtpijp met een tang en verwijder het harten de longen en-bloc. Dit zal zachte tractie nodig met scherpe dissectie als het hart-long transplantaat wordt verwijderd. Scheid de trachea van de onderliggende slokdarm. Niet verwondt de afdalende aorta, waardoor een lang onderdeel ervan blijft intact na de oogst.
2. Voorbereiding van de hart-long Graft
OPMERKING: bij het invullen van dit deel van de procedure, moet een assistent zijn verlamming van de ontvanger knaagdieren en de voorbereiding van graft implantatie.
- Plaats de hart-long transplantaat op chirurgische gaas met het voorste oppervlak van het hart naar beneden. Met behulp van scherpe dissectie, verwijder eventueel resterende slokdarm, het vermijden van schade aan de achterste luchtwegen.
- Zoek de thoracale aorta en plaats een 16 G-stompe getipt canule. Bevestig de canule op zijn plaats met een 4-0 zijden stropdas.
- Zoek de aortaboog schepen, en een chirurgische clip van toepassing op de linker subclavia. Laat de linker halsslagader un-geknipt voor subsequent de-luchten.
- Dien de eerste dosis cardioplegia op door de cardioplegia slang op de 16 G aorta canule. De halsslagader tijdelijk moeten worden afgesloten met een tang om adequate levering van cardioplegie waarborgen.
Opmerking: Een voordeel van het hebben van de aorta canule bevestigd dat cardioplegia continu en / of intermitterend worden toegediend zoals gewenst. Voor intermitterende dosering, we leveren meestal cardioplegie elke 10 - 15 min in 5 ml bolussen meer dan 30 - 45 sec. - Met Metzenbaum schaar en / of een scherpe Lauer, ontleden peri-aortische vet verwijderd van de aorta. Zorg ervoor dat de aorta is relatief vrij van vet en bindweefsel van links subclavia (distale arch) om zijn cannulatie website.
- Vervolgens bloot de linker hoofdstam bronchus met een scherp Lauer en ligeren deze proximaal met een 4-0 zijden stropdas. Doorsnijden de linker bronchus distale aan de ligatuur met iris schaar. Voer een achtergelaten pneumonectomie door ligatie van de linker longslagader en ader met 4-0 zijden dassen. Doorsnijden distaal van de ligatuur en verwijder de linker long.
- Zoals hierboven, verwijder alle longkwabben met uitzondering van de rechter bovenste en middelste lobben. Vermijd verwonden het IVC in het proces van het uitvoeren van lobectomies.
- Sluit de cardioplegia slang aan op de aorta canule en beheren continue cardioplegie terwijl de ontvanger wordt voorbereid. Plaats de hart-long transplantaat in een steriele houder (bijvoorbeeld een bekerglas).
3. Ontvanger Operation
- Verdoven van de ontvanger volgens de donor operatie boven. Gebruik dierenarts zalf voor de ogen van het dier te beschermen tegen uitdroging. Bevestig anesthesie vaak door pedaal snuifje.
- Plaats het dier volgens de donor operatie, dit keer het verlaten van de juiste voorpoot vrij om de vitale functies en verdoving diepte te controleren.
- Scheer de buik van xiphisternum naar penis. Scheren een klein gebied van de linker lies (voor volgende toegang IV). Breng eenontharen agent om de operatieve oppervlakken, wacht ongeveer 5 min, en verwijder haar met een stukje gaas.
- Prep de chirurgische sites met een povidonjood of chloorhexidine gebaseerde oplossing. Infiltreren de incisional sites met 0,1-0,5% lidocaïne subcutaan.
- Tracheotomize en ventileren van de ontvanger, zoals hierboven aangegeven. Ook onderhouden van de ontvanger onder de neus-cone anesthesie.
- Invoering van een catheter in de femorale ader zoals hierboven beschreven. Injecteer 300-500 IU van ongefractioneerde heparine door de IV buis, en vervolgens spoel de buis met 3-5 ml zoutoplossing.
- Voer een laparotomie door een middenlijn abdominale incisie met een 22-scalpel blade van xiphisternum penis. Trek de buikwand met behulp van een zelf-behoud oprolmechanisme. Vervolgens trekken de darmen superieur en aan de linkerkant van de rat. Wikkel ze in warm, zoutoplossing gedrenkt gaas.
- Expose het IVC en abdominale aorta door scherp ontleden door de bovenliggende retro-peritoneale vet.
- Een gebogen vat klem beschikbaar en klaar.
- Omtrek gratis de IVC en aorta proximaal en distaal en omringen ze met 4-0 zijden dassen. Er moet ongeveer 2-3 cm ruimte tussen deze sites.
- Toepassing zorgvuldig de gebogen schip klem, ervoor te zorgen dat een voldoende deel van zowel IVC en de aorta boven de kaken van de klem worden blootgesteld.
- Een insnijding in de voorste wand van de IVC met een 25 G naald verbonden met een zoutoplossing gevulde 1 ml spuit. Verleng de incisie met Potts schaar om de lengte van de donor IVC opening passen.
- Verwijder de hart-long transplantaat uit de container en de stekker uit cardioplegie. Plaats het implantaat in de buik van de ontvanger in een optimale positie op het veneuze anastomose uitvoert.
LET OP: Het hart-long transplantaat zal uiteindelijk enigszins schuin georiënteerd, met de apex wijst naar de buik links onderste kwadrant. - Zet de hielen teen uiteinden van de anastomose met 9-0 nylon hechtdraad. Leg een stevige knoop aan elk uiteinde, waarbij de naald bevestigd aan een lange arm van hechtdraad en een korte stuk hechtdraad later worden gekoppeld aan. Dien een dosis van cardioplegie.
- In lopende mode, volledige helft van de hechtdraad lijn en stropdas naar de tegengestelde korte hechtdraad arm. Dien een dosis van cardioplegie.
- Voltooi de andere helft van de hechtdraad lijn en bind het naar beneden. De veneuze anastomose voltooid. Dien een dosis cardioplegia
- Richt de hart-long transplantaat met apex wijst het hart naar de buik links onderste kwadrant. Zorg ervoor dat de veneuze anastomose niet wordt geknikt of gedraaid.
- Beoordeel de lengte van de donor aorta die nodig zal zijn om de ontvanger aorta te bereiken, onderhouden zowel IVC en aorta anastomoses in spanningsvrij en un-geknikte configuraties.
- Verdeel de afdalende aorta (distaal links subclavia) met een irisschaar.
- Maak een incision in de voorwand van de ontvanger aorta met een 25 G naald verbonden met een zoutoplossing gevulde 1 ml spuit. Verleng de incisie met Potts schaar om de lengte van de donor aorta opening passen.
- Veranker de teen (superior aspect) van de donor aorta naar de ontvanger aorta met een 9-0 nylon hechtdraad. Vervolgens passeren de naald op de mediale zijde van de aorta en voltooi de helft van de anastomose bij lopende wijze.
- Op de hiel van de aorta anastomose, keren de oriëntatie van de hechtdraad lijn (een overgang in de richting van de stiksels), en voltooi de laterale helft van de anastomose in het runnen van de mode.
- Verwijder langzaam de IV katheter in de SVC, en ligeren van de SVC met een chirurgische clip.
- De lucht van de aorta door het lokaliseren van de VN-geknipt links gemeenschappelijke halsslagader. Houd de slagader geopend, rechtopstaand waarmee lucht vrij te evacueren.
- Open kort de kaken van de gebogen schip klem en laat de halsslagader te bloeden (de-air) voor 2 - 3 sec. Re-toepassing van het schip klem.
- Breng een chirurgische clip toe aan de halsslagader. Verwijder de gebogen schip klem.
- Controleer of bloeding op de hechting lijnen. Indien aanwezig, zachtjes compressie met chirurgische gaas of reparatie met een lengte van 9-0 nylon hechtdraad (afhankelijk van de ernst van bloeden).
- Het donorhart moet hervatten kloppen binnen enkele minuten.
- Let goed op de vitale functies van de ontvanger, de diepte van de anesthesie, en het volume reanimatie toedienen als dat nodig is.
- Afhankelijk van de experimentele eindpunten, ofwel sluit buik van het dier en het laten herstellen van verdoving, of bereid het dier cardiovasculaire assessment.
OPMERKING: Voorbeelden van graft evaluatie omvatten in vivo metingen van de belasting-afhankelijke en load-onafhankelijke hemodynamica, in vitro maatregelen van de functie in Langendorff en werken hart modi, en (in overleving chirurgie) echocardiografisch of MRI-onderzoek. - Bij deeinde van acute terminal experimenten, worden de dieren gedood door verbloeding.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
De HAHLT techniek die hierboven beschreven is zeer technisch en vereist veel aandacht voor detail. Tabel 1 highlights enkele van de belangrijkste factoren die samenhangen met succesvolle versus mislukte procedures, en kan worden gebruikt als leidraad voor het oplossen van technische problemen.
Nadat de ontvanger aorta ontspannen is, moet het implantaat coronaire arteriën zichtbaar te vullen met zuurstofrijk bloed. Bijgevolg moet het myocard roze en goed doorbloed worden. In technisch succesvolle experimenten, zal het hart beginnen te verslaan kort na transplantaat reperfusie. Het enten wordt achtergelaten in een onbelaste toestand (met de ontvangende IVC vastgeklemd) gedurende ten minste 20 - 30 minuten om voor functioneel herstel. Naar aanleiding van dat, kan het laden van de voorwaarden van het transplantaat's worden aangepast aan de experimentele doelstellingen aan te passen. Meer kwantitatieve metingen van transplantaatfunctie (en het welslagen) worden gebruikt zoals gewenst. Zoals vermeld in het protocol, in vivo in vitro functionele studies, evenals echocardiografische en MRI onderzoeken kunnen dergelijke informatie. Figuren 1 en 2 zijn voorbeelden van in vitro basislijn en voorgespannen-occlusiedruk-volumegegevens die acuut kan worden verkregen met deze methode. Hemodynamische gegevens van deze studies kunnen onderzoekers voorzien cardiac output, slagvolume, kamervolumes, hartslag, ejectiefractie, eind-systolische elastantie en preload recruitable slag werken. Verschillende andere parameters kunnen worden gekwantificeerd, zoals gewenst.
Figuur 1. Baseline Pressure-volume Data. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 1 toont de baseline drukUre-volume gegevens van een in vitro werken hart beoordeling van de hartfunctie. EDV, eind-diastolische volume; EDP, eind-diastolische druk; ESV, end-systolische volume; ESP, end-systolische druk.
Figuur 2. Preload-occlusie Pressure-volume Data. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2 toont preload-occlusiedruk-volumegegevens van een in vitro beoordeling van de werkende hart hartfunctie. EDPVR, end-diastolische druk-volume relatie; ESPVR, eind-systolische druk-volume verhouding.
| Succesvolle Procedure | Mislukte Procedure | |
| Schenker | ||
| Donor Stabiliteit | Stabiel | Wankel |
| Voorbereidende Dissection | Efficiënt, Limited | Inefficiënt, Overmatige |
| Blood Loss | Minimaal | Overmatig |
| Tijd om Explanteer | Geminimaliseerd | Langdurig |
| Cardioplegische Arrestatie | Snel | Vertraagd |
| Ent | ||
| Totaal ischemische Time | <90 min | > 90 min |
| Cardioplegische Arrestatie | Periodiek onderhouden | Incompleet |
| Ontvanger | ||
| Ontvanger Stabiliteit | Stabiel | Wankel |
| Voorbereidende Dissection | Doeltreffend | Ondoeltreffend |
| Clamp Times | <45 min | > 45 min |
| Anastomose Time | <30 min | > 30 min |
| Blood Loss | Minimaal | Overmatig |
| Graft-De luchten | Voldoende | Ontoereikend |
| Volume Reanimatie | Voldoende | Ontoereikend |
| Succesvolle Reperfusie | Ja | Nee |
| Terugkeer van Stable Cardiac Function | Ja | Nee |
Tabel 1. Kenmerken van succesvolle Versus Mislukte HAHLT Procedures.
Tabel 1 </ Strong> geeft voorbeelden van factoren die verband houden met de succesvolle en mislukte donor, graft, en de ontvanger operaties.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Succes met de hier beschreven techniek wordt beweerd van verschillende factoren. Key onder hen zullen zorgen voor stabiliteit van donor en ontvanger dieren, de vaststelling van nauwgezette operatieve techniek die veilig is en in verband met minimale bloedverlies, zorgen voor volledige cardioplegische arrestatie uniforme transplantaat koeling, het minimaliseren van de totale ischemische tijd en adequaat gede-luchten het transplantaat. Zoals hierboven erkend, technische complexiteit van de techniek is zijn belangrijkste beperking.
We hebben geavanceerde vorige HAHLT technieken in meerdere opzichten. De donor en de ontvanger handelingen beschreven modificaties verschaffen een middel voor het uitvoeren van noodzakelijke bewerkingsstappen op een gecontroleerde en efficiënte wijze. Het myocard bescherming protocol beschreven is een ideaal middel van het minimaliseren van de schade tijdens de ischemische periode. Het eindresultaat is een HAHLT graft waarin geometrie is geoptimaliseerd, is de schade geminimaliseerd en intrinsieke transplantaatfunctie is pre geweestdiende om zoveel mogelijk.
De hierboven beschreven techniek levert een HAHLT graft met dynamische en potentieel in de buurt-fysiologische ventriculaire-loading omstandigheden. Zodra de techniek is de knie, de configuratie transplantatie vergunningen volledig in vivo karakterisering van graft-functie. Zoals opgemerkt, kan de preload en afterload voorwaarden acuut of chronisch worden gewijzigd, en de donor longen kunnen worden acuut opnieuw geventileerd. Onderzoekers gemakkelijk en breed dit model toepassen op de studie van vele medische aandoeningen, met behoud van de mogelijkheid om graft constructie en functie te bestuderen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben niets te onthullen.
Acknowledgments
Mark J. Kearns krijgt steun van de UBC Clinician Investigator Program (uitgereikt door het Koninklijk College van Artsen en Chirurgen van Canada), en de UBC 4YF Doctoral Fellowship.
John H. Boyd is een Nationaal Sanatorium Association en Michael Smith Foundation for Health Research Scholar. Financiering door middel van CIHR. De auteurs willen dr M. Allard en Richard Wamboldt bedanken voor hun hulp bij de installatie en het onderhoud van perfusie apparatuur.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Celsior Cardioplegic Soution | Genzyme | The solution is kept on ice throughout the procedure. We prepare our own solution, with slight modifications. | |
| Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | Model 683 | |
| Vital Sign Monitor | Nonin | Model 9847V | Displays SpO2 and heart rate. |
| IV Cannulae | Jelco | 3063 | 24 - 26 G x 3/4" cannulae. |
| IV Tubing | CareFusion | MP9259-C | Short-length connector tubing (18 cm). |
| Surgical Clips | Teleflex Medical | 001204 | Horizon titanium ligating clips. |
| Sutures | Ethicon, Sharpoint | LA54G, AK-0107 | 3-0 silk reel, and 9-0 prolene suture (single-armed, DR5 needle). |
| Surgical Instruments | Not Applicable | Not Applicable | The instruments used are generic, and can be purchased from any surgical supply company. |
References
- Abbott, C. P., Lindsey, E. S. A technique for heart transplantation in the rat. Arch Surg. 89 (1964), 649-652 (1964).
- Ma, Y., Wang, G. Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart. Exp Clin Transplant. 9 (2), 128-133 (2011).
- Wiedemann, D., Boesch, F., Schneeberger, S., Kocher, A., Laufer, G., Semsroth, S. Graft function after heterotopic rat heart transplant with an isolated reperfused working heart: a methodic consideration. Exp Clin Transplant. 10 (2), 154-157 (2012).
- Chen, Z. H., Xia, S. S. The technique of heterotopic heart-lung transplantation in the rat. J Tongji Med Univ. 6 (2), 67-70 (1986).
- Ibrahim, M., Navaratnarajah, M., et al. Heterotopic abdominal heart transplantation in rats for functional studies of ventricular unloading. J Surg Res. 179 (1), e31-e39 (2013).
- Asfour, B., Hare, J. M., et al. A simple new model of physiologically working heterotopic rat heart transplantation provides hemodynamic performance equivalent to that of an orthotopic heart. J Heart Lung Transplant. 18 (10), 927-936 (1999).
- Figueiredo, J. -L., Nahrendorf, M., Sosnovik, D. E., Weissleder, R. MRI of a novel murine working heart transplant model. Circ Heart Fail. 2 (3), 272-274 (2009).
- Wen, P., Wang, X., et al. A simple technique for a new working heterotopic heart transplantation model in rats. Transplant Proc. 45 (6), 2522-2526 (2013).
- Didié, M., Biermann, D., et al. Preservation of left ventricular function and morphology in volume-loaded versus volume-unloaded heterotopic heart transplants. A.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 305 (4), H533-H541 (2013).
- Galiñanes, M., Zhai, X., Hearse, D. J. The effect of load on atrophy, myosin isoform shifts and contractile function: studies in a novel rat heart transplant preparation. J Mol Cell Cardiol. 27 (1), 407-417 (1995).
- Yokoyama, H., Ohmi, M., Murata, S., Nakame, T., Tabayashi, K., Mohri, H. Proposal of a working left heart model with a heterotopic transplantation technique in rats. J Heart Lung Transplant. 14 (4), 706-712 (1995).
- Maruyama, T., Swartz, M. T., McBride, L. R., Pennington, D. G. Working heart model of heterotopic heart-lung transplantation in rats. J Thorac Cardiovasc Surg. 107 (1), 210-215 (1994).
- Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).
- Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. J Vis Exp. (59), 3496-3410 (2012).
- Habertheuer, A., Kocher, A., et al. Innovative, simplified orthotopic lung transplantation in rats). J Surg Res. 185 (1), 419-425 (2013).
